酶联免疫法测定合肥市售鱼虾链霉素残留量的探讨

[目的]测定合肥市售鲫鱼和河虾的链霉素残留量,并与国家标准对比,评价其残留情况。[方法]于2018年10—12月在合肥市蜀山区、庐阳区、瑶海区、包河区共16个水产品市场、农贸市场和大型超市随机购买不同品种的鱼虾,采用酶联免疫吸附方法检测其中链霉素的残留量。[结果]合肥市售鱼虾中链霉素的检出率为100%,残留范围为1.50~11.88μg/kg,平均含量为4.40μg/kg。[结论]根据国家标准《动物源性食品中链霉素残留量测定方法酶联免疫法》(GB/T21330-2007)的规定,水产品中链霉素的检测下限为50.0μg/kg,此次试验检测鱼虾中链霉素的残留量均符合国家标准。     

化学发光免疫分析与酶联免疫分析法检测水产品药物残留的比较研究

对检测水产品中呋喃唑酮代谢物(AOZ)和氯霉素(CAP)药物残留的两种方法——化学发光免疫分析(CLEIA)和酶联免疫分析(ELISA)法进行了比较研究。结果表明:两种药物残留检测中,CLEIA分析方法的线性范围和检出限均优于ELISA法,且两种免疫分析法的添加回收率均具有很好的相关性;用CLEIA法检测AOZ的检出限为0.01μg/kg,线性范围为0.01².56μg/kg,检测CAP的检出限为0.016μg/kg,线性范围为0.0252.56μg/kg,检测CAP的检出限为0.016μg/kg,线性范围为0.025⁶.400μg/kg;用ELISA法检测AOZ的检出限为0.1μg/kg,线性范围为0.106.400μg/kg;用ELISA法检测AOZ的检出限为0.1μg/kg,线性范围为0.10¹.62μg/kg,检测CAP的检出限为0.05μg/kg,线性范围为0.051.62μg/kg,检测CAP的检出限为0.05μg/kg,线性范围为0.05⁴.05μg/kg;用CLEIA法检测CAP的批内变异系数(RSD)为5.5%4.05μg/kg;用CLEIA法检测CAP的批内变异系数(RSD)为5.5%¹1.3%,批间RSD为12.3%11.3%,批间RSD为12.3%²0.9%,检测AOZ的批内RSD为6.6%20.9%,检测AOZ的批内RSD为6.6%¹1.1%,批间RSD为15.6%11.1%,批间RSD为15.6%¹8.3%。研究表明,用CLEIA法检测水产品药物残留较ELISA法检出限低、线性范围宽,虽然检出CAP和AOZ的变异系数均高于ELISA法,但仍符合《兽药残留酶联免疫试剂(盒)备案参考评判标准》的规定。     

化学发光免疫分析与酶联免疫分析法检测水产品药物残留的比较研究

对检测水产品中呋喃唑酮代谢物( AOZ)和氯霉素( CAP)药物残留的两种方法---化学发光免疫分析( CLEIA)和酶联免疫分析( ELISA)法进行了比较研究。结果表明：两种药物残留检测中, CLEIA分析方法的线性范围和检出限均优于ELISA法,且两种免疫分析法的添加回收率均具有很好的相关性;用CLEIA法检测AOZ的检出限为0.01μg/kg,线性范围为0.01~2.56μg/kg,检测CAP的检出限为0.016μg/kg,线性范围为0.025~6.400μg/kg;用ELISA法检测AOZ的检出限为0.1μg/kg,线性范围为0.10~1.62μg/kg,检测CAP的检出限为0.05μg/kg,线性范围为0.05~4.05μg/kg;用CLEIA法检测CAP的批内变异系数( RSD)为5.5%~11.3%,批间RSD为12.3%~20.9%,检测AOZ的批内RSD为6.6%~11.1%,批间RSD为15.6%~18.3%。研究表明,用CLEIA法检测水产品药物残留较ELISA法检出限低、线性范围宽,虽然检出CAP和AOZ的变异系数均高于ELISA法,但仍符合《兽药残留酶联免疫试剂(盒)备案参考评判标准》的规定。     

酶联免疫分析技术在杀菌剂残留检测中的应用

酶联免疫分析技术具有灵敏度高,方便快速的特点,适用于现场筛选和大量样品的检测。主要介绍了各类杀菌剂半抗原的合成方法以及在酶联免疫分析技术中的研究进展,并对该技术存在的问题及其前景进行了讨论。     

链霉素酶联免疫检测试剂盒方法学评价的设计及应用

由于检测试剂盒方便、快捷,使用范围越来越广泛,其质量直接关系到结果的准确,需要有合适的评价方法确保试剂盒的性能指标符合使用需求.该文针对链霉素酶联免疫检测试剂盒方法学评价,设计完整的评价方案并应用于实际,结果表明:该方案对于判别试剂盒的质量具有较高的实际应用价值.     

