灵芝孢子粉多糖含量检测方法的优化

探讨并优化了测定苯酚-硫酸法灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉多糖含量的检测条件,通过单因素和正交试验方法确定灵芝孢子粉多糖的最佳检测条件,并分析不同检测方法测定灵芝孢子粉多糖含量的差异。结果表明,灵芝孢子粉多糖苯酚-硫酸法的最佳测定条件为最大吸收波长489 nm,5%苯酚用量0.5 m L,浓硫酸用量2.5 m L,提取温度90℃,提取时间3.0 h,料液比(g·m L~(-1))为1:40,在此条件下平均回收率为99.54%,相对标准偏差(RSD)为0.90%。本试验优化后的检测方法具有良好的稳定性及重复性,回收率高,并能有效减少检测试剂苯酚和浓硫酸的使用量,具有实际应用意义。     

不同灵芝中粗多糖含量的比较研究

本实验利用苯酚－硫酸法对同一菌种液体发酵的菌丝体、不同生长阶段的子实体及其孢子粉中的粗多糖的含量进行了分析，发现灵芝菌丝体中粗多糖的含量明显高于灵芝子实体和孢子粉中的含量，菌丝体中粗多糖含量是灵芝老化期子实体中粗多糖含量的6倍，是灵芝孢子粉中粗多糖含量的2．8倍。而粗多糖在灵芝子实体的生长过程中呈逐渐下降的趋势。另外，不同品种的灵芝子实体中多糖含量存在一定的差异，其中南韩灵芝最高，达到1．58％，而紫灵芝中粗多糖的含量相对较低，为1．05％。     

桂西北野生灵芝和人工栽培灵芝多糖含量比较

用苯酚-硫酸法测定了桂西北地区几种人工栽培灵芝和野生灵芝的多糖含量。结果表明:人工栽培赤芝的多糖含量均比野生赤芝的多糖含量高;人工栽培赤芝的多糖含量也比部分野生黑芝的多糖含量高。分析了不同样品灵芝多糖含量差异的原因,并探讨保护野生药用植物资源,用人工栽培灵芝替代野生灵芝的可行性。     

金耳多糖含量测定方法

以苯酚-硫酸法测定多糖含量,比较分析金耳(Tremella aurantia)子实体样品的预处理效果和多糖提取方法。确定样品经预处理即85%乙醇中超声(室温,30 min)洗涤2次,在料液比1∶500(g/mL),提取温度100℃,提取时间2 h的优化提取条件下,测定多糖含量准确性高、重现性好、结果可靠,适用于金耳多糖含量的测定。     

西藏野生灵芝粗多糖提取工艺研究

采用正交试验,对影响灵芝多糖提取的4个主要因素（料水比、提取温度、提取时间、醇析浓度）进行了最佳工艺条件研究。结果表明,提取灵芝子实体粗多糖采用水提醇沉法,最优工艺条件为：料水比1∶50,提取温度90℃,提取2次,每次提取2h,90%乙醇醇析,3000r/min离心30 min取沉淀,sevage法除游离蛋白,离心取上层液即为灵芝粗多糖溶液。苯酚-硫酸法测定灵芝子实体粗多糖含量约为0.734%,这一含量在全国灵芝子实体多糖含量中处于中等水平,还有待于进一步的研究和开发利用。     

苯酚硫酸法和间接碘量法测定灵芝多糖含量比较

通过苯酚硫酸法和间接碘量法分别测定同一样品灵芝多糖的含量,两种方法测得总糖含量的结果基本一致,分别为2．04％和2．07％,其中间接碘量法测得样品中原有还原糖含量为0．80％,灵芝多糖含量为1．27％。两种方法均操作简便,稳定可行,较之苯酚硫酸法,间接碘量法更加科学合理。     

两种不同标准品测定猪苓粗多糖含量

试验以苯酚—硫酸法测定猪苓液体发酵菌丝体粗多糖含量，用葡萄糖与猪苓多糖注射液做标准品进行比较。结果表明：葡萄糖做标准品所测定的多糖含量稍大于猪苓注射液做标准品测定的多糖含量。     

