黄芩离体再生体系的建立

为了建立黄芩的离体再生体系,以黄芩幼苗的茎段为材料,研究了不同的激素浓度配比对黄芩外植体诱导愈伤组织、再生芽和根的影响。结果表明:黄芩茎段在MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)的培养基中愈伤组织的诱导效果最佳;在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)的培养基中黄芩茎段的再生芽的分化效果最好;在1/2MS+NAA 0.4 mg·L~(-1)的培养基中,黄芩茎段再生根的分化效果最好,数量最多。     

谷子种子愈伤组织的诱导与植株再生

[目的]研究不同激素种类和浓度配比对晋谷21号谷子种子愈伤组织诱导及植株再生的影响,旨在筛选最佳的愈伤组织诱导和分化的激素配比,建立稳定高效的谷子种子再生体系。[方法]以晋谷21号谷子的成熟种子为外植体,研究不同激素种类和浓度配比对晋谷21号谷子愈伤组织诱导及植株再生的影响。[结果]愈伤组织的诱导以MS培养基中附加2,4-D的效果要优于NAA,同时加入适合浓度的6-BA与之配比可以提高愈伤组织的质量,以MS培养基中附加2,4-D 2.0 mg·L~(-1)、6-BA 0.2 mg·L~(-1)时,愈伤组织诱导率最高,达92.86%; 6-BA诱导愈伤组织分化的效果优于ZT,培养基中附加6-BA 1.0 mg·L~(-1)时,愈伤分化率最高,为13.33%;将谷子分化苗转接于MS培养基上可诱导生根。[结论]诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0 mg·L~(-1)2,4-D+0.2 mg·L~(-1)6-BA,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA。     

杉木不同器官愈伤组织和再生芽的诱导效率

以杉木未成熟胚、种子发芽的下胚轴、子叶以及组培苗茎段为外植体,研究基本培养基、不同激素组合及浓度对杉木愈伤组织的诱导及再生芽发生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对不同外植体的愈伤组织诱导率有显著影响,对未成熟胚愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 2 mg·L~(-1)+6-BA 1 mg·L~(-1)+KT 1 mg·L~(-1),诱导率为92.7%;对子叶、下胚轴愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率分别为97.4%和95.2%;对组培苗茎段愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 1 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率为86.7%;MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织诱导再生芽的最佳培养基,诱导率为80%。质地疏松的愈伤组织其再生芽率最高(65%),单个质地均匀的愈伤组织其再生芽数可达6个;基本培养基对愈伤组织质地形态有较大影响,1/2MS培养基诱导出愈伤组织质地较疏松,MS培养基诱导出的愈伤组织质地均匀且表面可见颗粒状细胞团,DCR培养基诱导出的愈伤组织质地较密。     

旱半夏组织培养体系优化

为研究旱半夏组织培养体系的最优激素配比,本试验以旱半夏块茎为材料,以MS为基础培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA激素,设置9个处理,筛选诱导愈伤组织、不定芽分化以及生根最适培养基。研究了不同激素以及不同的浓度配比对半夏组织培养的影响。结果表明:6-BA、NAA两种激素以及不同浓度配比均对半夏愈伤组织诱导、不定芽分化以及生根有显著影响,其中添加0.8mg·L~(-1)6-BA和0.4mg·L~(-1) NAA时出芽数最多,出芽率达到90%;生根培养中,添加1.0mg·L~(-1) NAA时生根数最多,平均根长达到6.4cm。因此,半夏最佳愈伤组织诱导以及不定芽分化的条件为:MS+0.8mg·L~(-1) 6-BA+0.4mg·L~(-1) NAA;最佳生根培养基为:1/2 MS+1.0mg·L~(-1) NAA。     

