毛白杨内生菌优势种毛壳ND35室内拮抗作用的研究

对毛白杨内生真菌区系种群分析 ,筛选出优势种毛壳ND35 ,并测试了它对 6种常见林果病害病原真菌的拮抗作用。结果表明 ,毛壳ND35是一种广谱性拮抗菌 ,对供试的 6种病菌存在不同程度的抑制作用。可降低病菌菌丝的生长率和孢子的萌发率 ,并对小核菌的菌核进行重寄生 ,从而抑制其萌发。毛壳ND35的菌丝还产生吸器、附着枝等结构对立枯丝核菌 (Rhizoctoniasolani)等病菌的菌丝进行重寄生 ,在显微镜下可观察到病菌的菌丝被缠绕、穿透、断裂等现象。抑菌带和抑菌圈的产生证明抗生活动是毛壳ND35的主要拮抗作用机制之一。对活体毛白杨组培苗进行人工接种试验 ,结果用毛壳ND35预先接种的苗木发病率为零 ,明显低于只接烂皮病菌的对照发病率 5 3 33%,进一步证实了毛壳ND35对植物病害的生物防治潜能。     

球毛壳ND35对早实板栗实生苗生长发育的影响

以球毛壳ND35和早实板栗为试验材料。在田间观察了球毛壳定殖到板栗实生苗上对后期苗木生长和开花的影响。为该菌株的开发利用提供新的依据。     

用螺旋毛壳(Chaetomium spirale) ND35菌防治果树腐烂病的试验研究

报道了在离体和田间条件下螺旋毛壳(C. spirale) ND35菌株对苹果树腐烂病的初步抑菌试验结果.PDA平板对峙培养的结果显示在毛壳ND35和苹果树腐烂病菌的两菌落间出现明显的抑菌带;毛壳ND35培养液粗提液比麦芽浸膏培养液的粗提液有更强的抑制病菌菌丝生长的作用.温室和田间生防试验表明用接种毛壳ND35的处理,其苹果树腐烂病发病率明显低于其它处理,包括直接种苹果树腐烂病菌和烫伤处理,及健康对照.再分离试验表明毛壳ND35可成功地在苹果树枝干部位定殖,而且固体麦麸菌剂的定殖率高于玉米粉液体菌剂的定殖率.但是玉米粉液体菌剂在田间的生防效率较好.     

球毛壳抗生物质对板栗疫病菌的抑制作用

通过液体发酵培养球毛壳ND35菌株,有机溶剂萃取,旋转蒸发仪浓缩,获得球毛壳抗生物质的粗提物,并对该粗提物进行了平板抑菌活性检测和板栗水培枝条抑菌活性检测。结果表明：球毛壳ND35抗生物质能有效地抑制板栗疫病菌的菌丝生长和分生孢子的萌发;板栗离体水培枝条抑菌效果达66.29%,与对照相比,在一定程度上降低了发病率,抑制了板栗疫病菌在枝条上的扩展和定殖。这为将来球毛壳抗生物质在田间应用打下了基础。     

细胞壁降解酶在落叶松-杨栅锈菌与寄主互作过程中的作用

对落叶松-杨栅锈菌入侵不同抗性寄主过程中的细胞壁降解酶活性进行测定,明确聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、果胶甲基反式消除酶(PMTE)、羧甲基纤维素酶(CX)、β-葡萄糖苷酶(β-G)4种降解酶在该菌入侵中的作用.研究发现:抗病和感病组合中PMG均在接种后第2天和第5天出现2个活性高峰,在第5天时达到最大值.PMTE、CX和β-G活性分别第3、2和3天达到活性高峰,其中PMG和PMTE的活性高,而Cx和β-G的活性则相对较低.在感病组合内PMG、PMTE、CX、β-G活性较抗病组合大,表明这4种细胞壁降解酶对该菌入侵起一定的作用.     

