东方百合明星无性快繁体系的建立

【目的】以东方百合品种明星无菌叶为材料建立快繁体系,为其种球产业化生产提供技术支撑。【方法】以花器官培养获得的无菌小鳞片及叶片为材料,以添加不同浓度6-BA、2,4-D的MS培养基诱导不定芽及小鳞茎产生;以不同浓度的蔗糖诱导小鳞茎的膨大及根的产生;以珍珠岩、草炭、蛭石的混合基质作为小鳞茎移栽基质。【结果】用6-BA诱导无菌小鳞片产生不定芽时以1.5 mg/L为宜,诱导率为75.0%;用2,4-D诱导无菌叶片产生小鳞茎时以2.0 mg/L为宜,诱导率为91.7%;添加70.0 g/L蔗糖的MS培养基适宜小鳞茎膨大及根的产生;带小鳞茎及根的组培苗在珍珠岩∶草炭∶蛭石=1∶1∶1的基质中移栽成活率最高,达100.0%。【结论】东方百合品种明星可利用无菌叶片建立无性快繁体系。     

‘Sorbonne’百合器官离体培养再生鳞茎的研究

通过对东方百合索蚌鳞片、鳞片叶分段诱导再生鳞茎以及鳞茎膨大的研究,建立了快繁体系。结果表明:诱导鳞片及鳞片叶产生再生鳞茎的最佳培养基都为MS+6-BA0.2(单位:mg·L-1,下同)+NAA0.2+2,4-D0.1;三种放置鳞片的方式对诱导生成的鳞茎的数量、鲜重、诱导率影响不显著;鳞片叶基部切段再生鳞茎的诱导率最高,其次为中部切段,由下向上再生鳞茎的诱导率逐渐降低;最适合诱导再生鳞茎的蔗糖浓度为30~60 g·L-1,黑暗条件下促使鳞茎膨大的蔗糖浓度以低于90 g·L-1为宜,散射光条件下促使鳞茎膨大的蔗糖浓度以低于120 g·L-1为宜。     

金石和伯爵百合鳞茎诱导及膨大研究

为找到适应金石和伯爵百合鳞茎诱导和膨大的最适培养基及光照条件,以金石和伯爵百合的愈伤组织为材料,研究激素、蔗糖和光周期对鳞茎诱导和膨大的影响。结果表明,MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+蔗糖60 g/L是诱导愈伤组织形成小鳞茎的最佳培养基;该培养基可诱导金石组培苗叶片和根直接产生不定芽;30 g/L的蔗糖质量浓度对金石和伯爵百合小鳞茎的增质量效果均好于其他蔗糖浓度下小鳞茎的增质量效果;光环境有利于小鳞茎的膨大。研究可为金石和伯爵2个百合品种的鳞茎商业化生产提供科学参考。     

不同基质对康佳德澳百合移栽成活率的影响研究

【目的】研究不同基质对康佳德澳百合组培苗的移栽成活率情况及生长健壮度的影响。【方法】试验以康佳德澳百合组培苗为试材,用草炭土、蛭石,珍珠岩为基质原料,将其进行7种不同处理。【结果】本身富含有机质的草炭土加珍珠岩混合的基质疏松,保水保肥性好,是最适宜于康佳德澳百合成活的基质,成活率可达100%;草炭土次之,成活率98%;最差为蛭石,成活率30%。【结论】康佳德澳百合组培苗移栽时用草炭土和珍珠岩各50%混合做基质,组培苗成活效果最好。     

香水百合鳞片组织培养研究

为了提高香水百合繁殖系数和速度,生产出优质脱毒苗,满足工厂化生产,选用香水百合鳞茎的鳞片作为外植体,对外植体的消毒时间、生长调节剂种类和浓度对鳞片诱导、增殖、生根及移栽基质的影响进行研究。结果表明:香水百合鳞片用75%酒精消毒30s,0.1%升汞消毒12min效果较好;鳞片最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,平均每鳞片分化芽数达6.52个;鳞片最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系数达5.7,鳞片最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,生根率达到100%,平均根数5.6个,根长3.5cm,长势好。移栽基质以采用蛭石:草炭为=4:1和蛭石:蚯蚓粪=4:1作为移栽基质时成活率均最高,达到93.3%。     