‘海尔特兹’树莓组织培养及其叶柄再生体系的建立

为研究树莓的工厂化育苗技术,提高树莓育苗质量和效率,以树莓品种‘海尔特兹’带腋芽的茎段为试验材料,通过对其腋芽初代培养、茎段增殖、叶柄不定芽和根的诱导等过程中植物生长物质合理组合,及防止茎段褐化的最适p H值进行筛选,建立‘海尔特兹’树莓组织培养及其叶柄再生体系。结果表明,腋芽诱导的最佳培养基为MS+1.0mg·L~(-1)6-BA+1.0mg·L~(-1)IAA,萌芽率100%;茎段最佳增殖培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)6-BA+0.1mg·L~(-1)NAA,p H值为5.70,增殖系数为5.0;诱导叶柄产生愈伤组织再生不定芽的最佳培养基为MS+2.0mg·L~(-1)TDZ+1.0 mg·L~(-1)IBA,其愈伤组织诱导率为100%,不定芽再生率为53%;幼苗最佳生根培养基为1/2 MS+0.7 mg·L~(-1) IBA,生根率达95%。     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

多肉植物大和锦的组织培养

以大和锦叶片为外植体材料,研究不同消毒措施、不同激素浓度配比对大和锦愈伤组织诱导、分化新芽的影响,以期为大和锦快速再生体系的建立,改良大和锦提供一定的参考依据。结果表明,最佳的消毒方式为健康的大和锦叶片用无菌水冲洗1h,75%乙醇浸泡30s,1%次氯酸钠浸泡17min,污染率低至10.00%;诱导大和锦叶片愈伤组织的最佳培养基为MS+3.0mg·L~(-1)6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+1.0mg·L~(-1) KT;大和锦愈伤组织分化新芽的最佳培养基为MS+3.0mg·L~(-1)6-BA+0.2mg·L~(-1) NAA。     

海州常山叶片愈伤组织诱导及不定芽再生

为获得海州常山愈伤组织和不定芽,以海州常山叶片作为外植体,研究了不同消毒方法、培养基种类、培养条件和植物生长调节剂配方对海州常山叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。研究结果表明:海州常山叶片灭菌最适方法为75%酒精处理30 s,再用0.1%Hg Cl2溶液处理5 min;暗培养有助于愈伤组织的诱导;愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA 0.50 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1),诱导率最高达66.67%;愈伤组织最适增殖培养基为MS+6-BA 0.50 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1),愈伤组织平均大小达21.76 mm;最佳分化培养基为MS+6-BA 0.50 mg·L~(-1)+NAA 0.01 mg·L~(-1),分化率为13.33%。     

特色马铃薯品种红宝石再生系统的筛选

采用3因素3水平L9(34)正交试验设计,以特色马铃薯品种红宝石试管苗茎段为试材,分别选用3种植物激素(诱导愈伤用NAA,2,4-D,6-BA;诱导分化用NAA,GA3,6-BA)的3个水平对其茎段的离体再生进行研究,筛选适合红宝石的愈伤和芽分化诱导培养基。结果表明,不同培养基表现出不同的诱导效果,愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1,愈伤率达100%;植株再生最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+GA31.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,再生率为80.3%,分化后再生苗健壮。     

马铃薯延薯4号再生体系建立

为了建立马铃薯高效、稳定离体再生体系,以延薯4号无菌试管苗茎段为材料,通过对茎段再生体系的筛选,优化了培养基内最佳激素配比浓度。结果表明:马铃薯延薯4号无菌试管苗茎段诱导愈伤组织最适培养基为:MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+NAA1.0 mg·L~(-1)。茎段丛生芽分化的最适培养基为:MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+NAA0.20mg·L~(-1)+G A_31.0mg·L~(-1)。     

欧洲卫矛叶片愈伤组织诱导及培养

以欧洲卫矛(Euonymus europaea)叶片为外植体,研究不同消毒时间对叶片消毒的影响,不同激素种类及质量浓度对愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。结果表明:75%酒精30 s+3%次氯酸钠18 min消毒效果最好,污染率最低,为18.74%。6-BA(6-苄氨基嘌呤)对欧洲卫矛叶片愈伤组织诱导的效果好于TDZ(噻苯隆),愈伤组织质量更优。适宜作欧洲卫矛诱导培养基的为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,出愈率达60.7%。适宜作欧洲卫矛增殖培养基的为MS+2.0 mg·L~(-1)6-BA+0.3 mg·L~(-1)NAA+0.1 mg·L~(-1)2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸),增殖率达98.1%,增殖系数达1.953。适宜作欧洲卫矛分化培养基的为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,分化率达47.1%,分化的芽点多。     