固体发酵灵芝菌丝多糖的提取及组分分析

以苯酚硫酸法作为灵芝多糖的测定方法，研究了从固体发酵灵芝菌丝体中提取水溶性多糖的工艺，对浸提过程中的温度、时间、固液比及提取次数4个因素进行了单因素试验和正交试验，并利用Sephadex G-100凝胶色谱法和薄层层析法对主要组分GLPI进行了分子量测定和单糖分析。结果表明，灵芝多糖的最佳提取条件为浸提温度95℃，浸提时间40min，固液比1：20和提取次数为2次；GLP1分子量约为179900，初步判断为甘露聚糖。     

2种灵芝液体培养的比较研究

比较赤芝和松杉灵芝液体培养菌丝体生物量和多糖含量。在相同的培养条件下,对赤芝和松杉灵芝进行液体培养,采用热水浸提法提取干燥菌丝体多糖,通过蒽酮-硫酸法测定赤芝和松杉灵芝多糖含量。测得赤芝多糖含量为7.22%,松杉灵芝多糖含量为3.78%,液体培养赤芝生长速度比松杉灵芝快,多糖含量也比松杉灵芝高,因此,赤芝更适合用于液体培养生产灵芝多糖。     

葡萄多糖的提取工艺及含量测定研究

以市售新鲜葡萄为材料,采用不同的提取温度、料液比和提取时间进行单因素试验,并在此基础上采用三因素三水平的正交试验对提取条件进行优化.结果表明:提取温度对葡萄多糖提取率的影响最大,其次是料液比,而提取时间影响不大.葡萄多糖提取的最优工艺参数是:提取温度为90℃、料液比为 1:2、提取时间为2.0 h.经苯酚-硫酸法测定,葡萄多糖含量为7.53%(以半乳糖计),加样测定平均回收率为99.9%.     

姬松茸多糖粉中总糖含量的测定

本文以葡萄糖作为标准品，通过苯酚-硫酸法测定姬松茸粗多糖样品中的总糖含量。考察了苯酚与浓硫酸的用量和反应温度等因素对显色反应的影响以及显色反应的稳定性，得到了糖浓度与紫外吸光度关系的标准曲线，并通过对标准品和样品的测定对测定方法的精密度及准确度进行了检验。结果表明苯酚-硫酸法对该样品测定的最佳反应条件为：5％苯酚溶液1．6mL，浓硫酸6．5mL。水浴温度25℃；在0．0120～0．0160g/L，糖浓度与紫外吸光度(吸收光波长488．5nm)呈线性关系(r=0．9994)；对标准品测量值的相对平均误差≤1．17％。对样品测量值的标准偏差s=0．67(n=4)，平均加样回收率为101．9％。标准偏差s=2．80(n=4)。     

苯酚硫酸法和高锰酸钾滴定法测定香菇多糖含量的比较

为确定一种比较准确、方便的香菇多糖测定方法,比较了苯酚硫酸法和高锰酸钾滴定法测定香菇多糖含量的差异:两种方法均稳定可行,重现性较好。但苯酚硫酸法测定香菇多糖含量高于高锰酸钾滴定法,苯酚硫酸法不仅灵敏度高,而且回收率也高于高锰酸钾滴定法;高锰酸钾滴定法操作也较繁琐。相对而言,苯酚硫酸法是测定香菇多糖较为理想的方法。     

不同灵芝孢子粉产品的多糖成分比较

五种市售的灵芝(Ganoderma lingzhi)孢子粉产品被用于评价其多糖含量和成分,采用苯酚-硫酸法测定五种灵芝孢子粉产品的多糖含量、高效液相色谱分析其多糖指纹图谱、离子色谱分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成。根据结果,不同来源的灵芝孢子粉总糖含量在2.05%~8.82%之间、多糖含量在1.05%~1.87%之间,而且多糖的种类及其水解后单糖组成也有明显的差异,结果表明市售灵芝孢子粉产品的多糖有显著不同。     

