大豆花药培养几个问题的研究

本文研究了大豆花药培养中的培养基、基因型、激素配比、糖分种类及浓度、取材时期、预处理温度、接种方式、有机添加物等因素对愈伤组织诱导频率的影响。认为大豆花药在培养基上的脱分化启动具有群体效应，合适的取材时期是单核中晚期。高浓度蔗糖能抑制体细胞愈伤组织的产生，而愈伤组织的分化则需要较低的蔗糖浓度。愈伤组织在Ｂ＿５＋０．５ｍｇ／１ＮＡＡ＋１．０ｍｇ／１ＫＴ＋１％蔗糖和改良ＭＳ＋０．１ｍｇ／１ＩＢＡ＋０．１ｍｇ／１ＧＡ＿３＋０．４ｍｇ／１ＮＡＡ＋０．５ｍｇ／１ＢＡ＋０．５ｍｇ／１ＫＴ＋０．５ｍｇ／１ＺＴ＋０．５ｍｇ／ｌ生物素＋２％蔗糖等培养基上分化出了芽，在改良ＭＳ＋０．５ｍｐ／１ＩＢＡ＋０．５ｍｇ／１ＢＡ＋０．５ｍｇ／１ＫＴ＋０．５ｍｇ／１ＺＴ＋５％蔗糖＋１％麦芽糖等培养基上产生了胚状体。     

诸葛菜花器组织培养及其植株再生

诸葛菜的花瓣、萼片、花丝在ＭＳ附加６—ＢＡ与２，４—Ｄ的培养基上培养７～１０ｄ，诱导形成愈伤组织。愈伤组织在ＭＳ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ３ｍｇ／Ｌ的分化培养基上培养７ｄ左右分化出芽，每块愈伤组织形成３～４个芽。花托、花序轴切段在分化培养基上可直接出芽形成植株。     

绿宝石喜林芋叶片培养及植株再生

结果表明：诱导绿宝石喜林芋叶片产生愈伤组织频率最高的培养基是ＭＳ＋ＢＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋２．４－Ｄ１．０ｍｇｇ／Ｌ。最适于愈伤组织分化的基本培养基是Ｎ６；３ｍｇ／Ｌ的ＢＡ、ＺＴ和ＫＪ均能诱导愈伤组织产生不定芽，其中以ＢＡ为好；ＣＨ对愈伤组织的分化有促进作用。Ｎ６＋ＢＡ７ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ对不定芽的增殖效果较好，３０ｄ可增殖９．４倍。１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ诱导生根效果好。试管苗     

魔芋高效再生体系的建立与优化

研究不同激素及浓度配比对魔芋愈伤组织、不定芽和根诱导的影响。结果表明,诱导愈伤组织的最佳激素组合为ＭＳ＋６－ＢＡ０.5 ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ,其诱导率为８２％;诱导不定芽分化的最佳配方为ＭＳ＋６－ＢＡ １．５ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ,其分化率为４９０％;诱导生根的最佳激素组合配方为ＭＳ＋ＮＡＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｌ,其生根率为９０％。     

甜菜原生质体培养再生植株的研究

以栽培甜菜的未授精胚珠或胚为外植体，在ＭＳ附加ＮＡＡ和ＢＡ的培养基上诱导愈伤组织，选择胚性愈伤组织进行继代培养，从该愈伤组织分离原生质体并以液体浅层法或半固体琼脂糖法培养在一系列培养基上，植板率为０．０１％～１．２％．再生愈伤组织形成后，转入固体培养基（ＭＳＢ）上培养，再转入分化培养基上分化出苗，分化率可达２．５％，由愈伤组织上切下分化苗在生根培养基上很容易诱导生根。     

