两种无冷冻保护剂冷冻精子方法的比较

小鼠卵胞浆内单精子注射(ICSI)的开展使解冻后的精子无需具有活动能力就可以使卵子受精和发育,因此多种简单的精子冻存方法被开发。从复苏后精子受精和支持胚胎发育的能力,以及DNA甲基化方面研究比较无冷冻保护剂的条件下-20℃和-196℃冻存的两种方法。结果表明,两种方法都不改变胚胎DNA甲基化状态,-196℃保存的精子的受精率和胚胎发育率降低,但是通过卵子激活可以修复受精和胚胎发育的能力。-20℃保存精子1个月不影响受精和胚胎发育能力,冻存6个月降低精子的受精和胚胎发育潜能。因此,-20℃短期保存精子是一种简单、有效且安全的方法。     

完整顶体精子注入卵细胞后对胚胎发育的影响

分别注射1、3、5个顶体完整的人精子于金黄地鼠卵中,对照组同时注射数量相等的无顶体精子,观察卵活化、受精及后期发育情况.结果发现随着注入精子数量的增加,卵发育的异常率显著增加,而注射无顶体精子组,无论注射精子数量为多少,均无异常发生.此外,注射多个精子于金黄地鼠卵中时,多原核(PN)形成率顶体完整组明显低于无顶体组(P...     

猪冷冻精子的体外受精与单精子胞浆内注射

用猪冷冻精子进行体外受精和单精子胞浆内注射(ICSI),并研究添加L-半胱氨酸及不同成熟培养法对猪ICSI胚胎发育的影响。结果表明:用猪冷冻精子生产的ICSI胚胎卵裂率及囊胚发育率分别为68.3%和11.4%,均低于用冷冻精子进行体外受精(IVF)所获得的卵裂率和囊胚发育率(分别为76.9%和19.2%,P<0.05)。在培养液中添加1.71mmol·L~(-1) L-半胱氨酸培养3 h,无论是卵裂率、桑椹胚发育率,还是囊胚发育率,均未得到明显改善(P>0.05);采用含0.4%BSA的NCSU-23培养液进行猪卵母细胞成熟培养,ICSI胚胎卵裂率虽明显高,但各组所获胚胎发育率均无显著差异(P>0.05),表明所用卵母细胞的成熟方法并未对ICSI胚胎发育产生明显的影响;用颗粒细胞或卵丘细胞共培养ICSI胚胎后,卵裂率有明显提高(P<0.05),但各组囊胚发育率无统计学差异。     

牛卵母细胞胞浆内单精子注射的研究进展

综述了牛卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection ICSI)的研究进展:ICSI的囊 胚率从1990年最早报道的1．8％提高到最新的40．1％。这要归功于技术的创新。在此分析了电脉冲仪 (piezo-electric actuator)等新技术应用的效果,讨论了前期处理精子对ICSI的影响,比较了各种激活 处理对ICSI的提高结果,同时展望了ICSI这门技术在畜牧生产和转基因研究上的应用前景。     

44例常规体外受精失败后行卵胞浆内单精子注射补救的临床分析

目的探讨对常规体外受精（IVF）周期受精完全失败患者,于受精后18～20 h行补救卵胞浆内单精子注射（ICSI）的临床价值。方法 2004年1月至2009年12月我院生殖中心常规IVF受精完全失败周期44例,于受精后18～20 h行补救ICSI。解冻复苏补救ICSI受精卵的胚胎,共移植2个周期。结果在44例常规IVF完全未受精周期中,获卵374个,补救ICSI的MII卵201个,正常受精的MII卵127个,获48个优质胚胎,7例临床妊娠,健康新生儿7名,1例单胎妊娠继续妊娠中,胎儿情况良好。解冻复苏补救ICSI受精卵2周期,结果1例妊娠,单胎,于孕早期流产。结论对常规IVF受精完全失败周期,于受精后18～20 h行补救ICSI可作为常规IVF受精失败的有效补救措施。     

肿瘤相关基因的表观遗传修饰研究进展

表观遗传学是遗传学的分支学科，研究非DNA序列改变所导致的可遗传的基因表达水平的变化。与肿瘤相关的表观基因改变主要是DNA甲基化和组蛋白修饰．该文分别从这两方面阐述了肿瘤相关基因的表观遗传学改变的研究进展。     

表观遗传学与生殖细胞发育分化研究发展

从DNA甲基化修饰、组蛋白甲基化和乙酰化修饰、基因印记和RNA干扰等几个方面,综述了表观遗传学的基本机制及其对哺乳动物生殖细胞发育分化的影响。表观遗传学对于动物机体生长、代谢及功能的正常维持具有重要作用,其中任何方面的异常都会导致体细胞和生殖细胞的生长分化调控失常,甚至引发疾病。     

季节对超数排卵兔卵母细胞数量及质量的影响

用孕马血清促性腺激素PMSG配合人绒毛膜促性腺激素hCG处理中国白兔,对4个季节超排兔卵母细胞的数量和孤雌胚胎以及卵胞浆内精子注射(ICSI)胚的体外发育能力进行了评定.结果表明.春季成熟卵母细胞的获得数量显著高于冬季(P0.05),而其他季节之间差异不显著(P0.05);两种卵子(孤雌激活和ICSI)的卵裂率不受季节影响(P0.05),但夏季两种胚胎的囊胚形成能力显著低于其他3个季节(P0.05).所以,季节既影响超数排卵兔的卵母细胞数.也影响卵母细胞的质量.     