东方百合Tiger Woods离体快繁技术体系的建立

为探讨东方百合新品种Tiger Woods的组培快繁技术,以其花器官为外植体获得无菌试管苗,以无菌苗鳞片和叶片为次级外植体诱导不定芽形成,通过扩繁、生根获得完整植株,炼苗后移栽。结果表明:花梗与花丝诱导能力较强,其最适诱导培养基分别为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)与MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)。无菌苗鳞片、叶片直接诱导产生不定芽的最适培养基为MS+TDZ 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)与MS+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1),诱导率为100%和93.33%,诱导系数为4.48和2.88;而上述两种外植体间接诱导愈伤组织的最适培养基为MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+TDZ 0.5mg·L~(-1)与MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),愈伤诱导率为93.33%和96.67%,分化系数为4.53和3.63。小鳞茎膨大最适培养基为MS+蔗糖75g·L~(-1),生根最佳培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1),移栽最佳基质为草炭:蛭石:珍珠岩=1∶1∶1,成活率达91.11%。     

NAA和2,4-D对东方百合组织培养的影响

借助正交回归多项式建立数学模型的方法,研究了NAA对东方百合"蒂伯"(Tiber)鳞片诱导小鳞茎及2,4-D对小叶片诱导愈伤组织的影响,以探讨东方百合组织培养中NAA及2,4-D的用量范围及最佳用量.结果表明, NAA诱导离体鳞片外植体产生小鳞茎的用量范围为0.15～0.9 mg·L-1,最佳用量为0.69 mg·L-1;2,4-D诱导叶片形成愈伤组织的最佳用量为3.2 mg·L-1.     

不同因子对兰州百合组培小鳞茎诱导及膨大的影响研究

为了缩短兰州百合生长周期,提高百合品质,以兰州百合组培小鳞茎为材料,研究了大量元素、NAA、6-BA、培养基状态、蔗糖、2,4-D等单一因素对百合试管鳞茎形成和膨大的影响。结果表明,高浓度的大量元素有利于鳞茎的膨大,而不利于鳞茎的诱导;大量元素浓度为2MS时鳞茎平均直径最大,但新增鳞茎数下降到4.56个;NAA浓度为0.2 mg/L时新增鳞茎数最多且鳞茎平均直径最大;6-BA浓度为0.1 mg/L时最有利于鳞茎的形成和膨大,新增鳞茎数5.25个,鳞茎平均直径10.642 mm;固体培养基对鳞茎的形成效果明显,而半固体更有利于鳞茎的膨大;蔗糖浓度为90 g/L时新增鳞茎数最多,120 g/L时鳞茎平均直径最大;2,4-D浓度0.02 mg/L处理对鳞茎的形成和膨大效果更好。     

激素和光照条件对百合“普瑞头”鳞片和叶片的诱导培养

以亚洲百合“普瑞头”(Prato)鳞片为外植体,研究了百合鳞片的消毒方式、不同光照条件对百合鳞茎及再生植株的叶片诱导的影响.结果表明,0.1％HgCI2消毒处理8min是最适合百合鳞片的消毒方式,成活率最高;鳞片诱导过程中发现,暗处理有利于不定芽的形成,最佳诱导培养基为MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LNAA;暗培养有利于促进再生植株叶片愈伤组织的形成,最佳诱导培养基为0.1mg/LMS+2,4-D.     