木霉菌和毛壳菌对板栗疫病的抗生作用

哈茨木霉Trichoderma harzianumT88菌株、深绿木霉T.atrovorideT95菌株和螺旋毛壳Chaetomium spiraleND35菌株与板栗疫病菌Cryphonectria parasiticaLY菌株的平板对峙培养结果表明,木霉菌对营养和空间有强烈的竞争作用,表现在可使病原菌菌丝消解,对病菌菌丝的生长有明显的抑制作用;毛壳菌生长速度较慢,但可形成抑菌带,使病菌不扩展。室内水培枝条接种试验结果表明,接种拮抗菌的拮抗效果好,而且先接种拮抗菌后接种病原菌的处理比拮抗菌和病原菌同时接种的处理效果还好,毛壳菌没有木霉菌的作用明显。接种枝条的木霉菌、毛壳菌和病原菌的再分离结果表明,T95和ND35的定殖能力强。     

角毛壳菌降解粗纤维基因的筛选

以角毛壳菌菌丝体为材料,构建cDNA文库并进行了部分表达序列标签(ESTs)的分析。文库的滴度为1.02×106pfu/mL,重组率为95.3%,插入片段平均长度大于1.2kb。在cDNA文库中随机选择克隆从5′端测序得到1219个高质量ESTs,拼接为804条独立基因。其中460条(57.2%)与NCBI中非冗余蛋白质库(NR)已知基因有不同程度同源性的代表已知功能基因,344(42.8%)条独立基因与NR库中基因没有显著同源性的代表未知功能新基因。从已知基因中鉴定出了降解粗纤维的基因:β-1,4-内切葡聚糖酶基因、β-葡萄糖苷酶基因、β-内切木聚糖酶基因、木糖苷酶基因、漆酶基因。     

核桃基腐病菌产生细胞壁降解酶的种类及其活性分析

通过致病力的测定筛选出两株强致病力核桃基腐病菌菌株HA-1和KY-S,通过对酶活性的分析,研究证实核桃基腐病菌均能分泌4种细胞壁降解酶(CWDEs):β-葡萄糖苷酶、多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(Cx)。在不同碳源培养条件下,核桃基腐病产生细胞壁降解酶的活性存在一定差异,以蔗糖为碳源时,菌株分泌的各种细胞壁降解酶活性较高。在4种培养基中,达到各酶活性高峰的时间仅为3d。在蔗糖培养基中,核桃基腐病菌产生的Cx最大酶活性为1495.5mU/mL,明显高于其他3种酶,且显著高于其他培养基产生的Cx。但在树皮为碳源的培养基中Cx的活性最低。在CMC为碳源的培养基中PG、PMG的活性最高,分别为826.5mU/mL和661.3mU/mL,此外,以果胶为碳源时产生的PMG的活性最高为1068.0mU/mL。     

杨树内生菌球毛壳抗生物质的培养基优化、检测和动力学

以杨树内生真菌球毛壳ND35为供试菌株,采用L<,16>(4<'5>)正交试验法对液体培养基进行优化;利用pH纸色谱、捷克八溶剂系统纸色谱方法及紫外-可见光谱扫描法对该内生菌的抗生物质进行理化性质初步分析;用薄层层析、高效液相色谱及平板抑菌法检测分析该菌粗提液的活性成分及对杨树腐烂病菌的抑菌效果;对抗生物质液体培养的主要动力学指标进行分析.结果表明:优化后培养基配方为:1%葡萄糖,1%蔗糖,0.5%牛肉膏,0.02%硫酸亚铁,0.01%维生素B<,1>,pH值为7.球毛壳ND35菌株的抑菌作用分为活菌体的抑菌作用和代谢活性物质的抑菌作用,液体培养后的菌丝胞内和胞外均产生抗生物质,并具有较好的热稳定性.该抗生物质pH值为7,易溶于有机溶剂,难溶于水.球毛壳ND35抗生物质在221 nm处有最大的吸收峰,该抗生物质有4个组分,均对杨树腐烂病菌有抑菌活性.生长动力学表明,在液体发酵培养过程中,球毛壳ND35抗生物质的产量、吸光值、pH及其抑菌率是连续变化的.