花生体细胞胚胎诱导和植株再生研究

以花生成熟种胚为外植体,在ＭＳ附加不同激素（２０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ或５ｍｇ／Ｌ Ｐｉｃｌｏｒａｍ）的培养基上黑暗培养,胚性愈伤组织发生率和产胚量无明显差异,在ＭＳ＋５ｍｇ／Ｌ Ｐｉｃｌｏｒａｍ培养基上,胚性愈伤组织发生率和产胚量和品种类型有关,珍珠豆型花生品种胚性愈伤组织发生率和产胚量高于普通型花生品种。体胚在ＭＳ＋１０ｍｇ／Ｌ ＢＡ培养基上苗再生达３６．３％－７７．８％,再生小苗在ＭＳ＋０．３ｍ     

甘蔗人工种子的最佳制作流程及其提高萌发率的研究初报

以闽选７０３为材料，在Ｎ６（或ＭＳ）＋２，２－４Ｄ２．２ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ（水解酷蛋白）１．５ｇ／Ｌ培养基上诱导产生胚状体。利用１／２ＭＳＯ的５．５％海藻酸钠包裹体细胞胚，播种在４种不同的固体培养基上，其中播种在培养基１／２ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡｌｍｇ／Ｌ＋ＡＣ（活性炭）０．５％的人工种子萌发率为３１．７％，比前人报道的２７．６％（２）提高４．１％。本文最后还探讨了活性碳对生根的作用。     

红叶蔓绿绒的离体繁殖

以红叶蔓绿绒的带茎段为外植体，在ＭＳ＋ＢＡ６（ｍｇ／Ｌ，单位不同）＋ＮＡＡ０．０１培养基中诱导出侧芽。以在试管中诱导出的侧芽在ＭＳ＋ＢＡ５＋ＮＡＡ０．３培养基上诱导出不定芽和在相同的培养基上进行增殖，并在ＭＳ＋ＫＴ０．２５＋ＮＡＡ０．０１培养基上诱导生根。     

用酶联免疫吸附试验法检测印楝愈伤组织中的印楝素含量

用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）检测印楝（ＡｚｄｉｒａｃｈｔａｉｎｄｉｃａＡ．Ｊｕｕｓｓ）愈伤组织中的印楝素含量,成功建立了ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ,以牛血清蛋白为载体,用二环己基碳二亚胺合成免疫原,制备抗血清,获得效价为１：２５６０,以辣根过氧化物酶为标记酶,用“碘酸盐酸氧化法”合成酶标抗体,使用包被抗体的最适浓度为５．０μｇ／ｍＬ,标记抗体浓度为２．５μｇ／ｍＬ,可测抗原最低浓度     

马铃薯优化再生系统的建立

本试验研究了六种培养基系统对马铃薯东农３０３，Ｆａｖｏｒｉｔａ和极早三个品种来源的不同外植体的愈伤组织诱导和植株再生的影响，筛选出了适合植株再生的最佳外植体、最佳外植体大小及最佳培养基系统。适合植株再生的最佳外植体为叶片；最佳外植体大小为叶片０．５ｃｍ２、茎０．５ｃｍ、块茎０．２５ｃｍ２×０．３ｃｍ，适合于茎、块茎及叶的有效培养基系统分别为：①ＭＳ＋３ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ＋０．０１ｍｇ·Ｌ-１ＮＡＡ（ｐｈ５．６）４周ＭＳ＋０．３ｍｇ·Ｌ-１ＧＡ３（ｏＨ５．６）；②ＭＳ＋１．７５ｍｇ·Ｌ-１ＺＴ＋０．８７ｍｇ·Ｌ-１ＩＡＡ（ｐＨ５．８）；③ＭＳ＋２．２５ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ＋０．１８６ｍｇ·Ｌ-１ＮＡＡ（ｐＨ５．８）２周ＭＳ＋５ｍｇ·Ｌ-１ＧＡ３＋２．２５ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ（ｐｈ５．８）。     

印楝愈伤组织培养和植株再生

用印楝幼嫩枝条和叶片,在含有ＢＡ（０￣０．５ｍｇ／Ｌ）和ＮＡＡ（０￣２ｍｇ／Ｌ）的ＭＳ培养基中,于２５℃±２℃下暗培养１５￣２５ｄ,可诱导产生愈伤组织。愈伤组织生长出现２个生长峰,愈伤组织生长期和培养基中激素组成影响双峰产生时间,但不愈改变愈伤组织生长的双峰性质。在诱导不定芽培养基中,于２５℃±２℃下光培养１５￣３０ｄ,愈伤组织产生不定芽分化。愈伤组织不定芽分化与愈伤组织来源和不定芽诱导培养基的激     