东方百合‘Siberia’无病毒原原种直接再生体系建立

为快速获得无病毒东方百合‘Siberia’原原种用经RT-PCR技术检测无CMV、LSV、LMoV病毒的‘Siberia’种球为试材,以中外层鳞片为外植体组培获得无菌试管苗,以无菌苗鳞片为次级外植体,研究了不同植物生长调节剂对试管内小鳞茎直接再生的影响。结果表明,试管内小鳞茎直接再生的最适培养基为MS+2,4-D 1.0 mg/L,诱导率为92.31%,诱导系数为4.15。小鳞茎膨大最适培养基为MS+蔗糖90 g/L,生根最适培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L,移栽成活率可达100%。     

铁炮百合离体再生体系的建立

以铁炮百合无菌苗的叶片、鳞片为外植体,进行铁炮百合再生体系的研究。结果表明:鳞片的诱导分化能力高于叶片,鳞片分化培养基(MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)的分化率高达90.98%。用叶片为外植体,不同部位对不定芽的诱导影响较大,以叶片中部分化能力最强,上部次之,下部最差。叶片分化培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,分化率为85.36%。2,4-D浓度对愈伤组织的诱导影响显著,愈伤诱导培养基以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D为佳,愈伤率达80%以上。     

细叶百合的无性繁殖

以细叶百合（Lilium pumilum DC.）的鳞片为材料，通过扦插繁殖方法，观察不同基质、鳞茎的不同生长年龄、鳞茎的外、中、内层及同一鳞片的上、中、下段对鳞片繁殖小鳞茎的影响。结果表明：在扦插基质的选择实验中，用3年生细叶百合做扦插材料，25℃，避光条件下，以草炭 珍珠岩（1：1）的混合物为基质时，鳞片产生的小鳞茎数最多，150片鳞片可产生172个小鳞茎；从年龄效应和位置效应的实验观察，4年生细叶百合鳞片生成小鳞茎最多，小鳞茎的平均直径也较大；鳞茎的外、中层鳞片的下部在适宜的条件下比鳞片的中、上部容易诱导出鳞茎。     

亚洲百合‘红色警报’组培快繁研究

通过对亚洲百合‘红色警报’鳞片进行组织培养,研究了不同激素浓度对外植体、不定芽分化、增殖及诱导生根的影响。结果表明:最佳启动培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA,分化率为76.67%;最佳增殖培养基MS+BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L,繁殖系数3.85,苗高2.4cm,生长势强;小鳞茎在生根培养基1/2MS+0.3mg/LNAA中的生根率为94%,组培苗驯化移栽在基质草炭∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1表现最佳,出苗率最高,为85%。     

‘Siberia’百合再生体系的建立

以东方百合‘Siberia’离体鳞片为外植体,研究不同激素质量浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎形成、叶片和叶柄再生及生根的影响。结果显示:最适不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率85%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增值系数为3.83;不定芽形成鳞茎的适宜培养基为:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+7%蔗糖,增值系数2.47。鳞片叶片的最适再生培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,分化率为92.5%;叶柄的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率为83.3%;暗培养对鳞片叶片及叶柄的再生无显著性的差异,分化率均在80%以上;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率100%。     

东方百合遗传转化组培体系的建立

为建立高效稳定的基因转化受体系统,以东方百合"西伯利亚"(Lilium orienta l"Siberia")无菌苗叶片和鳞片叶为外植体,使用不同种类和浓度的生长素与细胞分裂素、蔗糖、抗生素筛选等方法进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导及生根等研究。结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS+KT2.0+NAA0.2mg·L~(-1),试管苗小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT2.0 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1)+75g·L~(-1)蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1),试管苗鳞片叶分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.2 mg·L~(-1)。生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)。抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为100 mg·L~(-1),鳞片叶为120 mg·L~(-1)。     

