文心兰花梗诱导及继代增殖培养

以文心兰的花梗腋芽为试验材料。选择适宜的灭菌方式,研究不同切割方式和激素浓度对继代增殖的影响。结果表明：适合文心兰花梗腋芽的灭菌方式是：将70％酒精倒入小烧杯浸泡30s,无茵水冲洗3次,倒入0．1％升汞浸泡约10min,再用无菌水冲洗5次,然后剥去外层包叶,切成1—2cm花梗腋芽接入培养基中。在继代培养中,只切去叶片2／3的情况下,培养基MS＋6-BA2mg／LI＋NAA1mg／L为佳。从生长点纵切的方式培养基宜用MS＋6-BA2mg／L。从生长点纵切的方法比只切去叶片2／3的方式增殖倍数较高。     

巴西橡胶树胚性组织长期继代保存及增殖技术

在橡胶树花药组织培养过程中,利用胚诱导过程后期产生的不同生理阶段的胚性组织进行继代增殖和成胚性研究,试验表明:1)心形胚及前期的胚性组织能继代增殖,多次继代增殖后的组织,经胚诱导过程1~3个月能成倍形成鱼雷胚,大大提高了橡胶花药组培的成胚率;2)胚性愈伤是适合长期继代和增殖保存的最好材料,经2a的继代保存增殖率和成胚率不下降,其最大继代增殖能力还在测试中;3)在继代增殖培养基上,胚性组织按原有形态增殖,通过选取同一生理阶段的胚性组织进行继代,可控制体胚发育过程,促进体胚发育同步进行。     

继代培养中离体甜菜的倍性变化与增殖

用卡宝品红法检测了不同来源离休甜菜的不同器官在不同年度间细胞焙性的变化。并统计分析了年度间变化的差异显著性及不同倍性优势细胞比率与增殖能力之间的相关性，结果表明，甜菜离休植株茎尖细胞倍性在继代培养中相对稳定，而根尖细胞倍性在年度间有显著变化。由未授粉胚珠培养再生的胚性细胞团，其细胞染色体容易自然加倍；再生的单倍体植株，其茎尖细胞为单倍体，而根尖细胞为二倍体。在所测年度内，离体甜菜细胞倍性的变化对其增殖能力无明显影响。通过茎尖和不断选择培养是离休甜菜保持遗传稳定性的有效手段。     

水稻稻瘟病抗性鉴定用菌株继代培养遗传变异研究

稻瘟病是最主要的水稻病害之一,人工接种鉴定是稻瘟病抗性鉴定的主要手段。接种鉴定用稻瘟病菌在继代培养过程中时常发生变异,为了解其变异特点,本研究通过在CM完全培养基和燕麦培养基中连续对10个稻瘟病菌田间菌株继代培养10代,对其每代的产孢量、菌落形态、生理小种及对24个丽江新团黑谷(LTH)单基因系致病性变化进行研究。结果表明,随着继代代数增加,多数菌株在第5代产孢量、生理小种及致病性都发生了部分变异,10个菌株中有6个菌株在第5代生理小种已发生变异,特别是菌株P10由ZA种群转变为ZC种群;菌株P3、P5和P8的生理小种从始至终没有变化,但菌株P3和P5对部分单基因系的致病性已发生改变。因此,在选择菌株进行稻瘟病抗性鉴定时,菌株继代应少于5代,尽量用原始菌株。     

继代培养对玉米大斑病菌生长、发育和致病性的影响

经连续单孢分离和培养,获得玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)的22次继代培养菌株.前13代菌株没有明显的生长和发育变化,从第14代开始,继代培养对病菌的生长和发育存在显著影响.随继代次数增加,菌丝生长速度变慢,产孢量下降,分生孢子变小,致病性显著降低,表现出明显退化现象.随着继代培养,菌丝呈变粗趋势.     

