牛胚胎玻璃化冷冻技术研究进展

胚胎冷冻保存是保存和繁殖遗传优势动物的主要工具,是胚胎移植产业的重要组成部分。目前广泛使用的冷冻方法主要有慢速冷冻和玻璃化冷冻2种。由于玻璃化冷冻具有成本低、效率高、操作简单等优点,玻璃化冷冻法越来越受到人们的重视。经过多年研究,研究人员已经在玻璃化冷冻方法、冷冻液等方面取得了大量进展,玻璃化冷冻法已经开始进入商业化应用。本文综述了牛胚胎冷冻保存技术的研究进展,旨在为相关从业人员提供一定借鉴和参考。     

哺乳动物胚胎冷冻保存研究进展

哺乳动物胚胎冷冻保存效果受冷冻保护剂、冷冻方法、解冻方法等多种因素影响,其中冷冻方法是一个关键性因素.目前胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法和玻璃化冷冻法两种.常规慢速冷冻法是指利用甘油、乙二醇等做冷冻保护剂通过缓慢降温的方式进行胚胎冷冻;玻璃化冷冻法是指利用高浓度的冷冻保护剂通过快速降温的方式进行胚胎冷冻.与常规慢速冷冻法相比,玻璃化冷冻法简化了操作过程,大大缩短了操作时间,不需昂贵的程序控制冷冻仪.     

卵巢玻璃化冷冻保存研究进展

卵巢玻璃化冷冻是一种操作简单、冷冻效果好的卵巢组织冷冻降温技术,对动物繁殖能力保存、物种保护、生物多样性保存,以及动物胚胎工程和人类临床医学研究与应用等具有重要意义。卵巢组织冷冻保存较卵母细胞冷冻保存,具有明显的优点。在冷冻保护剂的选择、冷冻材料、冷冻平衡及冷冻方法上都有其特殊之处。卵巢组织冷冻保存技术已在人类医学临床上发挥其应用价值。     

马实验性软组织伤冷冻效应观察

选择营养中等的成龄健康蒙古马10匹,分为两组,均实验性地造成体表软组织伤(长12cm,深3cm切口),分别立即及24h后进行冷冻。对冷冻诱起马体表局部软组织坏死及其修复特点,以及冷冻性免疫作用进行了系统观察。结果:①体表软组织冷冻性坏死的性质,最初属凝固性坏死,以后呈干性或湿性坏疽变化;②在冷冻性损伤修复过程中,损伤深部健康组织首先形成肉芽组织分界面,成为防止感染的屏障和修复损伤的肉芽组织基础;在坏死组织脱落后,伤面pH为7.0～7.7,有利于肉芽再生和防止化脓性感染;修复过程明显见有组织坏死及肉穿组织生成,属第二期愈合,但愈合后不留功能障碍;③冷冻性坏死能诱起T淋巴细胞显著增多(冷冻后第三周t=2.8068,P<0.05,第四周t=6.4869, P<0.01),可作为冷冻性免疫力增强的指标之一。     

牛胚胎冷冻保存的研究进展

目前,牛的胚胎冷冻保存巳成为一种较成熟的常规技术,广泛应用于牛的繁殖科研与生产。本文回顾了牛胚冷冻保存技术的发展概况,对牛胚胎的常规冷冻技术、直接冷冻法及玻璃化冷冻技术的进展作了简要论述。     

影响绒山羊冻精质量的几个冷冻技术环节

影响绒山羊冻精质量的技术环节，主要由冷冻温度、降温速度以及冷冻容器的选择等构成。     

猪胚胎冷冻技术的研究历程与未来展望

本文论述了近年来国内外猪胚胎冷冻技术的研究历程,分析了玻璃化冷冻技术在猪胚胎冷冻实际应用中存在的问题。结合发现的问题和最新的研究进展,从玻璃化冷冻剂的改良、玻璃化冷冻流程的优化、玻璃化冷冻与多组学研究等3个方面对猪胚胎冷冻技术的研究进行展望,以期为猪胚胎冷冻技术的创新提供理论依据。     

简易胚胎冷冻器的应用试验

根据液氮罐内汽相区存在的温度梯度,可逐渐达到降温的原理而研制成功的简易冷冻器,已在全国17个省、市、自治区推广应用。采用该仪器及与其配套的胚胎冷冻—解冻技术方法,对小鼠、绵羊、奶牛、黄牛胚胎进行冷冻试验,取得小鼠冷冻胚胎解冻后培养成活率率为90.7％,孵化膨胀率为77.2％;绵羊和奶牛冷冻胚胎解冻后,形态恢复正常的胚胎比例分别为76.2％和69.4％,移植成功率分别为50％和30％。     

