RAPD分子标记在甘蔗杂种鉴定中的应用研究

从甘蔗杂种梁河78／121及其亲本华南56/12和崖城58／47共3个材料的幼嫩叶片中提取DNA,使用PCR仪,建立了适合甘蔗PAPD分析的PCR条件,对115个随机引物进行筛选,74个引物可获得甘蔗RAPD多态性,从中找到可用于鉴定该杂种的引物OPR—17,OPK—17和OPR—18。利用该法鉴定甘蔗杂种简单、迅速、可靠,DNA用量少,且不影响被检植株的后期生长。     

ISSR分子标记及其应用

本文简述了ISSR分子标记的原理、基本操作程序,介绍了ISSR分子标记技术反应条件的选择及其在遗传多样性分析等方面的应用。     

罗田板栗种质资源ISSR分子标记初步鉴定

试验以湖北省罗田县的15个板栗主要栽培品种为材料,利用ISSR分子标记对15个板栗品种进行初步认证及亲缘关系分析.结果表明,从35条ISSR引物中筛选出17条能够扩增出清晰、稳定条带的引物;17条引物共扩增出392条带,其中多态性条带有344条,多态性条带比率为87.8％.应用NTSYS 2.10e软件进行UPGMA法聚类分析,15个板栗品种大致被分为三类.其中普通八月红和特殊八月红基本无遗传差异,玫瑰红与乌壳栗,六月暴和桂花香亲缘关系较近.初步鉴定结果可为板栗品种鉴别、分类及种质资源的有效利用提供理论依据.     

应用RAPD标记对百合杂交种真实性鉴定的研究

应用RAPD标记对百合杂交种真实性进行了鉴定。研究表明:采用RAPD分子标记对百合杂交种进行早期鉴定是一种快速有效的方法。在本试验中杂种既具有相加性带型、单亲本带型,又具有融合双亲的特异带,并出现了新的带型。这样可以通过多个引物的应用,对杂交种进行早期鉴定。     

粤引大脆蜜青枣的ISSR分子标记鉴定分析

使用ISSR分子标记技术对粤引大脆蜜等10个青枣品种进行基凶组DNA多态性分析,结果表明:粤引大脆蜜是一个新的种质类型,不存在同物异名现象;但青枣种质资源之间的遗传多样性较低;ISSR分子标记技术适用于青枣品种的鉴定及亲缘关系的分析.     

ISSR分子标记鉴定香菇单孢杂交后代的研究

以香菇栽培品种大山18和云南野生菌株11-1作为亲本,采用单孢杂交技术初步获得84个杂交菌株。通过对亲本菌株ISSR引物进行筛选,得到1个条带图谱清晰稳定、含有2个亲本各自特异扩增条带的引物。用该引物对84个杂交菌株及其亲本进行ISSR扩增,结果表明:有45个杂交菌株扩增出2个亲本的特异条带,推断这45个杂交菌株应是真正的杂合子,表明ISSR标记可以作为香菇杂合子鉴定的一种手段。     

RAPD分子标记鉴定甜瓜种子纯度试验

利用RAPD分子标记技术对11个甜瓜品种进行品种区别和种子纯度鉴定.结果表明,采用优化的RAPD-PCR条件以及利用引物W97225、97255、W97274、W97276、W97295可以将11个甜瓜品种区别开来,同时还利用引物W97295对银辉甜瓜的种子纯度进行了鉴定.     

RAPD分子标记在鉴定狼尾草属杂交后代上的应用

报道了狼尾草属植物基因组DNA的提取纯化方法、RAPD－PCR反应程序、用RAPD分子标记技术对狼尾草属两个杂交组合的亲本及其正反交的4组杂交后代进行的分子鉴定。珍珠黍(Pennisetum glaucum)×象草(Pennisetum purpureun Schum)杂交组合从19个引物中就筛选出6个引物，在双亲间扩增出16条特征带。P5-4-10×P-3组合从39个引物中才筛选出5个引物，在双亲间扩增出6条特征带。根据双亲间的特征带可以对杂交或自交后代作出鉴定。     