百合鳞片薄层细胞培养高效再生体系的建立

为了建立适宜百合遗传转化的受体系统,以铁炮百合品种白天堂无菌苗的叶片和鳞片为外植体,薄层切割后接种于添加不同植物激素的培养基上,观察其植株再生情况,并对其建立的再生体系的遗传转化前景进行了分析比较.结果表明,叶片薄层细胞几乎没有再生能力;2,4-D和Piclofram均可诱导横向薄层鳞片细胞直接产生鳞茎芽,最适的培养基是MS+2,4-D 0.002 mg/L,在30 d内就可直接诱导出鳞茎芽,再生率达到100%,平均出芽数为2.38;MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.5 mg/L可以诱导横向薄层鳞片细胞产生愈伤.综合考虑,百合鳞片薄层培养以MS+2,4-D 0.002 mg/L诱导的直接再生体系为最佳的再生体系.     

重瓣东方百合Double surprise离体快繁技术体系的建立

为探讨东方百合新品种Double surprise的组培快繁技术,以其花瓣为初级外植体,以初级外植体诱导形成的无菌苗鳞片和叶片作为次级外植体,分别探讨了外植体诱导、不定芽增殖、组培苗生根以及炼苗移栽的较优条件。结果表明:花瓣诱导不定芽的较优培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1,诱导率可达86.67%,诱导系数为2.73;MS+TDZ2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1为诱导无菌苗鳞片和叶片直接产生不定芽的较优培养基,不定芽诱导率分别为88.89%和91.11%,诱导系数分别为6.67和5.67;MS+PIC1.0mg·L-1+TDZ0.5mg·L-1为无菌苗鳞片间接诱导愈伤组织的较优培养基,愈伤组织诱导率和分化系数分别为90.00%和3.27;MS+PIC 1.0 mg·L-1+TDZ 0.1 mg·L-1为无菌苗叶片间接诱导愈伤组织的较优培养基,愈伤组织诱导率和分化系数分别为93.33%和3.70;较优的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1;不定芽生根的较优培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1;草炭∶蛭石∶珍珠岩(体积比)=1∶1∶1的混合基质为Double surprise较优移栽基质,成活率可达88%。     

山西野生卷丹百合鳞茎组织培养

以卷丹百合(Lilium lancifolium)鳞茎鳞片为外植体,探讨影响其分化的主要因素。正交试验结果表明,诱导卷丹百合鳞茎鳞片不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞茎鳞片愈伤组织最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;继代培养中发现,小鳞茎在添加50 g/L蔗糖MS培养基中生长量最大,添加40 g/L蔗糖有利于愈伤组织生长,且小鳞茎生根率高,生根数量多。     

不同包埋处理对东方百合鳞片再生小鳞茎的影响

为完善东方百合繁育技术体系,以‘西伯利亚’为试材,研究了不同消毒药剂、激素处理、基质配方对百合鳞片繁殖的影响,利用隶属函数法对不同处理的各项指标进行综合评价。结果表明：东方百合‘西伯利亚’鳞片再生小鳞茎最佳消毒药剂为咪鲜胺锰盐1 000 mg/L;最佳外源激素处理为SA200 mg/L;包埋基质为草炭∶蛭石∶珍珠岩=6∶2∶1最有利于提高小鳞茎的繁殖系数,基质为椰糠更有利于生成较大规格的鳞茎。     

东方百合试管鳞茎驯化移栽研究

以东方百合‘西伯利亚’的试管鳞茎为材料,研究试管鳞茎的根长及直径大小、移栽基质等因素对移栽效果的影响,结果表明:A2(进口草炭∶蛭石∶珍珠岩为7∶1∶2)基质是百合试管鳞茎驯化移栽适宜的基质,其移栽成活率、鳞茎鲜重及鳞茎围径都显著高于其他处理;根原基≤1.5cm时移栽成活率高,根系长度大于3.0cm移栽成活率低;试管鳞茎直径越大,移栽成活率、抽薹率、鳞茎鲜重及鳞茎围径越大,试管鳞茎直径大于1.5cm时移栽成活率、抽薹率最高。