我国牛冷冻精液生产工艺温度曲线的现状分析研究

本文提出冷冻精液生产工艺的技术关键是由精液冷冻温度和降温速度所组成的精液冷冻温度曲线模式，通过对国内15个省、市级牛冷冻精液生产单位的生产工艺程序进行监测，对细管型及颗粒型精液冷冻温度曲线的类型、存在问题及其影响因素进行分析研究，提出提高牛冷冻精液质量的建议。     

混合冷冻保护剂在鸡精液冷冻中的作用分析

混合冷冻保护剂在鸡精液冷冻中的作用分析＠王红军＠张忠诚＠陈淑勤￥中国农业大学动物科技学院＠金凤英￥山东日照种鸡场混合冷冻保护剂在鸡精液冷冻中的作用分析王红军张忠诚陈淑勤（中国农业大学动物科技学院北京１０００９４）金凤英（山东日照种鸡场２７０００２）前言近年...     

简单而有效的哺乳动物胚胎玻璃化冷冻方法

简单而有效的哺乳动物胚胎玻璃化冷冻方法王海彦朱士恩译１前言如果胚胎可以有效地进行冷冻保存，那么这项技术将可应用在多种哺乳动物如家畜、实验动物、野生动物以及人。然而，在胚胎冷冻和解冻过程中都存在好多会使胚胎受到损伤的因素。如：抗冻保护剂的毒性；冷冻损伤...     

BMY牛冷冻精液质量控制及影响因素研究

[目的]为了加大BMY牛的推广应用力度和提高人工授精受胎率,开展了BMY牛冷冻精液质量控制研究,优选出冷冻稀释液及得出冷冻精液质量控制技术程序。[方法]采用不同的初始冷冻温度、不同种类的稀释液、不同的冷冻方法对BMY牛精液冷冻及解冻效果进行试验。[结果]不同的初始冷冻温度、不同种类的稀释液、不同的冷冻方法,BMY牛精液冷冻解冻效果各异。初始冷冻温度为-121--140℃时,TRIS液为基础稀释液添加糖类和氨基酸一步法稀释BMY牛精液冷冻6-10 min BMY牛冷冻精液解冻效果较好,用程控冷冻仪冷冻BMY牛精液,同样获得良好的解冻效果,解冻活力达到0.372±0.026。BMY牛冷冻精液平均解冻活力可达0.357±0.029以上,精子解冻复苏率达50%以上。精子畸形率平均为16.8%±4.26%,BMY牛采精成功率为75.3%。[结论]全放牧条件下BMY牛电刺激采精法获得很好效果,精液质量好,更有利于种质资源的保存和利用。     

发育阶段对牛卵泡卵母细胞冷冻效果的影响

研究了用3种不同方法（A法：程序冷冻法：B法：超快速冷冻法；C法：玻璃化冷冻法）冷冻保存的牛GV期和IVM卵母细胞的发育潜力，结果表明，无论采取哪种方法。GV期卵母细胞的发育潜力均显著低于IVM卵母细胞。三种冷冻方法中，以玻璃化冷冻为最佳。     

细管冷冻精液在繁改工作中的优越性

法国凯苏氏创立的塑料细管冷冻精液技术,对世界畜牧业的高速发展起到积极的推动作用,使繁改技术逐渐走向简单化。几年来,我区有部分乡(镇)一直采用细管冷冻精液搞冷配工作,取得了较为可观的成绩,大家普遍认为使用细管冷冻精液搞冷配比使用颗粒冷冻精液有如下几种优点。     

犬精液冷冻保存技术的研究进展

国内犬精液冷冻保存技术起步较晚,尚处在研究探索阶段,犬精液冷冻保存技术还不成熟,冷冻精液受胎率、窝产仔数与自然交配相比还有一定的差距,而且品种、地域、采精时间的不同,精液冷冻效果也不一致。从犬精液的冷冻保存方法、冷冻保护剂、解冻方法三个方面,综述了近年来国内外的犬精液冷冻研究成果,为探索更加有效的犬精液冷冻技术,提高犬精液冷冻效果提供参考。     

