韭菜绵疫病病原鉴定及其主要生物学特性

报道了广西柳州发生在韭菜上的一种新病害,病原菌经分离、培养、形态学观察和生理生化测定,鉴定为樟疫霉P hy tophthora cinnam om iR and。该菌在胡萝卜培养基上生长最茂盛,生长的最适温度为28~31°C。     

稻瘟病菌粗毒素产生的影响因素探讨

用抑制胚根生长法测定６种因素对稻瘟病菌产生毒素量的影响。结果表明，菌株间的产毒量有明显差异；最适宜的产毒条件是：选用马铃薯、蔗糖培养基，ｐＨ值在５～６，温度为３０℃，每天光暗各１２ｈ，摇动培养。     

一株烟草青枯拮抗细菌的筛选、鉴定和培养特性研究

为烟草生物肥料的研制和生产提供优良菌株资源,筛选可有效拮抗烟草青枯病原菌的菌株,优化其培养条件,确定其分类地位。采用抑菌圈测定法从高粱根际土中筛选烟草青枯拮抗菌株,并对其单因素液体拮抗条件进行优化,通过其表型特征、生理生化特征和遗传特征等多相分析来确定其分类地位。获得一株对烟草青枯病原菌具有较好拮抗效果的细菌 MT-002-B-7,抑菌圈直径可以达到 28 .67 mm,该菌的液体最佳发酵条件为以葡萄糖为碳源,以谷氨酸为氮源,装液量 10%,培养基初始 pH值为 7 .0,接种量3%,温度 35℃,转速 150r/min,培养25 h。鉴定结果表明该菌为铜绿假单胞菌。该菌株对烟草青枯病原菌拮抗效果良好,可作为研制烟草生物肥料的菌株资源。     

高效聚磷菌株GM1的分离和聚磷特性研究

采用纯培养结合蓝白斑筛选法从土壤中筛选到一株高效聚磷菌,初步鉴定为费氏柠檬酸杆菌属(Citrobacterfreundii),命名为GM1。GM1在LB、YG和MOPS培养基上均可正常生长,其生长pH在5·5至8·5之间,最适生长pH为7·5。该菌在不同的培养基上最适生长温度不同,在LB培养基上为37℃,YG和MOPS-葡萄糖培养基上为30℃。在好氧条件下MOPS培养基培养24h后,GM1菌体含磷量为11·5%;上清液磷浓度由43·8mgL-1下降为14·7mgL-1,磷去除率达69%,poly-P染色显示菌体中有异染粒。GM1具有较强的聚磷能力。     

苹果树腐烂病病原菌培养条件研究

在不同培养条件下对苹果树腐烂病病原菌生长情况进行了研究。结果表明,在试验改造条件下苹果树腐烂病病原菌生长最好的培养基为PDA,其余依次为苹果树皮、苹果果汁、玉米粉培养基,在查比克培养基上生长最差。病原菌可利用多种碳源和氮源,以麦芽糖或淀粉为碳源时生长好于葡萄糖,在几种不同碳源培养基上生长差异不显著。光照对病原菌的生长也有一定的影响,前期是12 h光照交替培养生长最快,全光照次之,到96 h时两者差异不显著,但均显著好于全黑暗。生长的最适pH为 4和5,随pH增大生长变差,pH≥9时不能生长。     

番茄内生拮抗细菌的分离鉴定及培养条件研究

针对番茄生产上灰霉病和叶霉病两大瘸害,为寻找安全、高效无污染的生防菌株及其最佳培养条件,本试验采用组织分离法从健康的番茄植株中分离出642个内生细菌菌株,并采用平板对峙法筛选出对番茄灰霉病菌和叶霉病菌拮抗作用强且稳定的两个菌株Thyy1和Jcxy8。通过形态学观察及生理生化特征测定,初步鉴定Jcxy8属环状芽孢杆菌（Bacillus circulans）,菌株Thhy1属枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。内生拮抗细菌在以豆饼粉为原料的6号培养基中生长速度快,发酵滤液对两种病原菌的抑制作用强。培养基初始pH值、培养时间、温度、通气量等对菌株生长及其抗菌物质的分泌有明显影响。以豆饼粉培养基、初始pH6．7、培养时问48h、温度30qc、并尽量增大培养通气量为菌株的最佳培养条件。     

