半滑舌鳎细胞分裂周期蛋白42基因克隆与结构预测

细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是Rho超家族酶中的一个亚类,具有调节细胞骨架和肌动蛋白作用,并参与免疫与炎症反应。设计半滑舌鳎Cdc42基因（即CsCdc42）特异性引物,采用RT-PCR方法、生物信息学方法等进行CsCdc42基因克隆及结构预测。结果获得CsCdc42基因片段长度为847 bp,推测编码191个氨基酸,含有7个抗原表位（27-28、61-63、90-92、120-122、131-133、164-166和181-183 aa）、1个RHO结构域（6-179 aa）,其中含有1个ATP/GTP结合位点和1个酰基化位点;蛋白结构预测主要为α螺旋（30.9%）、β折叠（24.6%）和无规则卷曲（44.5%）。序列比对结果表明,CsCdc42与斑马鱼、青鳉、虹鳟、大菱鲆和虾等氨基酸序列同源性分别为99.43%、97.91%、95.81%、94.76%和91.10%;构建系统发育树显示Cs Cdc42与斑马鱼、人和海水鱼类Cdc42亲缘关系最近,自然聚为一支。以上结果为研究半滑舌鳎细胞分裂周期蛋白相关基因功能提供科学参考。     

半滑舌鳎GAPDH基因开放读码框的克隆及序列分析

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)广泛存在于真核生物中,对许多生理活动具有重要作用.参考金头鲷和斑马鱼的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因序列设计一对简并引物,提取半滑舌鳎肌肉组织总RNA,采用RT-PCR技术对GAPDH基因进行克隆测序及序列分析.结果表明,从半滑舌鳎肌肉组织中成功克隆了GAPDH基因的开放读码框(ORF),序列全长1002 bp,编码333个氨基酸,分子量为36.0235 ku,等电点PI为7.75.序列同源性分析显示,该序列与其他鱼类的GAPDH氨基酸序列具有较高的同源性.     

半滑舌鳎繁育成功

日前,半滑舌鳎人工繁殖及苗种培育技术通过了山东省科技厅的验收鉴定。 半滑舌鳎俗称“鳎米鱼”,是我国黄渤海海区的原产鱼种,温水性鱼类。该鱼内脏团小,出肉率高,肌肉细嫩,口感爽滑,鱼肉久煮不     

半滑舌鳎消化道的组织学研究

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)的消化道可分为口、食道、小肠和直肠,没有明显的胃结构。文章探讨了半滑舌鳎消化道的组织结构与功能的关系。     

半滑舌鳎消化腺的组织学研究

<正>半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis,1873)属舌鳎科(Cynoglossidae)、舌鳎属(Cynoglossus),俗称牛舌头、鳎目、鳎米、龙力等,主要分布于我国的黄渤海、东海以及朝鲜、日本沿海。该种类具有生长快、品质优、适应性广、抗逆性强等优良特性,且肉质细嫩鲜美、营养丰富,深受消费者喜爱,是我国特有的名贵海水鱼类。目前,对半滑舌鳎的研究,多集中在生长、摄食、生物学特征及其养殖技术等方面[1-3],有     

海水养殖新品种——半滑舌鳎

半滑舌鳎俗称牛舌头、鳎目、鳎米,是一种珍稀名贵的冷温性比目鱼类,为我国黄海、渤海区地方性大型经济鱼类之一。近年来,由于自然资源减少,致使供需严重失衡,目前活鱼价格已攀升到每公斤300元左右。半滑舌鳎性状优良,性格温驯,适应性强,食性广,抗逆性强,生长速度快,且肉质细腻,     

半滑舌鳎工厂化养殖技术初探

1半滑舌鳎简介 半滑舌鳎又称三线舌鳎,束鲽形目、舌鳎科、舌鳎属,主要分布于渤海、黄海近海区,是一种暖温性近海大型底栖鱼类。该鱼种性格温驯,适应性强,食性广,抗逆性强,生长速度快,能耐低氧,病害少。半滑舌鳎的最适生长温度为14℃～25℃,可自然越冬。     

半滑舌鳎养殖群体性腺发育观察

[目的]了解半滑舌鳎养殖群体的性别遗传比例及雌、雄性腺发育过程,为高比例雌性育种提供参考依据.[方法]利用性别连锁微卫星标记scaffold 1128_343检测两个半滑舌鳎养殖群体生长过程中雌性比例的变化特征,并结合遗传性别鉴定和石蜡切片技术,跟踪观察半滑舌鳎25日龄至两年性成熟的整个性腺发育过程.[结果]对12~76日龄的两个养殖群体进行遗传性别鉴定,发现群体Ⅰ和群体Ⅱ的平均遗传雌性比例分别为50.00%和50.23%,基本符合1∶1的分布规律.半滑舌鳎性腺发育早期(25日龄)雌鱼和雄鱼的性腺结构无明显差别,至56日龄雌、雄鱼性腺结构开始出现差别,至76日龄雌、雄鱼性腺结构出现明显差别,至106日龄雌、雄鱼性腺出现明显分化,可通过性腺切片鉴定出雌、雄性别.[结论]半滑舌鳎雌、雄鱼遗传性别比例基本符合1∶1的分布规律,雌鱼性腺发育和分化较雄性更快、过程更复杂.     

