非洲紫罗兰幼嫩叶片离体培养的技术研究

以非洲紫罗兰幼嫩叶片为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度BA、N从、NAA、GA等探讨了外源激素对其愈伤形成、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响.试验表明:采用MS+0.1～2.0 mg/L(单位下同)6-BA+0.01～0.5NAA培养基,愈伤诱导率在20%以上,采用MS+0.1～1.0 6-BA+0.01～0.5NAA+0.1～1.0GA培养基对芽的生长及增殖效果好,并提出GA具提高不定芽长势和成苗率的作用;采用1/2Ms+0.1～0.5NAA或0.1IBA或0.1～0.5IAA,20d内生根率可达97%以上.在腐叶土:珍珠岩=5:3的基质中驯苗,成活率可达90%以上.     

抗生素对非洲紫罗兰不定芽再生的影响

以非洲紫罗兰无菌幼叶为试材,分别研究了3种抑菌抗生素(头孢霉素、头孢氨苄、羧苄青霉素)和3种筛选抗生素(硫酸卡那霉素、硫酸新霉素、G418)对非洲紫罗兰离体叶片不定芽再生的影响。结果表明:羧苄青霉素和头孢霉素是非洲紫罗兰遗传转化过程中适宜的抑菌抗生素,其适宜浓度均为300mg/L,而头孢氨苄对非洲紫罗兰离体叶片的毒害作用较大,不适宜作为其转化过程中的抑菌抗生素;硫酸卡那霉素和G418对非洲紫罗兰不定芽再生有较强的抑制作用,可以作为筛选抗生素,其适宜的筛选浓度分别为50mg/L和5mg/L,而硫酸新霉素不适宜作为非洲紫罗兰遗传转化的筛选抗生素。     

秋水仙素离体诱导大花蕙兰多倍体试验

在离体培养条件下,以大花蕙兰“红宝石”原球茎为材料,比较了秋水仙素浸泡法和混培法在不同浓度、不同处理时间诱导大花蕙兰体细胞染色体加倍的效果。结果表明：无论是用秋水仙素溶液浸泡处理还是将秋水仙素加入培养基中混培处理,均可诱导大花蕙兰多倍体的产生。但以后者混培法效果较好,在秋水仙素浓度为3%,处理15 d的条件下,诱导率最高达30%。对变异株进行细胞学观察后发现,染色体为2n=4x=80,为四倍体;而二倍体对照染色体为2n=2x=40。     

秋水仙素离体诱导同源四倍体青花菜

 以青花菜品种‘海兹’高频再生试管苗为外植体, 利用秋水仙素离体诱导四倍体。结果表明: 用含秋水仙素200 mg·L ^{- 1}的MS + 0.1 mg·L ^-1NAA + 6.0 mg·L ^{- 1} 6-BA液体培养基处理2 cm长的再生苗48 h, 每个外植体平均可产芽2.1个, 再生植株变异率为83.33% , 四倍体诱导率达79.17%。与二倍体相比, 四倍体植株叶片、花冠、气孔等均表现巨大性; 流式细胞仪倍性鉴定显示, 对照DNA相对含量为200, 四倍体再生植株为400。四倍体根尖染色体2n = 4x = 36。     

秋水仙素离体诱导冬枣和酸枣四倍体

 以冬枣和酸枣组培苗丛芽为材料, 研究了秋水仙素诱导染色体倍性变异的最佳浓度与时间组合、多倍体的特征及其纯化技术。结果表明: 秋水仙素处理的最佳组合为50 mg·L ^{- 1}秋水仙素处理40 d,诱导酸枣和冬枣染色体加倍的频率分别达36.37%和26.67%。嵌合体经3～4次继代分离得到了纯化, 并对纯化后的变异株进行了增殖和生根。变异株根尖染色体数加倍(2n = 4x = 48) , 叶片增厚, 栅栏组织、海绵组织明显发达, 茎尖LⅠ、LⅡ和LⅢ层细胞均显著变大, 充分表明获得的变异株为同质四倍体。同质四倍体的主要特征为: 叶片增大, 叶色浓绿, 叶缘锯齿增大, 保卫细胞增大, 气孔密度降低。变异株在诱导期间表现出生长缓慢、叶片变圆、节间变短的暂时现象。     