印度梨形孢诱导烟草对黑胫病的抗性及其机理的初步研究

印度梨形孢(Piriformospora indica)是分离自印度塔尔沙漠的植物根系内生真菌,能够诱导多种植物对生物和非生物逆境产生抗性,目前已作为一种模式真菌用于内生真菌与植物互作关系的研究。为了研究印度梨形孢对烟草(Nicotiana tobacum)抗黑胫病的影响,本研究采用烟草疫霉菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)分别接种根部有印度梨形孢定殖与未定殖的烟草,观察接种后根部有印度梨形孢定殖与未定殖的烟草发病情况,测定抗病相关防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性变化及抗病相关基因的表达量,并通过平皿对峙试验研究印度梨形孢对烟草疫霉菌生长的影响。结果表明,接种烟草疫霉菌后,根部有印度梨形孢定殖的烟草发病严重度要显著低于对照;接种烟草疫霉菌后第1~10 d,根部有印度梨形孢定殖的烟草叶片中防御酶PAL、POD和PPO活性高于对照,在第1 d,PAL活性是对照烟草的3.99倍,在第2 d,POD活性是对照烟草的1.5倍,在第4 d,PPO活性是对照烟草的2.66倍;实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,q RT-PCR)结果显示,接种烟草疫霉菌后第6~96 h,根部有印度梨形孢定殖的烟草叶片中抗病相关基因PR1b、P450-2、hrs203J、Nm IMSP和P450-1的表达量高于对照;在第12 h,PR1b、P450-2、hrs203J的表达量分别是对照烟草的3.8、15.7和3.1倍,在第48 h,Nm IMSP的表达量是对照烟草的2.6倍,在第72 h,P450-1的表达量是对照烟草的1.5倍;平皿对峙试验结果显示印度梨形孢对烟草疫霉菌的生长没有抑制、重寄生作用。研究结果表明,印度梨形孢可显著提高烟草对黑胫病的抗性,对黑胫病的抗性不是通过印度梨形孢分泌的抗菌物质实现的,是与烟草中抗病相关基因表达量的上升、防御酶活性的提高有关。本研究初步揭示了印度梨形孢诱导烟草抗黑胫病的相关机理,为进一步深入研究烟草黑胫病的生物防治及其机理提供基础资料。     

平菇P1培养条件优化及其黄曲霉毒素降解酶的初步分离

前期筛选获得了可降解黄曲霉毒素的平菇P1,为进一步提高其降解能力,通过优化平菇P1的培养条件,确定在培养温度30℃、转速200 r·min-1、培养基pH值6.0的条件下培养10d时,平菇P1发酵液降解黄曲霉毒素B1的效果最好,此时790μL平菇P1发酵液可以将1 000 ng黄曲霉毒素B1降解到175.7 ng,降解率达到82.43%。除了可以高效降解黄曲霉毒素B1,平菇P1发酵液还可有效降解黄曲霉毒素B2、G1和G2。平菇P1发酵液对黄曲霉毒素的降解是由多种酶参与的,它们之间存在累加效应。这一研究结果将为典曲霉毒高效降解酶的研制提供基础。     

pH胁迫下尖孢镰刀菌生长动力学模型

尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是兼性寄生真菌,引起农作物枯萎病,防治困难。研究来自不同寄主的尖孢镰刀菌在不同pH马铃薯蔗糖(PS)琼脂培养基上的生长情况,构建动力学模型,以了解培养基的初始pH差异对尖孢镰刀菌生长特性的影响。测定了尖孢镰刀菌菌株在不同pH培养基、25℃培养条件下的生长速度,构建生长动力学模型。供试6个尖孢镰刀菌菌株在pH为3~10的液体培养基中均有不同程度生长,不同菌株对培养基pH的影响规律相似,在不同pH的PS液体培养基中培养14 d后,液体培养基的pH均有靠近6~7的趋势。在pH为3~9的培养条件下,尖孢镰刀菌菌落可以分成4类:菌丝型、粘滑层型、菌丝粘滑层型和菌丝带粉状物,各菌株的菌丝和培养基色泽也有所差异。同一菌株在培养基不同pH下生长速度不同,其生长的最适pH为6~8,菌落平均直径最大(45~49 mm),亚适pH为4、5和9;而在pH为3、10和11时菌落直径明显变小(17~21 mm)。培养14 d后培养基pH对菌落形态、色泽有一定的影响,不同菌株在不同pH培养基培养下产孢量也存在差异。pH在4~8时其平均产孢量最大,达(223.8~273.3)×104cfu.mL 1,其中pH为6.38(自然pH)时产孢量最高,pH为11时产孢量最低。供试菌株在不同pH条件下的菌落生长速度和产孢量变化动力学模型均符合二次曲线方程。     