不同稀释液冷冻狐狸精子的研究

针对Tris-柠檬酸卵黄冷冻稀释液、进口冷冻稀释液加卵黄和Tris-柠檬酸植物蛋白冷冻稀释液冷冻狐狸精子,做了2方面的试验研究。试验1,比较3种冷冻保护稀释液的冷冻后精子活力试验;试验2,3种冷冻保护稀释液冷冻精子后,解冻,比较3种冷冻保护稀释液精子的存活时间。试验结果表明:冷冻试验,进口稀释液加卵黄冷冻蓝狐精子在解冻后活力效果最佳,畸形精子少;植物源性稀释液在显微镜下的视野清晰度要高于含卵黄的稀释液;存活试验,在35.5℃水浴中存放4h后观察,精子在3种冷冻保护稀释液中的活力存在显著差异。     

小鼠胚胎直接投入液氮冷冻保存试验

室温下,将292枚小鼠胚胎在含128.9g/L甘油PBSS(含20％犊牛血清的磷酸盐缓冲液)和含193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内分别孵育片刻,装管后直接投入液氮冷冻保存。冻胚快速解冻后,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,用PBSS清洗后镜下观察评定,胚胎回收率为86.9％(254/292),胚胎形态正常率为77.1％(196/254)。其中部分桑椹胚经体外培养,囊胚发育率为71.4％(20/28)。将110枚冻胚移植给7只受体,3只妊娠,产仔12只(5,7),妊娠率为43％(3/7),产仔率为10.9％(12/110),其中囊胚移植1只受体妊娠产仔3只,产仔率为25％(3/12)。     

胭脂鱼精子低温保存及其在人工授精中的应用

[目的]研究胭脂鱼精子的低温保存方法,为胭脂鱼的人工繁殖和人工授精提供基础依据。[方法]试验配制了A、B、C、D4种精子保存液,以0．7％的NaCl溶液作为对照,以精子被激活后的活率为指标,对4种精子保存液保存成熟的胭脂鱼精子的效果进行评价。[结果]在低温（0～4℃）条件下,4种精子保存液之间及其与对照溶液之间的差异比较明显。其中保存效果最好的是B液,能在120h内使精子的活率保持为80％;D液次之,能在84h内使精子的活率保持为80％。胭脂鱼在淡水中快速运动时间为（24．0±3．5）s,寿命为（128．0±9．5）s。2007～2008年精子保存B液在胭脂鱼的人工授精中进行应用,受精率为53％～85％。[结论]用精子保存液低温保存胭脂鱼精子的方法是切实可行的。     

哺乳动物精子超微结构研究进展

精子超微结构研究是检验精液品质,揭示精子发生机制,开展受精生物学研究的一项重要内容。从哺乳动物的精子形态结构出发,综述了不同情况下精子变化的特征,论述了国内近些年来在哺乳动物精子超策结构上的一些研究进展,以及开展哺乳动物精子超微结构研究的意义。     

高体革鯻精子超低温保存方法研究

[目的]对高体革鯻（Scortum barcoo）精子的超低温保存技术进行研究。[方法]首先,用精子活力为标准确定稀释液中NaCl和KCl的最佳浓度;然后,使用二甲亚砜和甘油分别作为抗冻剂,进行超低温保存试验,测定高体革鯻精子复活率和活力。[结果]稀释液中含0.750%NaCl和0.025%KCl时,效果最佳。当二甲亚砜浓度为10%,葡萄糖为5%时,精子复活率和活力分别达到了68.2%和60.7%,保存效果最佳。[结论]稀释液中NaCl和KCl的浓度,对精子活力有明显影响;使用二甲亚砜作为抗冻剂进行低温保存的效果优于甘油;在抗冻保护剂中加入适量葡萄糖会提高保存效果。     

生育相关性抗原对精子受精的影响

生育相关性抗原对精子获能、受精具有重要作用,已经被认为是精子受精潜能的标志。该抗原降解精子-中性粒细胞结合物,使精子重获自由,提高受精精子比例。综述了FAA的生成、结构、化学性质及其与精子受精的相关性,以期为将其作为精液稀释剂的组分奠定基础。     

表观遗传学的分子机制及其研究进展

表观遗传学(epigenetics)是指不涉及DNA序列改变、可以通过有丝分裂和减数分裂进行遗传的基因表达变化的遗传学分支领域。目前研究主要集中在DNA甲基化、组蛋白密码、染色质重塑和非编码RNA调控等方面。副突变、亲代基因印记、性别相关性基因剂量补偿效应和转基因沉默等都是典型的表观遗传现象。相关研究有利于揭示生物生长发育、多倍体植物基因组进化、杂种优势以及人类疾病等许多生命现象的本质。     

液氮速冻松茸工艺研究

采用喷雾式流态化液氮速冻及缓冻,探讨了在选用不同的筛板、风速和食品层高,以及不同的冻结温度下松茸的流化状态,冻结速率与解冻后冻品汁液流失率之间的关系等.结果表明：选用开孔率为50%,孔径为5 mm的筛板,用3.0 m/s循环风速对床层高度为6 cm的新鲜松茸进行流态化速冻效果最佳;建议采用-60℃以下温度进行冻结,冻品在-26℃冰箱中贮藏9个月后,解冻时的汁液流失率低于4.0%.     

日粮中添加二氢吡啶对种公牛精液品质的影响

在种公牛日粮中添加二氢吡啶 ,饲喂量按每千克体重 5毫克计算。试验结果表明 ,试验组精子的活力、呼吸、32 Pi摄入量、顶体完整率极显著地高于对照组 (P <0 0 1) ,而精子的畸形率极显著地低于对照组 (P <0 0 1) ,说明二氢吡啶可以提高精细胞质膜的完整性 ,促进精子的代谢和能量转化过程 ,从而改善了种公牛的精液品质