东方百合Tiger Woods离体快繁技术体系的建立

为探讨东方百合新品种Tiger Woods的组培快繁技术,以其花器官为外植体获得无菌试管苗,以无菌苗鳞片和叶片为次级外植体诱导不定芽形成,通过扩繁、生根获得完整植株,炼苗后移栽。结果表明:花梗与花丝诱导能力较强,其最适诱导培养基分别为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)与MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1)。无菌苗鳞片、叶片直接诱导产生不定芽的最适培养基为MS+TDZ 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)与MS+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1),诱导率为100%和93.33%,诱导系数为4.48和2.88;而上述两种外植体间接诱导愈伤组织的最适培养基为MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+TDZ 0.5mg·L~(-1)与MS+PIC 1.0mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),愈伤诱导率为93.33%和96.67%,分化系数为4.53和3.63。小鳞茎膨大最适培养基为MS+蔗糖75g·L~(-1),生根最佳培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1),移栽最佳基质为草炭:蛭石:珍珠岩=1∶1∶1,成活率达91.11%。     

太子参子叶愈伤组织的诱导及分化

为提高太子参的扩繁效率,以太子参子叶为外植体,研究不同激素配比对愈伤组织形成的影响。结果表明:太子参子叶诱导的最佳培养基为MS+0.5mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA,诱导率为96.0%,可获得淡黄色、疏松的愈伤组织;丛生芽诱导培养基为MS+0.5mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA+0.5mg·L~(-1) TDZ+3.0μg·mL~(-1) AgNO3;生根培养基为MS+2.0mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA。     

彩叶凤梨愈伤组织诱导及不定芽分化的研究

以实验室现有彩叶凤梨为材料,探讨激素对其愈伤组织诱导及不定芽分化的影响。取彩叶凤梨无菌苗上生长的短缩茎(侧芽)接种于不同激素配比的MS培养基中诱导产生愈伤组织,然后将愈伤组织切块接种到不同的分化培养基上,诱导器官分化,统计出芽率,观察芽生长状态。试验结果为,诱导彩叶凤梨愈伤组织产生的适宜培养基为MS+2,4-D 4 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1),出愈率可达83.6%。愈伤块大、质地致密,有芽点;愈伤组织芽分化培养优先选择MS+6-BA 4 mg·L~(-1)+NAA 0.4 mg·L~(-1)培养基,分化率可达96.7%,出芽速度较快,出芽数较多,长势良好。试验表明,NAA能促进彩叶凤梨愈伤组织诱导及不定芽分化;高浓度2,4-D可以促进彩叶凤梨愈伤组织的生成,而高浓度的6-BA可以促进愈伤组织分化不定芽。     

中华补血草的组织培养和植株再生体系优化

为进行中华补血草优良品种的保存和培育,为从分子水平进行泌盐植物耐盐机理研究奠定基础,本研究以中华补血草无菌苗叶片为外植体,对中华补血草的组织培养和再生体系进行了优化。结果表明,以MS+6-BA 0.1 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)培养基为愈伤组织诱导最佳培养基,愈伤组织诱导率为100%;以MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)为丛生芽诱导最佳培养基,诱导率为99.06%;丛生芽继代培养适宜的培养基为MS+NAA 0.2 mg·L~(-1)+6-BA 0.15 mg·L~(-1);以MS+NAA 0.2 mg·L~(-1)培养基为最佳生根率培养基,生根率为87%,且根系生长良好。     

婆婆纳组织培养再生体系的建立

以婆婆纳(Veronica didymaTenore)的叶片、茎节、茎段、顶芽为外植体,接种在附加2,4-D、6-BA、NAA等不同质量浓度和组合的培养基中进行离体培养,并比较了不同培养基上不同外植体的诱导率。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体是叶片,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L,愈伤组织诱导率为100%。诱导愈伤组织分化的最适培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA0.75mg/L+NAA1.75 mg/L,分化率为90%。诱导生根的培养基为l/2MS+NAA0.2 mg/L,生根率为90%。     