平菇液体种的应用试验

本试验目的在于探索平菇液体种的应用范围和条件。应用正交试验法筛选出液体培养基的最佳配方,在设计的条件下,影响平菇菌丝生长的主要因素和最佳含量是:白糖2％,麦麸10％,pH6;在摇瓶振荡培养中,用液体种比斜面种移接的菌丝体生长明显加快2天以上;用摇瓶种移接固体培养料培养栽培种和接种到栽培料直接栽菇都获得成功,说明液体种应用于平菇制种与栽培是可行的,它具有省工、省时、省料、高产的特点,适于工厂化生产。     

高产漆酶平菇的筛选及其在降解黄曲霉毒素B1中的应用

通过选择培养基平板培养法和液体发酵培养法筛选得到2株高产漆酶的平菇菌株P1和P2,并对平菇菌株产漆酶的培养基进行筛选,得到产漆酶的最适培养基为最低盐MSM培养基。菌株P1不仅产漆酶能力最高,而且降解黄曲霉毒素的能力也最好。在MSM培养基中培养10d时,产漆酶量高达769.44U/L,在800μl的反应体系中,790μl粗酶液可以将1000ng黄曲霉毒素B₁降解到222.62ng,降解率为77.74%,并且平菇粗酶液降解黄曲霉毒素B₁的能力与其中漆酶的含量呈一定的正相关性。     

γ辐照与赤霉毒素复合处理对小麦幼胚离体培养的影响

本实验采用＾６０Ｃｏγ辐照与小麦赤霉菌粗毒素的多种剂量组合，研究复合处理对小麦幼胚离体培养的影响。结果表明，γ辐照与毒素处理能降低愈伤组织诱导率，接种后第４０天，愈伤组织存活率及愈伤组织生长量亦降低。但５０Ｇｙ辐照对愈伤组织生长有一定刺激效尖。复合处理剂量效应方程多为二元多项式。１００ｍｌ／Ｌ毒素培养基上得到的再生植株，其苯丙氨酸裂解酶活性显高于无毒培养基上得到的对照。     

水稻田土壤中占优势的微生物种类

我们观察到,虽然土壤中微生物的种类很多,在一定条件下只有少数种类占优势。制备一定土样的营养冻粉平面培养,常见到在最高稀释盘中只有一种或少数几种占80%以上。如果用选择培养基来分离培养一定生理羣,也常见到一种或少数几种在最     

一株阿特拉津高效降解菌的分离与鉴定

在河北省宣化农药厂附近的土样中筛选到一株阿特拉津高效降解菌,高效液相色谱定量检测,证明降解率在99%以上,编号为ADX10,并对该菌进行了鉴定。结果表明,ADX10在LB培养基上产生光滑、圆形、微小、凸起的菌落,培养过程中产生柠檬绿色色素,幼体菌为短杆状(0.5~0.6μm×0.8~1.2μm),老龄培养物为球状,革兰氏染色为阳性,但极易退色,接触酶阳性,氧化酶阴性,液化明胶,脲酶阴性,不水解淀粉,不产生芽孢,37℃生长,好氧生长,对多种抗生素有抗性。16S rDNA聚类分析结合生理生化特性,将该菌株定为Arthrobactersp.。     

产ACC脱氨酶植物根际促生菌的筛选及其对修复植物高羊茅生长的影响

以1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)为唯一氮源,从石油污染的土壤中分离得到一株具有ACC脱氨酶活性的菌株D5A.该菌在以ACC为唯一氮源条件下,其ACC脱氨酶比活力为0.084 U/mg.另外,D5A还具有产生吲哚乙酸(IAA)、耐盐以及溶磷的特性.在液体培养条件下该菌株产IAA高达112 mg/L,在90 g/kg盐含量的培养基中仍能够正常生长且具有较强的溶解矿物磷能力.同时该菌对酸碱具有良好的适应性,在初始pH4～10的LB培养基中生长良好.种子发芽试验表明在3 g/kg和6 g/kg浓度NaC1的逆境条件下,该菌株能显著提高高羊茅种子的发芽率和芽长.最后,通过对其进行生理生化特性和16S rDNA序列分析,该菌株初步鉴定为克雷伯氏菌(Klebsiellasp.).     