甜菜基因型的筛选及胚性细胞系建立的研究

通过以甜菜未成熟胚为外植体诱导愈伤组织，再将产生的愈伤组织转移至分化培养基（ＭＳＢ培养基附加１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、３％蔗糖、８％琼脂）进行分化力测试实脸，筛选出两个再生能力强的基因型─８９３０、ＧＤ＿２．通过挑选淡黄色或灰白色、呈颗粒状的愈伤组织继代培养，经调节培养基的ＩＡＡ和ＮＡＡ的浓度，得到再生能力强的胚性愈伤组织，建立了胚性细胞无性系。     

小麦幼穗离体培养一步再生全苗影响因素的初步研究

以京花 １ 号、晋 ２１４８、西安 ８ 号、豫麦 ３５ 号、豫麦 １８ 号、豫麦 ２５ 号和 Ａｌｏｎｄｖａｓ ７ 个不同小麦品种的幼穗进行离体培养,培养基与培养环境共分 ４ 种组合：① Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;② Ｎ６＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;③ Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ ０．２ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ２ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;④ Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 ２４ ｈ／ｄ。另在 Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ 培养基中加入青霉素,使之成为含青霉素分别为 ５、１０、２０、４０、６０ 和 ８０ 万单位／ Ｌ 的系列培养基,以不含青霉素的培养基为对照,将豫麦 ２５ 号品种的幼穗分别培养于其中,照光 ２４ ｈ／ｄ。培养１０ 周后对各培养组合的材料进行观察统计。结果表明,组合处理①使 ７ 个小麦品种幼穗中的 ６ 个通过一步培养再生出全苗;在青霉素为 １０ 万单位／ Ｌ 的培养基中,豫麦 ２５ 号的幼穗也经一步培养再分化出全苗;而处理②、③、④均不能通过一步培养再分化出全苗。因此     

金线兰组织培养及快速繁殖的研究

金线兰是一种名贵珍稀中药材，本研究表明，用金线兰茎节或顶芽为培植体，经培养能大量快速繁殖这种濒危药用植物的种苗。诱导丛生芽分化和芽的增殖用ＭＸ＋６－ＢＡ８，ｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１在暗室培养６０天能产生１０－１５个芽，诱导芽的伸长用ＭＳ＋Ｙ－ＢＡ３＋ＮＡＡ＋２、４－Ｄ０．５在微光处培养诱导生根用１／２ＭＳ＋ＮＡＡ３＋６－ＢＡ０．４＋活性炭５０００在微光处培养，生根率为８０．８８％，瓶苗移栽在基质的沟泥白；     

植物生长激素诱导花生不定芽研究初报

利用培养７～９ 天的花生小叶片作为外植体,在ＭＳ培养基上用植物生长激素ＢＡ 和ＴＤＺ诱导花生不定芽。试验结果表明,１０ｍ ｇ／ｌＢＡ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ４、Ｎｏ５、Ｎｏ６ 外植体诱导出不定芽;５０ｍ ｇ／ｌＢＡ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ２ 和Ｎｏ５ 外植体诱导出不定芽;０１ｍ ｇ／ｌＴＤＺ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ１１ 外植体诱导出不定芽;１０ｍ ｇ／ｌＴＤＺ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ９ 和２０％ 的Ｎｏ１０ 外植体诱导出不定芽;５０ｍ ｇ／ｌＴＤＺ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ６ 和Ｎｏ１０ 外植体诱导出不定芽。     