甘蔗栽培种的组培快繁技术研究

对三个甘蔗栽培种建立了一套有效的快速繁殖技术：切取甘蔗梢尖外植体0．5-1．0cm置于外加：IAA0．5mg／l，BAP0．5mg／l，含有10％椰乳和0．1％PVP的激动素0．5mg／l的MS液体培养基上进行培养，每隔三周将产生的苗丛(具有4—8个芽)置于外加IAA0．1mg／l、BAP2．0mg／l和激动素1．0mg／l的MS液体培养基上进行继代培养以快速繁殖绿苗。把这些快繁的苗丛转移到含有NAA2mg／l和IBA31．0mg／l的1／2MS液体培养基上连续摇荡进行生根诱导。把生根的植株种植于椰子泥炭土中，然后置于温室进行炼苗，成活率为86％。     

椰乳在甘蔗组培快繁中作用的研究

以种性优良但组培分化斟难的3个甘蔗品种FN95-1702、FN99-2308和FN99-20169的愈伤组织为材料,以2种常用的培养基为基本培养基,分别添加4种不同体积的椰乳,采用随机区组实验设计,进行分化阶段和生根阶段培养,并对移栽幼苗成活率进行了观察.结果表明:对于不同激素配方的培养基,在分化阶段添加椰乳后甘蔗愈伤组织的分化率和芽长势均明显提高,添加椰乳的适宜体积为10%～20%,其中,以15%为最佳添加体积,可使分化率提高100%.幼苗生根阶段,添加椰乳使幼苗生根的数量减少,对移栽成活率影响不明显.不同甘蔗品种适合的培养基略有差异,实验所选用的2种培养基与椰乳之间无交互作用.     

红锥组织培养与快速繁殖的研究

以红锥茎段为外植体, 研究了不同激素对其再生体系建立的影响。结果表明：最适诱导培养基为 BMT＋6-BA 0.3 mg/L＋NAA 0.25 mg/L,诱导率达到了85%;最适增殖培养基为BMT＋6-BA 0.3 mg/L＋NAA 0.5 mg/L,芽增殖系数3.58,且生长健壮;单芽在1/2 BMT＋IBA 1.5 mg/L＋IAA 0.3 mg/L培养基上生根效果好,生根率82%;炼苗成功后移栽成活率达90%以上。     

油菜素内酯应用于甘蔗组织培养快繁的研究

为了研究油菜素内酯（brassinolide, BL）对甘蔗组织培养的影响,本研究以“植物器官从头再生”“体细胞胚再生”2种组培快繁体系为基础,通过添加适宜浓度的2,4-表油菜素内酯（2,4-epibrassinolide, 2,4-EBL）于基础培养基中,设计了6套适用于甘蔗快繁的组合培养基方案。并于不同诱导阶段（不定根诱导、愈伤组织诱导、成苗诱导）对接种材料的形态特征及内源植物激素（油菜素内酯、玉米素核苷、生长素、脱落酸）的含量变化进行了统计与测定,探讨了油菜素内酯应用于甘蔗组织培养快繁技术的可行性。结果表明,将不定根培养基MS + 0.2 mg/L 2,4-D + 0.2 mg/L LFS与成苗培养基MS + 0.5 mg/L KT +（0.2 mg/L IBA / 0.2 mg/L 2,4-EBL）+ 300 mg/L Pro进行组合,为甘蔗组培快繁的较优方案,油菜素内酯可应用于甘蔗组织培养快繁技术,且体细胞胚再生成苗优于愈伤组织再生成苗,成苗时间可缩短至32 d。     

复合型抑菌剂在甘蔗开放式组培中的应用研究

以“黔糖5号”甘蔗腋芽外植体为材料,将不同浓度的“黔兴1号”抑菌剂加入甘蔗培养基中,确定“黔兴1号”抑菌剂作为甘蔗开放式组织培养抑菌剂在甘蔗诱导及增殖培养阶段的最佳浓度。结果表明,“黔兴1号”抑菌剂浓度在0.5%时可有效抑制培养基的污染,外植体的成活率高达80%,芽增殖系数为3.1。     

甘蔗组培苗2种污染细菌的分离与鉴定

细菌污染是甘蔗组培苗生产上的一个主要问题.为明确甘蔗组培中常出现的污染细菌的种类,本研究通过梯度稀释的方法分离污染细菌,结合生化特性、16S rRNA和phaC基因序列比对及系统发育分析鉴定其分类地位.结果表明,共分离获得2种不同类型污染细菌,除了甘露醇,其余9个生化指标完全一致.基因序列比对发现,2种类型分离物的种内...     

