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为了解新疆某规模化猪场猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV-3)的流行现状、分子生物学特征和遗传演化规律,试验应用巢式PCR技术对新疆某规模化猪场的45份血液样本进行PCV-3基因检测和测序;利用TempliPhi 100 amplification Kit对检测到的PCV-3阳性样本进行全基因组扩增,将扩增得到的基因组片段克隆到Trans-T1载体中,经测序、拼接获得PCV-3基因组全长序列;利用MEGA 6. 0. 6和MegAlign软件对其全基因组进行遗传进化分析和同源性比较。结果表明:在新疆地区首次检测到PCV-3,且该猪场PCV-3的阳性率为20%(9/45),并获得PCV-3全基因组序列,长度为2 000 bp,命名为PCV-3/CN/Xinjiang-11/2018;与美国株PCV-3-US-SD 2016处于同一进化分支,属于3b亚群;与国内PCV-3/Pig/CN/Hebei20170320的同源性最高(99. 4%),与PCV-3-CN/Fujian-820-2016和PCV-3-CN/Fujian-318-2017的同源性最低(97. 8%),与国外美国株PCV-3-US-SD 2016的同源性最高(99. 1%)。说明新疆地区猪场已经存在PCV-3,应该引起养猪业的重视。 相似文献
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2010年以来,猪流行性腹泻病毒(PEDV)GⅡ型变异毒株的出现,导致全世界范围内猪流行性腹泻(PED)的病死率显著增加。疫苗免疫是PED有效防控的重要策略之一,疫苗诱导的中和抗体水平是免疫效果评价和疫苗质量评估的重要指标。然而,在Vero-CCL81上开展的PEDV经典中和试验中所添加的胰酶会导致试验结果不稳定等问题。本研究拟在构建稳定表达绿色荧光蛋白的重组病毒基础上,建立一种能准确评估样品中和抗体的检测方法。本研究在pUC57载体上克隆插入GⅡb亚型PEDV-GDU株部分ORF1a和ORF1b基因片段与其他结构基因片段,并通过无缝克隆技术将ORF3基因替换为EGFP基因,构建辅助质粒pUC57-PEDV-GDU-dORF3-EGFP,通过RNA定向重组技术拯救重组荧光病毒rPEDV-GDU-dORF3-EGFP。进一步通过间接免疫荧光试验(IFA)、Western blot和病毒生长曲线测定等方法,比较重组荧光病毒和亲本病毒生物学特性。最终利用重组荧光工具病毒筛选在不添加胰酶的条件下仍能支持PEDV有效增殖的细胞系,并建立中和试验方法。结果表明,成功拯救重组荧光病毒rPEDV-GD... 相似文献
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近日,日本学者从3头患有腹泻和2头健康的3月龄猪粪便中分离到呼肠孤病毒株OS-320至OS-324,通过交叉中和试验,把分离物分类为呼肠孤病毒Ⅱ型。血凝试验表明,分离物与其它的呼肠孤病 相似文献
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用PCR方法检测猪圆环病毒Ⅱ型 总被引:26,自引:2,他引:26
建立了一种能特异性地扩增猪圆环病毒 型 (porcine circovirus type 2 ,PCV- 2 )核酸片段的 PCR方法 ,从疑似断奶猪多系统衰竭综合征 (PMWS)的感染病例的淋巴结和脾脏中扩增出了预期长度的 PCV- 2 DNA片段 ,用限制性内切酶 Eco R 酶切鉴定了 PCR产物的特异性。 PCR产物的核苷酸序列分析表明 ,与已报道的 PCV- 2 (Gen Bank Ac-cession num ber AF0 2 72 17)相关区域的核苷酸序列同源性均大于 96 %。首次证实了我国猪群中存在 PCV- 2感染的PMWS。 相似文献
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《中国兽医杂志》2020,(4)
为了在临床上能够同时、快速、准确的检测Ⅱ型猪细环病毒(TTSuV2)和Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2),本试验根据GenBank上公布的TTSuV2和PCV2序列中的高度保守片段设计引物,并分别合成标记羧基荧光素试剂(FAM)和六氯荧光素(HEX)报告基团的探针,建立双重荧光定量PCR检测方法,并对该方法的灵敏度、稳定性和特异性进行评价。结果显示,建立的双重荧光定量PCR检测方法对TTSuV2和PCV2的最低检测浓度均为1×10~2拷贝/μL,与猪源的其他病毒性病原体无交叉反应。应用建立的检测方法对采集的300份病料样品进行检测。结果显示,PCV2单独感染率为36.0%,TTSuV2单独感染率为60.0%,2种病毒混合感染率为14.8%。表明本试验建立的双重荧光定量PCR检测方法比普通PCR更加敏感,可应用于临床检测TTSuV2和PCV2,并可分析TTSuV2和PCV2的载量与相关疾病的关系。 相似文献