大量元素对茶愈伤组织生长及儿茶素累积的影响

本文分别研究了培养基中氮源组成与浓度，以及Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、ＰＯ４３－和ＳＯ４２－对茶愈伤组织生长和儿茶素累积含量的影响。结果表明，全硝态氮对于愈伤组织儿茶素形成最为有利；而ＮＯ３－／ＮＨ４＋比为７：３时愈伤组织生长最快；总氮浓度为１５ｍｍｏｌ／Ｌ时愈伤组织生长量最高；提高氮浓度则导致儿茶素含量急剧下降。添加Ｋ＋促进愈伤组织生长并使儿茶素含量降低；而１ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｃａ２＋对儿茶素形成最为有利。在其余的离子中，ＰＯ４３－对愈伤组织生长影响较大，而ＳＯ４２－对儿茶素形成影响较大，Ｍｇ２＋浓度对两者均无显著影响。所得结果为采用两步法体系培养茶树细胞、系统研究儿茶素类物质的形成奠定了基础。     

海甘蓝茎尖培养再生植株的研究

海甘蓝种子在附加有０～１０ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基中，当６—ＢＡ为２～５ｍｇ／Ｌ时，幼苗生长健壮．采用ＭＳ＋２～４ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ培养基可从无菌苗茎尖诱导大量丛生芽，２～３周后，平均每个茎尖可诱导５．１～５．５个丛生芽，６—ＢＡ大于４ｍｇ／Ｌ，会导致丛芽黄化．继代培养时，４ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ配合使用效果较佳，繁殖系数高达１０．４．１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ丛芽的生根效果较好，保湿组培苗的成活率可达９５％，再生植株在自然条件下能正常开花结实．     

甜叶菊组织培养条件的研究：I.外植体,激素浓度,琼脂浓度对愈伤组织形成及？

以茎尖为外植体进行甜叶菊的组织培养，比以叶柄，叶片，茎段，下胚轴为外植体，愈伤组织诱导率，出芽率都高；在ＭＳ基本培养基上，适合茎尖生长，分化的激素浓度为０．５ｍｇ／Ｌ，ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ；琼脂浓度为０．７％。     

植物离体培养物中鱼藤酮的分离与HPLC测定

毛鱼藤（Ｄｅｒｒｉｓ ｅｌｌｉｐｔｉｃａ （Ｒｏｘｂ．）Ｂｅｎｔｈ．）和西非灰毛豆（Ｔｅｐｈｒｏｓｉａ ｖｏｇｅｌｉｉ Ｈｏｏｋ．ｆ．）离体培养物经９：１ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ溶剂提取,Ｃ－１８柱层析分离后,在室温条件下以６６：３４ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ或４２：５８ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ为流动相,支样品进行反相柱ＨＰＬＣ分析。结果表明,毛鱼藤和西百灰毛豆的愈伤组织均能合成鱼藤酮,但含量相当低,分别为１７．４μｇ／ｇ,１．８μｇ／ｇ干重。经诱导生根分化的毛鱼藤愈伤组织鱼藤酮含量达１３６．２μｇ／ｇ干重,为愈伤组织含量的７．８倍。西非灰毛豆悬浮培养物的鱼藤酮含量虽比愈伤组织有很大提高,但还不及毛鱼藤愈伤组织含量。结果表明,植物的基因类型在次生代谢上起重要作用,同时离体组织或细胞的分化有助于鱼藤酮的生物合成。     

花生小叶外植体植株再生及农杆菌介导的基因遗传转化

鄂花四号、中花四号和豫花一号萌动４ｄ的小叶作外植体，通过器官再生在ＭＳ培养基加３ｍｇ／ＬＢＡＰ和１ｍｇ／ＬＮＡＡ上诱导芽分化，转至ＭＳ加５ｍｇ／ＬＢＡＰ上诱导芽伸长，再生植株。芽诱导率为８６％～１００％，每个外植体平均再生５个植株。在培养基中加入１ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３和５００ｍｇ／Ｌ羧苄青霉素能有效抑制愈伤褐化和死亡，并能提高植株再生率。萌动４ｄ的小叶与农杆菌ＡＧＬ１分别共培养２ｄ，通过在再生培养基中加卡那霉素筛选，获得转基因再生植株，转基因植株生根后，移栽网室生长，并已开花结荚。外源基因的表达通过卡那霉素抗性和Ｇｕｓ活性组织化学检测得到证实。