梨火疫病菌luxR转录调节因子的克隆与功能分析

梨火疫病菌(Erwinia amylovora)是一种具有毁灭性的植物病原细菌,能够侵染梨、苹果和其他蔷薇科植物引起火疫病,造成严重的经济损失。luxR家族调控因子具有重要的生理生化作用,是细菌群体感应机制中研究较多的一类重要的转录调节基因。本研究采用PCR技术从梨火疫病菌中扩增出一个luxR同源基因,命名为EaluxR,应用同源重组的方法构建了突变株(EaΔluxR),并对其功能进行初步研究。实验结果表明,EaΔluxR与野生型菌株相比产生的多烯大环内酯类代谢产物在抗氧化压力和生长情况方面有明显差异,对梨幼苗及幼果的致病能力下降;但是EaΔluxR仍能引起烟草过敏性反应,并且在抗生素耐受水平和生物膜的生成方面与野生型菌株相比没有明显差异。研究表明,梨火疫病菌对病菌的生长、次级代谢产物、抗氧化压力以及致病性方面具有关键作用,为深入认识梨火疫的群体感应系统提供了科学依据。     

不同理化因子对三分三毛状根生长及其莨菪碱含量的影响

为了探讨各种理化因素对三分三(Anisodus acutangulus)毛状根生长及其莨菪碱合成的影响,本研究采用液体培养方法,分别探索了不同基本培养基、碳源、生长调节物质、pH、温度和光照对三分三毛状根生长及其莨菪碱形成的影响。结果表明,B5培养基是三分三毛状根生长和莨菪碱形成的最适培养基,以其作为基本培养基,在pH 6.5、温度为25℃和光周期为18 h/d的条件下有利于毛状根生长和莨菪碱的形成;在碳源浓度为1%～7%范围内,5%蔗糖对毛状根生长效果较好,但莨菪碱含量随碳源浓度升高而降低;0.05 mg/L的NAA、IBA和2,4-D均可促进毛状根生长,但这类生长调节物质无论浓度高或低,均强烈抑制莨菪碱的形成。研究这些理化因素的影响可为三分三毛状根培养条件的优化和莨菪碱的大规模生产提供科学的参考依据。     

主要环境因子对两株松树外生菌根真菌生长的影响

研究了培养基、pH、温度及水势对松林下常见外生菌根真菌牛肝菌(Boletus sp.)和乳菇(Lactariussp.)生长的影响。结果表明,在所选择的培养基上,两种菌株都能生长,在添加维生素类物质的天然培养基上,生长旺盛;对pH适应范围较广;L.sp.在弱碱性条件下生长较好,而B.sp.在弱酸性条件下生长较好;温度对菌株生长影响较大,两种菌株最适生长温度均为25℃;极端水势条件下,L.sp.和B sp.均不能生长,轻度水分胁迫能促进L.sp.和B.sp.的生长。L.sp.是一种适应性较强的菌株。     

氯化胆碱对马铃薯组织培养苗生长的影响

在组织培养中应用氯化胆碱(CC)的,最早有高国楠和Michayluk在其专供低密度原生质体使用的8p培养基中加有CC,但对其在培养细胞中的生理作用并不清楚。至于CC对体外组培苗生长的影响尚罕见报道。本文报道CC对马铃薯组培苗某些生理指标的影响。1 材料和方法供试材料为马铃薯(Solanum tuberosum,品种为朝鲜9—1号)组织培养苗。以MS培养基为基本培养基,不加其它生长调节剂,只分别附加100,200,300和400ppm氯化胆硷,     

毛叶枣灰霉病的病原鉴定及其生物学特性研究

毛叶枣灰霉病菌是半知菌类葡萄孢属灰葡萄孢Botrytis cinerea Pers．。病菌生长、产孢的最适培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）；该菌的生长温度范围是5～28℃，产孢温度范围是5～20℃，最适于菌丝体生长、产孢和孢子萌发的温度分别为20℃、15℃和20℃；病菌在pH值3～9时均能生长和产孢，最适pH值为5～6，其孢子萌发的pH值范围是2～10，最适为5～6；在饱和湿度下孢子才可萌发；马铃薯葡萄糖液和枣叶汁可显著促进分生孢子萌发。