朝鲜淫羊藿愈伤组织诱导及分化

以朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)幼叶叶尖(称叶尖)和嫩叶柄分枝点(称分枝点)为外植体,研究外植体灭菌时间;采用L_9(3~4)正交试验设计,探讨1/2MS、MS、WPM 3种培养基和质量浓度不同的2,4-D、6-BA、NAA对愈伤组织诱导的影响,目的是筛选叶尖和分枝点诱导愈伤组织最佳培养基;同时进行叶尖愈伤组织分化条件及不同质量浓度KT对不定芽增殖效果的研究。结果表明:叶尖和分枝点灭菌时间均为6 min,存活率分别为71.67%和73.33%,诱导叶尖愈伤组织最佳培养基为1/2MS+2,4-D2.0 mg·L~(-1)+6-BA0.4 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),诱导率为48.33%,分枝点最佳培养基为MS+2,4-D3.0 mg·L~(-1)+6-BA0.2 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1),诱导率为31.67%;叶尖愈伤组织在(4±0.5)℃低温处理180 d后能够分化,分化率为54.4%;KT质量浓度为1 mg·L~(-1)时增殖效果最好,增殖系数为2.35。     

杉木愈伤组织的继代增殖与植株再生

通过建立杉木愈伤组织增殖和植株再生体系,旨在为杉木体细胞杂交和遗传转化等基因工程研究提供高效受体系统。以杉木子叶、下胚轴诱导的愈伤组织为材料,研究了不同激素组合及浓度、培养条件对愈伤组织的继代及植株再生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对愈伤组织的继代有显著影响,2,4-D有利于降低继代过程中的褐化现象,NAA、KT有利于愈伤组织的继代增殖。DCR+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)和DCR+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+KT1.5 mg·L~(-1)+NAA 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织继代增殖的最佳培养基。暗培养和800 lx光照强度是愈伤组织继代的最佳培养条件。愈伤组织在继代30~45 d期间内需转移至新培养基。愈伤组织在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)再生芽诱导率最高,诱导率为80%。经过一次继代的愈伤组织比未经过继代的单个再生芽数多,平均可达3~4个。再生苗在1/2MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)培养基中生根率高达89.5%。     

水晶花烛的无菌播种和组培快繁技术研究

无菌播种水晶花烛Anthurium crystallinum种子获得无菌苗,取该无菌苗的带节茎段、叶片、叶柄为外植体,研究不同诱导培养基组成对水晶花烛愈伤组织诱导分化的影响,同时对影响水晶花烛芽体增殖和壮苗生根的主要因子进行研究。结果表明:水晶花烛种子较好的灭菌方法:种子经去果皮处理+0.1%升汞消毒8min;外植体愈伤诱导分化以带节茎段为宜,培养基为1/3MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+2,4-D 0.3mg·L~(-1);芽体增殖培养基:MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.3mg·L~(-1);壮苗生根培养基:MS+NAA 0.2mg·L~(-1),其移栽成活率可达95%以上。     

玉竹愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养体系的建立

以玉竹叶片和根状茎为外植体,研究植物生长调节剂、碳源和pH对玉竹愈伤组织诱导的影响以及植物生长调节剂对愈伤组织增殖的影响,通过正交试验初步建立并优化玉竹愈伤细胞的悬浮培养体系。结果表明,叶片和根状茎愈伤组织诱导的最佳培养基均为MS+1.0mg·L~(-1)?6-BA+0.5mg·L~(-1)?NAA+30%蔗糖,培养基最佳pH5.6,叶片和根状茎愈伤组织增殖的最佳植物生长调节剂组合均为2.0mg·L~(-1)?6-BA+0.8mg·L~(-1)NAA,且根状茎愈伤组织的诱导率和增殖倍数均明显高于叶片。根状茎愈伤细胞悬浮培养的最佳接种量80g·L-1,最佳植物生长调节剂组合1.5mg·L~(-1)6-BA+0.6mg·L~(-1)?NAA,细胞生长曲线与多糖含量变化曲线均呈"S"形,细胞最佳继代周期16d,多糖含量在培养14d时最高,培养基pH呈先下降后上升然后趋于稳定趋势。