秋水仙素在诱导果树多倍体中的应用

在自然界被子植物中,大约有一半或三分之二以上的禾本科植物是多倍体。多倍体的果树一般具有生长旺盛、枝条粗壮、果实大、丰产、果实少籽或无籽、新陈代谢旺盛、酶活性强、对环境适应力强等优点。用药剂诱导果树多倍体已广泛应用,其中以秋水仙素最有效,而且处理后只是对染色体加倍,对染色体结构无显著影响,处理方法简单,对任何果树都能够应用。 秋水仙素诱导的果树多倍体,可能直接成为新的品种在生产中应用(如二倍体通过诱导加倍成多倍体);也可作为亲本用于杂交育种(如二倍体和四倍体杂交培育三倍体品种等)。此外,秋水仙素染色体加倍可以克…     

秋水仙素诱导大葱多倍体的研究

 以章丘大葱种子为材料,研究了秋水仙素处理浓度和时间对大葱体细胞染色体加倍的效果,并利用形态观察,根尖细胞染色体计数及流式细胞仪等方法进行倍性鉴定。结果表明,0.8%秋水仙素处理48 h的诱变效果最佳。诱变植株存在明显“玻璃化”现象,生根困难,移栽后不能成活。通过组织培养去“玻璃化”,获得正常生长的四倍体植株。四倍体植株的细胞染色体数2n = 4x = 32,植株多倍体形态特征明显,植株生长健壮,叶色浓绿,叶面气孔变大,气孔密度减少;株高、葱白长度等与二倍体植株相比极显著增加。     

秋水仙素诱导薄皮甜瓜四倍体研究

以自选薄皮甜瓜品种‘RT-1’为研究对象,用秋水仙素进行茎尖拨滴的方式进行甜瓜同源四倍体的诱变。通过对诱变植株进行形态学和细胞学鉴定,结果显示获得了四倍体植株,最高诱变率达到19.63%,最佳处理为0.2%浓度秋水仙素处理2 d。统计分析结果显示,不同秋水仙素处理时间对诱变率的影响呈现极显著差异。     

秋水仙素对蓝蓟种子诱导变化的研究

以蓝蓟种子为试材,研究了秋水仙素不同浓度(CK、0.05%、0.10%、0.20%、0.30%、0.40%)、不同处理时间(12、24、36、48h)对蓝蓟种子发芽及幼苗生长性状的影响。结果表明:时间相同,浓度不同,浓度越高对蓝蓟种子发芽和生长的抑制作用越强,且有一定的畸变率;叶片表面肥厚粗糙不平,呈暗绿色,浓度越大影响越明显。随浓度增大和处理时间的延长,蓝蓟种子的发芽率、发芽势均呈现降低现象,当浓度为0.40%、时间在48h时发芽率为36%,发芽势为16%。随着秋水仙素浓度增大,蓝蓟苗期的苗高、叶长逐渐减小,叶宽变大,生命力较短。     

菲渊紫罗兰幼嫩叶片高体培养的技术研究

以非洲紫罗兰幼嫩叶片为外植体，以MS为基本培养基，添加不同浓度BA、NAA、GA等探讨了外源激素对其愈伤形成、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响。试验表明：采用MS＋0．1～2．0mg／L（单位下同）6-BA＋0．01～0．5NAA培养基，愈伤诱导率在20％以上;采用MS＋0．1～1.06-BA＋0．01～0．5NAA＋0．1～1．0GA培养基对芽的生长厦增殖效果好，并提出GA具提高不定芽长势和成苗率的作用;采用1／2MS＋0．1～0．5NAA或0．IIBA或0．1～0．5IAA，20d内生根率可达97％以上。在腐叶土。珍珠岩=5：3的基质中驯苗，成活率可达90％以上。     

适于AFLP分析的非洲紫罗兰DNA提取方法研究

以非洲紫罗兰同一植株的叶片和茎段为试材,采用新鲜组织提取、烘干组织提取、冷冻干燥组织提取的3种不同预处理方法,并采用DNAKit、CTAB-Ⅰ、CTAB-Ⅱ3种提取方法,比较分析了DNA片断大小及不同方法提取DNA的纯度与得率,以期确定适用于多酚、多糖、水分含量高的非洲紫罗兰的DNA提取方法.结果表明:采用冷冻干燥组织提取法,经改良的CTABN法,即在2次抽提步骤中,加入一步利用CTAB沉淀液沉淀DNA的方法最适合非洲紫罗兰DNA提取.这样得到的基因组DNA可作为后续分子水平研究的优良PCR模板.     