小鼠卵母细胞和胚胎不同冷冻方法的比较研究

探讨程序化冷冻与玻璃化冷冻对小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎的复苏率及其发育潜能的影响。通过小鼠的卵母细胞与早期胚胎的不同冷冻方法的比较,为后续阿旺绵羊的胚胎冷冻保存提供参考。采用程序化冷冻与玻璃化冷冻技术,分别冷冻小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎,复苏后培养,比较不同冷冻处理后的复苏率、成熟率与囊胚率。小鼠GV期卵母细胞程序化冷冻复苏率(48.00%±5.29%)显著低于玻璃化冷冻复苏率(65.00%±5.00%),有统计学差异(P=0.0147<0.05);而程序化冷冻后复苏卵母细胞的发育成熟率略高于玻璃化冷冻组,但无统计学意义。小鼠二细胞期胚胎程序化冷冻组复苏率(76.00%±2.00%)显著高于玻璃化冷冻组复苏率(70.00%±2.00%),有统计学差异(P=0.0213<0.05);冷冻后复苏胚胎发育的囊胚率程序化冷冻略低于玻璃化冷冻及对照组,但无统计学意义。     

东佛里生奶绵羊精液冷冻保存方法的研究

本研究旨在探讨东佛里生奶绵羊冷冻稀释液中添加维生素B₁₂以及不同冷冻保护剂对冷冻精液品质的影响，并筛选适合东佛里生奶绵羊的精液冷冻程序。通过假阴道法采集3只健康配种用东佛里生奶绵羊的精液，分为3组，分别为对照组(基础稀释液+6%甘油)、维生素B₁₂组(基础稀释液+6%甘油+0.05 mg/mL维生素B₁₂)、冷冻保护剂组(基础稀释液+5%乙二醇)。在-10～-100℃温区内设置3种降温速率(40、30、20℃/min)进行冷冻。结果显示：维生素B₁₂组冷冻精液的运动性能和畸形率较对照组没有显著变化；对照组冷冻精液的总活率、前向运动比例、平均路径速度、直线速度、曲线速度、直线性、鞭打频率、摆动性优于冷冻保护剂组(P<0.05)，畸形率低于冷冻保护剂组(P<0.05)。在冷冻程序的设计上，在-10～-100℃温区内以-40℃/min速率进行降温的冷冻程序A，其冷冻精液总活率、前向运动比例、平均路径速度、直线速度、曲线速度、直线性优于其他2个程序(P<0.05)，其畸形率最低(P<...     

冷冻精液的温度控制

冷冻精液温度控制是保证冷冻精液质量和提高母畜受胎率的技术关键。在冷冻精液生产过程中,对精液稀释、平衡温度有着严格的要求;在精液冷冻过程中必须快速通过危险温区和按照规定的精液冷冻曲线操作;在使用冷冻精液时,对冷冻精液的保存温度和解冻温度及解冻后精液温度均有特定的要求。     

冻结环境对冻猪产品冷冻效果的影响分析

为使冻猪产品冷冻效果最佳且有利于冻猪产品的长期贮存,本研究以10个批次规格为10 kg冻猪五花肉作为检测对象,设置产品在急冻库中堆放方式、摆放位置、急冻库温度及冷冻时间为变量,检测对比分析冻猪产品在不同变量条件下的冷冻效果。结果表明:冷冻肉品堆放方式最好选择冻结架放置,肉品尽可能分散堆放,产品之间保持一定距离,急冻库温度不应高于-28℃,肉品冷冻时间在60～72 h之间时冷冻效果及感官品质较好。     

猪卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

卵母细胞冷冻保存对于畜牧业生产和人类辅助生殖具有重要意义。随着玻璃化冷冻技术日趋成熟，其现已广泛应用于牛、羊等大家畜的卵母细胞冷冻保存。然而，猪卵母细胞的冷冻保存至今仍处于试验研究阶段，由于猪卵母细胞脂质含量高，对低温敏感，在玻璃化冷冻保存过程中极易受到冷冻保护剂毒性以及渗透胁迫、氧化应激等损伤，造成细胞骨架以及亚细胞器受损，最终导致细胞发育能力降低甚至死亡。近年来，人们在提高猪卵母细胞冷冻保存效率的研究中取得了突破性进展。本文简要介绍了卵母细胞冷冻保存的常见方法及作用机理，总结了猪卵母细胞在玻璃化冷冻过程中造成的细胞损伤类型及影响，概述了人们针对不同类型的冷冻损伤提出的解决方法和取得的成就，并对其应用前景进行展望，为今后提高猪卵母细胞的玻璃化冷冻效率提供新思路。