半滑舌鳎外周血淋巴细胞培养条件研究

以半滑舌鳎为试验对象,对淋巴细胞体外培养和染色体制备条件如促分裂剂、培养时间、培养温度、培养基、秋水仙素浓度及作用时间等进行探索,在建立一套基于半滑舌鳎淋巴细胞体外培养的染色体制备方法。结果表明,对于半滑舌鳎淋巴细胞体外培养,用离心法收集淋巴细胞,培养基为含15%体积分数胎牛血清的L-15培养基,添加3μg.mL-1的PHA-P作促分裂剂,分裂指数可达2.6%±0.2%,6 d后收集细胞制作染色体,获得较好效果。     

半滑舌鳎腹水症病原的分离鉴定

从患病半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)内脏及腹水中分离到优势菌株8301,回归感染试验证实菌株8301对半滑舌鳎具有致病性;采用形态学观察、生化特性分析、16S rDNA基因序列分析等方法对所分离菌株进行鉴定。结果表明,菌株8301为革兰氏阳性球菌,生化特性与海豚链球菌(Streptococcus iniae)较为接近,以16S rDNA基因为遗传标记构建系统发育树将菌株8301与海豚链球菌聚为一支,置信度为96%。结果判定引起此次半滑舌鳎腹水病的病原菌为海豚链球菌。对24种抗菌药物敏感性分析试验证实菌株8301对制霉菌素、利福平、青霉素、阿奇霉素等敏感,对罗红霉素、呋喃唑酮等具有抗性。     

半滑舌鳎红皮病的病理组织学观察

通过解剖和HE染色观察患红皮病半滑舌鳎各器官的病理组织学变化.病鱼体表充血、出血,无眼侧皮肤溃烂、淤血,鳃丝溃烂、有大量粘液;肝胰脏和脾脏肿大、淤血出血;小肠充血、出血.皮肤变性坏死以及粘膜下层出血,肌纤维间有血红细胞的渗透和淤积,腮小腺上皮变性坏死,出鳃动脉充血.心肌纤维结构松散、出现大面积断裂,肝脏细胞水肿、细胞变性、细胞核集中.肾脏间质出现局灶性的大面积组织崩解和坏死小肠粘膜下层坏死脱落、出血.结果显示:患红皮病的半滑舌鳎多个组织器官表现为充血、出血和坏死.     

半滑舌鳎苗种工厂化培育试验初报

工厂化养殖是未来水产养殖可持续发展的主要养殖模式。在工厂化车间养殖条件下,对我国北方优良养殖品种半滑舌鳎在南方地区开展苗种培育试验。340 d共培育体长300 mm半滑舌鳎雌鱼13 800尾。结果表明,在我国南方地区工厂化车间内开展半滑舌鳎苗种培育,可安全度过32℃高温,为后续工厂化车间养殖半滑舌鳎试验打下基础。     

半滑舌鳎体色白化相关突变位点的鉴定

对体色相关通路基因的9个错义突变位点进行测序调查,在体色黑化、体色白化和体色正常的半滑舌鳎小样本群体中发现3个突变位点与体色白化存在显著性相关,进一步通过扩大样本验证,显示B型内皮素受体第160位的C/T位点(ertB-160-C/T)与体色白化呈极显著性相关,酪氨酸酶第473的G/A位点(tyr-473-G/A)和花生四烯酸5-脂氧合酶的第1 178位的C/T位点(alox5-1178-C/T)与体色白化呈显著性相关。这3个突变位点分别位于蛋白Periplasmic＿Binding＿Protein＿type1、Tyosinase C-terminal和Lipoxygenase结构域。qRT-PCR检测表明：ertB在白化半滑舌鳎中有眼侧正常和白化皮肤表达没有显著差异,而在无眼侧皮肤的表达显著高于有眼侧皮肤;在白化半滑舌鳎中tyr在有眼侧正常和白化皮肤的表达水平均显著高于无眼侧;白化半滑舌鳎中无眼侧alox5的表达水平均显著高于有眼侧,有眼侧白化区alox5的表达水平明显高于有眼侧正常皮肤。这些与半滑舌鳎养殖群体体色白化相关的突变位点可为今后半滑舌鳎的体色选育提供分子基础。     