应用RAPD分子标记鉴定野生茶树种质资源研究

 应用RAPD标记对原产于云南等地的 2 4份野生茶树资源进行分子鉴定研究。结果表明 ,RAPD标记在鉴定茶树种质资源方面非常有效。有 3种独立的方法可以用于茶树种质资源的分子鉴定 :特殊的标记 ;特异的谱带类型 ;不同引物提供谱带类型的组合。 16个特异标记的存在和 3个特异标记的缺失可以鉴定 14份资源 ;OPO 13扩增的 13种谱带类型可以鉴定 10份资源。利用最少数量引物获得最大鉴定能力 ,对种质资源的分子鉴定尤为重要。OPO 13、OPO 18、OPG 12和OPA 13等 4个引物带型的组合则可以鉴定所有 2 4份资源 ,包括形态和生化成分上几乎没有差异的 2株毗邻野生茶树     

22个毛木耳菌株的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术对22个毛木耳菌株进行分析,应用NTSYSpc2.1生物软件进行遗传聚类,构建系统树.试验筛选出12个扩增谱带清晰、多态性好的ISSR引物,共扩增出80条清晰易辨的多态性谱带.聚类分析结果表明,利用ISSR技术可将22个毛木耳菌株材料区分开,遗传相似系数变异范围为0.100～0.846,遗传差异较大,在相似系数为0.421时,22个菌株聚为聚为4个类群,其中在四川广泛栽培的主栽品种黄耳10号、琥珀、781之间存在较大遗传差异.     

运用ISSR分子标记鉴定杉木×侧柏远交杂种

为了对杉木血肌inghamia lanceolata与侧柏Platycladus orientalis远交杂种的真实性进行鉴定,进行预备试验,从100条UBCDrimer Set#9（800-900）引物中,筛选出9条多态性引物。对杉木×侧柏远交组合A4（1419）×B1所得杂交后代中选择的4株超级苗等材料．提取DNA．进行聚合酶链式反应（PCR）扩增,并按母本、远交子代和父本顺序,对PCR产物进行电泳实验。结果发现．4株超级苗在7条引物中,共找到16条父系特征谱带,在另外2条引物中检测到父母的共同谱带,、由此可以肯定．杂交所得超级苗是杉木与侧柏远缘杂交产生的杂种。杉木与侧柏远缘杂交是可配的,杉木远缘杂交育种是一条多性状改良途径。图3表1参17     

园艺作物的ISSR分子标记研究及应用

ISSR(Inter-simple sequence repeat)是一种基于微卫星序列发展起来的新型分子标记方法,具有无需知道任何靶标序列的微卫星背景信息、遗传多态性高、稳定高效、检测快速等特点。目前,ISSR分子标记技术在园艺作物的遗传多样性研究、品种鉴定、遗传图谱构建、基因定位及分子标记辅助育种等方面得到了广泛应用,文章就ISSR标记的原理、方法、特点及其在园艺作物研究中的应用加以综述。     

RAPD和ISSR标记检测黄麻属遗传多样性的比较研究

应用RAPD和ISSR标记,分别对来自非洲地区和中国的15份黄麻野生种(10个种),以及来自中国、印度、越南、日本等地的12份黄麻栽培品种基因组DNA的遗传多样性进行检测。结果表明:(1)参与分析的所有RAPD和ISSR引物都对DNA模板浓度的梯度变化不敏感,对比RAPD和ISSR在PCR反应中的稳定性,ISSR优于RAPD;(2)25个RAPD和ISSR引物分别扩增出329条和283条带,多态比率分别为89.36%和92.5%,显然,ISSR检测出的多态性条带的能力优于RAPD;(3)RAPD和ISSR标记检测同组供试材料种间或种内的遗传相似性系数(GS)范围,分别为0.48～0.98和0.33～0.97,ISSR检测出种间遗传多样性的分辨力较RAPD为高,但两者GS相关系数高达0.955;(4)RAPD和ISSR标记的分子聚类获得了趋势相近,但不完全相同的聚类树,两种标记均能准确地把原始黄麻野生种与栽培种中的长果种和圆果种及其近缘野生种聚在不同的种群中,分子分类结果与传统经典分类相符,并揭示出种间或种内基因型的遗传差异与亲缘关系,而ISSR比RAPD能检测到种间更高的遗传差异性;(5)两种标记均可揭示种间与种内的遗传多样性及其进化的亲缘关系,可为进一步开展黄麻分子辅助育种和起源与进化研究提供有价值的理论依据。     