苹果叶片离体培养中秋水仙素加倍效应的研究

用不同浓度的秋水仙素溶液处理苹果的栽培品种嘎拉试管苗的离体叶片,发现以０．５％的秋水仙素溶液处理４ｄ效果最佳,诱变频率达５６．１％。诱变后获得的四倍体植株在形态学和细胞学上均发生了明显变异。与对照株比较,变异株茎矮、粗壮、节间短、叶片厚、叶色浓绿;叶背面的气孔体积增大,单位面积气孔数目减少、茸毛数量增加;染色体数目加倍,２ｎ＝４ｘ＝６８（对照２ｎ＝２ｘ＝３４）,细胞核核仁数目增加。梢端组织学切片证明,变异株中同质突变体的频率达７３％。     

苹果叶片离体培养中秋水仙素 加倍效应的研究

用不同浓度的秋水仙素溶液处理苹果的栽培品种嘎拉试管苗的离体叶片,发现以0.5 %的秋水仙素溶液处理4 d效果最佳,诱变频率达56.1 %。诱变后获得的四倍体植株在形态学和细胞学上均发生了明显变异。与对照株比较,变异株茎矮、粗壮、节间短、叶片厚、叶色浓绿;叶背面的气孔体积增大,单位面积气孔数目减少、茸毛数量增加;染色体数目加倍,2n＝4x＝68(对照2n＝2x＝34),细胞核核仁数目增加。梢端组织学切片证明,变异株中同质突变体的频率达73 %。     

Cobalt requirement in tissue culture of three species: Brassica oleracea L., Passiflora mollissima Bailey,and Saintpaulia ionantha Wendl.

Summary

Consideration of the formulation of the Murashige and Skoog (1962) medium and the published work on the relationship of cobalt and plant growth led to a study of the effect of cobalt on the growth of three species in tissue culture. Passiflora mollissima Bailey exhibited reduced viability and increased leaf abnormalities in the absence of cobalt, due possibly to the increased level of ethylene, while Saintpaulia ionantha Wendl. had an increased growth rate and plantlet numbers in the absence of cobalt. Brassica oleracea L. produced, in the absence of cobalt, fewer plantlets and abnormal leaf structures. The results indicate that the effect of low (10^?7 M) concentrations of cobalt varies with species, and that inhibitory effects on growth and plantlet production can occur.     

秋水仙素对七叶一枝花种子多倍体诱导的影响

以七叶一枝花种子为试材,分别用浓度为0.025%、0.050%、0.100%、0.150%、0.200%的秋水仙素处理七叶一枝花种子12、24、48、60h,研究不同浓度的秋水仙素及不同处理时间对七叶一枝花多倍体诱导的影响,以期为进一步选育七叶一枝花优良多倍体品种提供材料,为探索秋水仙素诱导七叶一枝花多倍体育种研究提供参考。结果表明:秋水仙处理的七叶一枝花根尖均有明显的膨大现象,其中浓度为0.050%秋水仙素处理12h的根尖膨大率最高,为51.69%;秋水仙素处理的七叶一枝花种子的胚根短且粗、胚轴伸长;经秋水仙素处理种子萌发的组培苗植株较对照植株的根茎明显加粗、节间变短。采用流式细胞仪检测发现,秋水仙素处理样品的组培苗的幼根细胞DNA荧光强度约是对照细胞DNA荧光强度的1.88倍,表明经秋水仙素处理的七叶一枝花种子萌发的组培植株细胞染色体出现了部分加倍。     