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《养殖与饲料.饲料世界》2017,(11)
根据猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因的保守序列,设计一套特异性环介导等温扩增引物,经过各种条件的优化,建立了PCV2的可视化LAMP检测方法。结果表明,所建立的方法敏感性高达1 fg;无需昂贵仪器,只要在常规水浴锅63℃50 min就可以通过肉眼观察颜色直接判定;特异性强,与其他病原无交叉反应。此方法简便、特异、快速、灵敏,适合养殖场或县级及以下基层兽医用于猪圆环病毒Ⅱ型感染的快速检测与诊断。 相似文献
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猪圆环病毒感染是由猪圆环病毒(porcine clrcovirus,PCV)引起猪的一种传染病,主要导致猪体的免疫抑制,使其它疫苗的免疫应答失败,从而继发或并发其它细菌性疾病,增加疾病的治疗难度,给养猪业造成巨大的经济损失。根据猪圆环病毒的致病性以及基因组差异可将其分为无致病性的猪圆环病毒Ⅰ型(PCV-1)和有致病性的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)。PCV-2可引起断奶仔猪的系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎和肾病综合征(PDIVS)、增生性坏死性肺炎(PIVP)、怀孕母猪的繁殖障碍以及幼龄仔猪的先天性脑震颤等疾病。 相似文献
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美国堪萨斯州州立大学科学家完成了一项研究,结果表明新研制的猪圆环病毒Ⅱ型疫苗能有效预防猪圆环病毒Ⅱ型。病毒学家、诊断医学和病理学 相似文献
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猪蓝耳病是由动脉病毒科的猪繁殖于呼吸综合症病毒引起,以高热不退,流产呼吸困难,耳朵发紫,并发其他传染病为主要特征,近10年来在我国流行严重,损失重大,我国已将其列入强制免疫范围,而免疫抗体监测是检验免疫是否合格的唯一标准,本文谈谈用猪蓝耳病病毒抗体监测试剂盒对蓝耳病的实验室抗体监测实验。 相似文献
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猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是迄今为止发现的最小的一种脊椎动物病毒。PCV分为无致病性(或PK15源性)的猪圆环病毒Ⅰ型(PCV-1)和有致病性(PMWS源性)的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)两个基因型[1-2]。PCV-1广泛存在于猪体内及猪原代细胞系中,无致病性,不能引起细胞病变; 相似文献
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为进一步弄清我国犬是否感染猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3),本试验对山东省青岛市某宠物医院采集发病犬的48份样品进行PCV3荧光PCR检测,发现7份病料呈现明显阳性,对这7株阳性样品继续用普通PCR扩增,有3份可以扩增出228 bp的特异性条带。这些条带测序后与圆环病毒的其他参考序列进行同源性分析,结果显示这3份样品的病毒序列与其他PCV3参考序列处于同一个进化分支,与PCV3的同源性为93.3%~99.5%,表明我国犬确实存在PCV3感染。 相似文献
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“猪高热病”中猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒Ⅱ型的检测分析 总被引:2,自引:0,他引:2
为有效防控猪"高热病",对该病的病原进行了分析。根据GenBank中已发表的相关序列,建立并应用RT-PCR和PCR方法,对2007年6月~2009年9月期间收集于江西等地区的323份"猪高热病"病料进行了检测。结果显示PRRSV阳性率为85.14%(275/323),PCV-2阳性率为36.84%(119/323),其中PRRSV和PCV-2的混合感染率为2105%(68/323)。说明在"猪高热病"疫情中PRRSV和PCV2起了重要作用。 相似文献
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猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)属圆环病毒科,是已知最小的无囊膜单股环状DNA病毒,可在哺乳动物细胞中自律性复制(Todd等,1991)。圆环病毒科(Circoviridae)可分为二个属:圆环病毒属(Circovirus)和圆圈病毒属(Gyrovirus)。PCV、喙羽病毒(beak and feather virus)、鸽圆环病毒(pigeon circovirus)、 相似文献