半滑舌鳎伪雄鱼性腺发育的组织学研究

[目的]了解半滑舌鳎性逆转的生理发育过程。[方法]对5个家系的半滑舌鳎进行性腺发育的组织学观察、遗传性别鉴定和生理性别分析。[结果]半滑舌鳎性逆转有着明显的群体性,性逆转只发生在特定群体中,有些群体完全不逆转;半滑舌鳎发生逆转的遗传雌鱼在性腺发育过程中,会出现明显的兼性阶段,即雌雄兼有的特有过程。[结论]该研究结果可为剖析半滑舌鳎性逆转的分子、生理机理以及性逆转遗传因子的作用机理提供研究方向和研究线索。     

半滑舌鳎(Cynoglossus Semilaevis)EB1基因的克隆、表达及其对细胞迁移能力的相关性分析

EB1作为一种微管末端结合蛋白,在微管聚合和微管正端蛋白复合体的装配中起着关键的作用。以半滑舌鳎cDNA文库为基础,克隆EB1基因。该基因包含777bp的开放读码框,编码推测的氨基酸258个,分子量为29.497kDa。与其他物种EB1序列同源比对发现,该蛋白包括EB1和CH 2个保守的结构域,以及FYF和EEF/Y 2个保守的三联氨基酸位点。同源聚类分析结果显示,EB1蛋白的系统进化较好地反映物种从低等到高等的进化进程。实时荧光定量PCR结果表明,该基因在脑、鳃、心脏、肠、头肾、肝脏、肌肉、卵巢、脾脏和精巢组织中都有表达,其中,卵巢的表达量最高,比表达量最低的肝组织高14.6倍。对细胞迁移能力的研究中发现,细胞迁出能力显示出与荧光定量PCR中选取的组织中EB1的表达量相符的规律,EB1基因表达量越高的组织细胞迁出的能力越强。     

半滑舌鳎的育苗效果及生物学特征的观察

在水温为21．0～23．7℃,盐度为33．5的条件下,用约7．8×10^5粒受精卵孵出仔鱼约55万尾,孵化率达70％左右,再经过79d的培育,培育出幼鱼2．287×10^5尾,成活率达到41．5％．初孵仔鱼平均全长（3．16±0．22）mm;初孵仔鱼至孵化后3日龄为前期仔鱼,冠状幼鳍形成,大部分仔鱼已开口,逐渐建立外源性摄食关系;4日龄仔鱼进入后期仔鱼阶段,冠状幼鳍继续增高,出现鳍条;5日龄,冠状幼鳍加长;13日龄,仔鱼明显集群,变态开始,进入稚鱼期;22日龄左右,大部分稚鱼右眼已经完全转到左侧,变态基本完成．在35日龄,有的个体发育进入幼鱼期,鳞片完全长齐,体色开始加深．育苗过程中,白化率低于0．5％．全长（LT）与日龄（D）的关系式为LT=6．480e0.033d,体重（W）与日龄的关系式为彬=0．747e 0.117D,全长与体重的回归方程为W形=0．0022LT 32.76。     

沙蚕快速培育半滑舌鳎雌性亲鱼方法的研究

于2012年4月11日至2012年10月3日通过对半滑舌鳎雌性亲鱼投喂沙蚕等鲜活饵料进行强化培育后,结果发现,半滑舌鳎雌鱼生长极快,性腺发育时间提前,产卵期延长,产卵量、受精率和孵化率等显著提高,亲鱼产卵后死亡率大幅度降低。半滑舌鳎亲鱼经过4个月强化培育后,A组(实验组)平均体重由1.25 kg增至1.85 kg,净增重和日增重分别为0.6 kg和4.92 g/d,明显高于B组(对照组)的0.34 kg和2.79 g/d;截至产卵前,A组中198条亲鱼有118条性腺发育成熟,成熟率为59.60%,而B组仅有67条性腺发育成熟,成熟率为33.84%;A组性腺发育成熟的亲鱼产卵后仅有11条死亡,死亡率为9.32%,相反B组有28条亲鱼产卵后死亡,死亡比例高达41.79%,比A组高出32.47%;A组亲鱼性腺于5月26日开始发育,比B组提前了19 d,于9月10日开始产卵,比B组提前了6 d。A组产卵期为24 d,比B组延长了13d;A组亲鱼平均产卵量和平均上浮卵量分别为411.3 mL和263.2 mL,分别高出B组60.6 mL和71.2 mL,且A组平均上浮率(80.97%)明显高于B组(67.65%);A组和B组平均受精率分别为60.37%和47.29%,A组比B组高出13.08%,A组平均孵化率为53.28%,B组为22.40%,A组是B组的2.38倍。两组畸形率都较低,分别为2.36%和4.73%,但A组畸形率不足B组一半。