应用ISSR分子标记对茶树种质资源进行分子鉴定

ISSR标记是一种基于微卫星序列发展起来的十分有效的分子标记,已在植物种质鉴定和遗传多样性等方面广泛应用。本文采用ISSR分子标记法对分布于重庆、四川的14份茶树种质资源进行了分子鉴定,通过构建指纹图谱、特殊标记的存在或缺失和标记组合来可将它们区别开。结果显示ISSR分子标记在鉴定茶树种质资源方面非常快捷和有效。     

运用ISSR分子标记鉴定杉木 × 侧柏远交杂种

 为了对杉木Cunninghamia lanceolata与侧柏Platycladus orientalis远交杂种的真实性进行鉴定,进行预备试验,从100条UBC primer Set#9（800 ～ 900）引物中,筛选出9条多态性引物。对杉木 × 侧柏远交组合A4（1419） × B1所得杂交后代中选择的4株超级苗等材料,提取DNA,进行聚合酶链式反应（PCR）扩增,并按母本、远交子代和父本顺序,对PCR产物进行电泳实验。结果发现,4株超级苗在7条引物中,共找到16条父系特征谱带,在另外2条引物中检测到父母的共同谱带。由此可以肯定,杂交所得超级苗是杉木与侧柏远缘杂交产生的杂种。杉木与侧柏远缘杂交是可配的,杉木远缘杂交育种是一条多性状改良途径。图3表1参17     

基于ISSR和RAPD标记的太子参种质遗传多样性研究

为探究太子参种质资源的遗传多样性及亲缘关系,采用简单重复序列区间多态性（ISSR）和随机扩增多态性（RAPD）标记对来自不同产地的10个太子参种质进行遗传多样性分析。结果表明,13条ISSR引物和16条RAPD引物在10个太子参种质中分别获得101、89个扩增位点。其中多态性位点数（NPL）分别为58、63个,多态性位点频率（PPL）分别为57.37%、70.32%。基于ISSR标记的太子参种质间的观测等位基因数（Na）、有效等位基因数（Ne）、Nei’s遗传多样性指数（H）和Shannon’s多态性指数（I）的平均值分别为1.573 7、1.344 3、0.353 2、0.529 7。基于RAPD标记的太子参种质间的Na、Ne、H和I的平均值分别为1.703 2、1.418 1、0.354 9、0.532 1。综合2种标记的GS为0.668～0.911。综合2种标记的聚类结果表明,当GS为0.780时,10个太子参种质可聚为4组,聚类分析结果与太子参种质的地理分布有明显的相关性。     

女贞ISSR分子标记的引物筛选

利用60个ISSR引物，对来自不同地域的12份女贞种质材料进行PCR扩增，筛选出12个多态性丰富、条带清晰且重复性良好的、适合于所有女贞种质材料进行ISSR分析的有效引物。筛选出的12个有效引物对12份女贞种质材料进行ISSR—PCR扩增，均可获得带型丰富和清晰可辨的DNA指纹图谱，共扩增出228条DNA谱带，其中210条为多态性带，占总扩增带数的92．1％，平均每个引物扩增出19条谱带。本试验筛选的12条引物可以有效地应用于女贞种质资源材料的ISSR分析。     

雷竹不同栽培类型RAPD分子标记的研究

对雷竹的19个栽培类型及2个近缘种进行了RAPD分析。从4组80个引物中筛选出10个引物，产生随机扩增位点66个，其中多态性位点54个（占81.8%)。利用POPGEN32程序进行聚类分析，结果表明：（1）聚类结果可将雷竹的不同栽培类型及其近缘种区分开来，以前认为是雷竹一栽培型的永嘉雷竹不属于Ph.praecox种系；（2）细叶雷竹与阔叶雷竹的产量高低主要取决于经营管理；（3）RAPD分子标记对竹类植物种以下等进行分类有一定的可靠性。图2表3参8。     

ISSR分子标记在芦柑提纯复壮研究中的应用

采用ISSR(Inter-simple Sequence Repeat)分子标记技术,从随机引物中筛选出能稳定扩增的14条引物,利用2条引物对供试的10个芦柑样品进行PCR扩增,获得了与母本完全一致的条带,从而可以确定鉴定样本为珠心苗。     

ISSR分子标记及其在烟草研究中的应用

介绍了ISSR分子标记的原理、特点、技术操作要点及影响ISSRPCR反应的因素,并综述了ISSR分子标记在烟草DNA指纹图谱构建、遗传作图与基因定位、品种鉴定及亲缘关系分析及居群遗传结构与遗传多样性等研究中的应用进展。