秋水仙素处理离体叶片获得皇家嘎拉苹果四倍体植株

采用皇家嘎拉苹果（Malus domestica Borkh．）离体新梢叶片作为外植体，研究了不同浓度的秋水仙素长时间处理（5 d）诱导四倍体的效率。结果表明，以不定芽再生培养基附加25 mg／L秋水仙素效果最好，最高在36．7％的叶片外植体上获得了四倍体植株。高浓度（75～200　mg／L）秋水仙素处理严重抑制组织的再生。采用流式细胞技术测定出诱变植株的细胞核DNA含量比对照高出一倍，确定了植株为四倍体。四倍体植株不仅在遗传上而且在外观形态上也明显区别于二倍体。四倍体植株已移栽于大田，并进行了嫁接育苗和大树高接。     

不同氮素形态对蓝莓叶片矿质元素含量的影响

对1 a生蓝莓"斯巴坦"和"北陆"施入不同氮素形态的营养液,分析叶片矿质元素含量.结果表明:不同氮素形态处理对2种蓝莓叶片中N含量影响明显且结果基本一致,其中铵态氮处理的叶片N含量最高.不同氮素形态处理对2种蓝莓叶片中其他矿质元素含量影响不明显且2品种之间有所差别,铵态氮处理的"斯巴坦"叶片中P、K、Ca、Mg、Mn含量最高,铵态氮∶硝态氮=1∶1处理的"北陆"叶片中P、K、Ca、Fe、Mn、B含量最高.     

秋水仙素诱导象鼻兰种子产生多倍体

以象鼻兰种子为试验材料,采用浸泡法,研究了秋水仙素处理对蝴蝶兰种子染色体加倍的影响,以期获得诱导多倍体的适宜条件。结果表明:秋水仙素浸泡法诱导种子染色体加倍时,种子在液体培养基中培养5d,再采用0.20%秋水仙素处理1d的处理效果最好,萌发率达到6.41%,高于1.96%的自然萌发率,四倍体、嵌合体诱导率分别达到了27.75%、34.84%;四倍体植株与二倍体植株相比,形态与气孔特征均发生了明显变化,形态特征表现为,植株粗壮、根系发达且粗壮、植株生长较快等;气孔特征表现为单位面积气孔数减少,气孔增大,长宽分别增长25.19%和26.19%。该研究得到了秋水仙素浸泡象鼻兰种子诱导染色体加倍的适宜条件且提高了象鼻兰种子的萌发率,获得了四倍体植株和嵌合体植株,为把象鼻兰优异基因高效导入栽培品种奠定了基础,为蝴蝶兰体细胞无性系变异新品种的培育提供了参考依据。     

秋水仙素对平菇单核菌株生长的影响

以平菇菌株"灰美2号"的单核菌株为试验材料,利用5个浓度梯度的秋水仙素溶液对单核菌株的菌丝体进行诱变处理,通过拮抗试验、菌丝生长情况、出菇试验、出菇后孢子核酸含量的测定和出菇菌株菌丝形态的观察,探究不同浓度秋水仙素对平菇菌株的影响,以期为秋水仙素食用菌诱变育种提供参考依据.结果表明:不同浓度秋水仙素处理的菌株与CK菌株存在不同程度的拮抗现象;0.01％秋水仙素处理菌株的菌丝生长速率最快,且菌株菌丝浓密,边缘整齐;出菇试验表明各处理后菌株的产量均明显低于CK,其它农艺性状以及核酸含量与CK无明显差异,同时发现平菇单核菌株出菇后菌丝变为双核菌丝,但由单核菌株出菇后变为双核菌丝的菌株农艺性状明显低于双核菌株.分析发现,0.01％～2.00％浓度秋水仙素处理的平菇单核菌株的农艺性状和核酸含量并未发生变化,但较低浓度的秋水仙素可以加快菌丝生长速度.     

秋水仙素诱导中间锦鸡儿多倍体的研究

 以中间锦鸡儿（caragana intermedia）种子为试验材料,通过秋水仙素浸泡种子的方法研究了不同浓度及作用时间下秋水仙素对其染色体加倍的诱导效果。结果表明,直接浸泡种子,以0.3%秋水仙素浸泡48 h为最佳,诱变率为53.3%;种子经萌发12 h后再处理,以0.15%秋水仙素浸泡36 h诱变率最高,为73.3%。对变异株根尖进行染色体计数后发现,二倍体对照2n = 2x = 16,变异株2n = 3x = 24为三倍体,变异株2n = 4x = 32为四倍体,同时也发现存在嵌合体现象。