病毒性腹泻-粘膜病病毒实验感染绵羊及其血清中和抗体的消长规律

将6只8月龄公绵羊随机分为2组,分别经肌肉注射和滴鼻两途径,每只羊给予BVD/MDV长春184毒株第14代肾细胞培养毒澄清液20mL。结果,两种途径感染羊皆出现牛粘膜病的类似症状,并产生明显的抗体反应,中和抗体消长规律因接种途径不同而有所差异。感染羊在接种后第2周产生抗体,10～15周抗体滴度达到高峰,在1:160以上至少能持续11～17周。肌注组抗体产生较早,升高较快,持续时间短,至第27周抗体降至1:20。滴鼻组抗体升高较缓慢,持续时间较长,至第27周抗体滴度仍在1:160以上。实验还证明,BVD/MDV长春184毒株及Oregon毒株均能在MDBK、BT及牛睾丸细胞上繁殖,并有明显的细胞病变。     

接种传染性法氏囊病基因工程重组亚单位油乳剂疫苗的产蛋鸡血清抗体与蛋黄抗体的相关性分析

用笔者研制的传染性法氏囊病(IBD)基因工程重组亚单位油乳剂疫苗免疫产蛋鸡,接种后第22d及以后每周进行一次无菌采血,分离血清,用琼脂免疫扩散试验(AGID)检测IBD血清抗体水平;每周用同样的方法检测蛋黄中IBD抗体水平。对血清抗体水平和蛋黄中抗体水平进行相关性统计分析,得出两者之间的相关系数,并进行显著性检验。统计分析结果表明,相关系数r=0.7782,表明血清抗体水平和蛋黄中抗体水平相关关系属于强正直线相关;t值为14.02,t>t(∞)=2.576,差异极显著(P<0.01),即血清抗体水平和蛋黄中抗体水平之间的相关系数极显著;F值为190.55,F>F0.01(1,128)=6.84,差异极显著(P<0.01),即血清抗体水平和蛋黄中抗体水平之间的相关关系极显著。     

利用SUMO表达系统高效表达猪O型口蹄疫病毒VP0、VP1、VP3基因

根据GenBank中公布的猪O型口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)全基因合成了FMDV结构蛋白前体蛋白P1基因,同时设计了扩增FMDV结构蛋白VP0、VP1和VP3基因的引物。以P1基因为模板,分别经PCR扩增获得FMDV VP0、VP1和VP3基因。扩增产物克隆于Blunt载体中,酶切后将目的片段连接到原核表达载体SUMO中,构建重组表达质粒SUMO-VP0、SUMO-VP1和SUMO-VP3,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS进行诱导表达。经SDS-PAGE电泳可见融合蛋白均获得高效表达,融合蛋白表观分子质量分别约为55、48和40 ku。在IPTG浓度为1.0 mmol/L,温度为37 ℃,诱导5 h时融合蛋白表达量最大。Western blotting结果表明,融合蛋白均可被FMDV阳性血清识别,反应原性良好。