灵武长枣多糖含量测定的研究

灵武长枣样品经脱脂,脱小分子糖后,用蒸馏水沸水浴浸提、醇沉、洗涤得灵武长枣多糖,含量测定采用苯酚-硫酸比色法,用精制多糖测得其多糖对葡萄糖的换算因子。建立了一种简便、准确测定灵武长枣多糖含量的方法。结果表明:该方法测定简便可行,重现性较好,平均回收率为97.11%,所测全红灵武长枣样品中多糖含量为13.30%。     

灰树花多糖提取工艺优化及多糖冲剂的研制

采用正交试验法优化了微波辅助提取灰树花多糖的条件，研究了多糖冲剂制备工艺，并用苯酚-硫酸法对灰树花多糖冲剂中多糖含量进行了测定。结果表明，以水为溶剂，灰树花多糖最佳提取条件为：提取时间10min，微波功率为80％（全功率为800W），液料比为25：1。灰树花多糖冲剂配方为：灰树花粗多糖：可溶性淀粉：甜蜜素为1：4：0．04，冲剂中多糖含量为6．988％．     

超声波-超低温冻融处理对灵芝孢子粉多糖提取的影响

利用苯酚-硫酸法对破壁处理后的灵芝孢子粉多糖含量进行测定,结果表明采用超低温冻融处理和超声波处理进行灵芝孢子粉破壁均具有效果好、成本低及操作简便等特点;增加冻结-解冻循环次数在一定程度上能提高多糖含量,循环次数以5次～7次为宜;将超声波处理法和超低温冻融法很好地结合起来,其多糖释放更高,效果更佳,此方法更具实用价值。     

不同生长期赤灵芝子实体多糖含量变化研究

目的：研究不同生长期灵芝子实体多糖含量的变化规律。方法：采用超声波协同回流提取子实体，蒽酮-硫酸法测定灵芝多糖的含量。结果：现蕾后开伞前子实体中多糖含量最低，为11．2mg/g，30d子实体多糖含量为13．0mg包孢子粉弹射期间，子实体多糖含量随着子实体生长而增加，从18．2mg/g上升到24．7mg／g，此时，子实体停止生长，不再弹射孢子粉。     

酶解低温提取灵芝水提取物过程研究

通过试验选出了以木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶为组合的复合酶的最佳灵芝水提取物(粗多糖)初步提取条件,以硫酸苯酚法检测其多糖产出率,结果表明:最佳酶解条件为pH4.5,反应温度45℃,料液比1∶30,复合酶用量0.8%(对底物),反应时间3 h,酶解次数2次。复合酶最佳酶配比为木瓜蛋白酶∶纤维素酶∶果胶酶=1∶2∶2。酶解低温提取所获得的灵芝水提物中的灵芝多糖含量较传统的水提醇沉法中的热水浸提提升了20%以上,为今后酶解低温提取在工业上的应用提供了重要依据。     

冬虫夏草虫草多糖的分离纯化及含量的测定

从冬虫夏草发酵液及菌丝体中提取、分离虫草多糖,并建立样品中多糖的含量测定方法。采用乙醇沉淀法分离冬虫夏草发酵液和菌丝体中的多糖;采用苯酚—硫酸法测定样品中多糖含量。用葡萄糖作为标准制作标准曲线,得到的回归方程为:y=0.0043x﹢0.0299,相关系数R2=0.9926。发酵液中虫草多糖的得率为58.38%;菌丝体中虫草多糖的含量为4.71%。发酵液多糖的重现性试验的标准差为0.0055,变异系数为0.74%,平均加标回收率为99.9%;菌丝体多糖的重现性试验的标准差为0.0059,变异系数为1.24%,平均加标回收率为98.57%,变异系数为1.24%。此法无需多糖纯品具有简单快速、灵敏度高、精确度和准确性高、重现性好等优点,可作为检测北冬虫夏草多糖含量的优选方法。     

灵芝多糖热水提取条件的优化试验

为确定灵芝多糖的热水浸提条件,以苯酚-硫酸法作为灵芝多糖的测定方法,对浸提过程中的温度、时间及料水比3个因素进行正交试验,并研究浸提次数对多糖得率的影响。结果表明,浸提温度对多糖得率的影响较大。灵芝多糖热水浸提的优化条件为:温度78℃,料水比1∶30,提取时间3 h,在此条件下单次浸提即可获得绝大部分的子实体多糖。