香蕉横切薄层切片芽分化的培养技术

以香蕉横切薄层切片为材料,研究了不同因素对薄层切片芽分化的影响。结果表明:利用横切薄层培养技术能更有效、快速地进行香蕉的无性繁殖;TDZ（英文名为Thidiazuron,N-pheny-N’-1,2,3.-thia-diazol-5-ylurea,中文译为苯基噻二唑基脲）对香蕉薄层切片芽的分化有抑制作用,没有得到生长正常的不定芽;横切薄层切片在暗培养且培养温度为30℃时比25℃有较高的不定芽分化率,不定芽分化能力强,丛芽多;蔗糖和AgNO3对薄层切片芽分化有一定的影响。      

抗花叶病转基因甘蔗安全性评价

根据国内外研究进展与本实验室的最新研究成果,综述了甘蔗抗花叶病转基因甘蔗的食品安全、土壤生态安全、基因漂移、病毒的异源包装和重组、转基因杂草化等方面的研究进展.     

广西甘蔗花叶病SCMV调查初报

为探明甘蔗花叶病SCMV在广西蔗区的发生情况,给甘蔗健康种苗生产提供科学依据,从广西各主要蔗区对不同品种采集表现花叶症状的甘蔗样品,采用1对病毒CP基因引物(SCMVF4:5′-GTTTTYCACCAAGCTGGAACAGTC-3′;Y=CorT,SCMVR3:5′-AGCTGTGTGTCTCTCTGTATTCTC-3′),进行一步法RT-PCR检测。结果表明:69.4%的样品为阳性。选取8份代表性样品,对经SCMVF4/SCMVR3扩增获得的病毒CP基因片段进行直接测序,所得序列经Blast比对确认均为SCMV CP序列。在所调查的品种中,主栽品种ROC22最易受SCMV侵染,其它台糖系列如台糖16、台糖28、台糖95-889、台优,柳城03-182、柳城03-1137及广西甘蔗研究所许多品系均检测到SCMV。目前甘蔗花叶病SCMV已在广西主要蔗区普遍发生。     

海南50个甘蔗品种黄叶病毒的分子鉴定

为明确国家甘蔗体系集成示范及区试甘蔗品种在海南省被甘蔗黄叶病毒(SCYLV)侵染情况及病毒基因型类型,从集成示范及区试的50个甘蔗品种上采集带有显著病症或不显病症样品50份,采用特异引物通过RT-PCR方法进行甘蔗黄叶病毒检测和病毒基因型鉴定。结果表明:50个甘蔗品种中有31个被检测到SCYLV,检出率为62%;病毒基因型有古巴(CUP)基因型、巴西-秘鲁(BAR-PER)基因型和留尼汪岛(REU)基因型3种,主要以CUP基因型为主,占58.06%,其次是BAR-PER基因型,占51.61%,REU基因型最少,占29.03%;未发现CHN1、CHN2、CHN3基因型。另外,不同基因型混合侵染现象普遍存在,总混合侵染率达32.26%。可见,海南国家甘蔗体系集成示范及区试甘蔗品种严重感染甘蔗黄叶病毒(SCYLV),且存在不同基因型混合侵染,建议推广种植脱毒种苗来控制甘蔗黄叶病的发生。本研究为在海南蔗区推广和种植甘蔗脱毒种苗及抗病育种提供了理论支持。      

山奈组织培养

以山奈的带芽块茎为试验材料,研究其表面消毒的方法和不同配比培养基对山奈块茎诱导、增殖以及生根的影响.结果表明:外植体表面消毒采用体积分数75%酒精消毒1 min,无菌水漂洗1次,然后用质量分数0.1%升汞浸泡10min,无菌水漂洗2次后,再用0.1%升汞浸泡6min,无菌水漂洗4次效果为最佳,污染率可降至6.67%;适宜的诱导培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,芽的萌发率达100%,分化率达146.67%;增殖培养基以MS+6-BA3.0 mg/L为最好,增殖倍数可达6.1倍;适宜的生根培养基为MS+NAA0.1 mg/L.生根率可达100%;试管苗移栽到疏松透气的基质中即可,成活率可达93%.