时间分辨荧光免疫分析法与放射免疫分析法检测甲胎蛋白的效能比较

目的比较时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）与放射免疫分析（RIA）两种方法检测甲胎蛋白（AFP）的效能。方法对TRFIA与RIA两种方法测定AFP进行线性检测、精密度实验、临床对比实验及相关性分析。结果TRFIA法检测AFP的线性范围为1-1210μg/L,比RIA的1-900μg/L宽;检测精密度：TRFIA分析内CV%为3.8%-4.3%,分析间CV%为4.9%-5.8%;RIA分析内CV%为5.8%-8.6%,分析间CV%为6.4%-9.5%;两种方法呈显著正相关（r=0.986,P＜0.01）。结论TRFIA法优于RIA法。     

酶联免疫分析法及其在食品农药残留检测中的应用

介绍酶联免疫分析法(ELISA)的原理,酶联免疫分析法在食品农药残留检测中应用的技术要点和存在问题,并对酶联免疫分析法在食品农药残留检测中的应用前景作了展望。     

应用酶联免疫法快速检测水产品孔雀石绿残留

[目的]探讨酶联免疫检测法在快速检测水产品孔雀石绿残留中的应用。[方法]应用一种酶联免疫试剂盒对市场抽取的43份水产品中残留的孔雀石绿和隐性孔雀石绿进行快速检测。[结果]水产品中孔雀石绿和隐形孔雀石绿检出率为6.98%。[结论]该快速检测法可用于大批量水产品的孔雀石绿和隐性孔雀石绿快速筛查。     

免疫分析法在除草剂残留分析中的应用

文章介绍了农药残留免疫分析技术的原理、关键技术环节,综述了国内外除草剂残留免疫测定的研究动态。     

抗链霉素单克隆抗体的制备及其初步应用

【目的】筛选抗链霉素特异性单克隆抗体,并初步建立其竞争ELISA快速检测方法。【方法】用EDC方法将链霉素(SM)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备完全抗原SM-BSA及SM-OVA,SM-OVA免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后,SM-BSA包被酶标板,ELISA筛选阳性克隆,并经有限稀释单克隆化及亚型鉴定,所获阳性克隆注射BALB/c小鼠,制备单抗腹水,并进一步western-blot鉴定其特异性,并对其竞争ELISA检测方法进行优化。【结果】经有限稀释,获单克隆抗体7株,其中链霉素特异性单克隆抗体1株,对其竞争ELISA反应条件进行了优化。【结论】获抗链霉素单克隆抗体1株,并初步建立了其竞争ELLISA方法。     

鸡组织中链霉素残留检测方法的研究

采用柱前衍生化、紫外检测器高效液相色谱法(HPLC)检测鸡组织中链霉素的残留量,优化了样品的前处理方法和高效液相色谱条件(包括流动相的组成和流速),同时优化了前处理过程中洗脱液和提取液的用量。结果表明：流动相为V(乙腈)：V(醋酸盐缓冲液pH=3．3)：V(水)=10：10：80,流速0．3mL/min,柱温35℃,检测波长252nm,进样量20μL为最佳检测条件。采用沉淀剂(5％5mL三氯醋酸)沉淀蛋白质,洗脱剂(10mL甲醇)洗脱,在3种不同鸡组织中添加200,100,50μg／mL3种标准溶液,测定其回收率分别为75％～90％,70％～86％,64％～75％,变异系数均≤10％。同一试样设10个平行样,其变异系数为5．72％．说明该方法的重现性较好。     

ELISA方法测定鸡肝肾组织中氯霉素残留的探讨

用六种浓度的氯霉素标准品(0.025ng/mL,0.05ng/mL,0.1ng/mL,0.2ng/mL,0.5ng/mL,2ng/mL)做工作标准曲线,设计鸡肝脏、肾脏两个待测样品,同时分别加六种标准品于肝脏和肾脏中测定样品中氯霉素的回收率。试验结果表明:ELESA方法测定鸡组织中氯霉素的检出限为0.02ng/mL,样品中不同浓度的氯霉素标准品回收率均达84.8%以上。说明该方法灵敏、准确。     

鸡肉中磺胺嘧啶残留量的测定

基于在酸性介质下磺胺嘧啶与碱性Luminol能产生化学发光,建立了化学发光微流动注射芯片测定鸡肉中磺胺嘧啶的方法。该芯片上微通道由激光雕刻机在聚甲基丙烯酸甲酯上雕刻而成,采用精确时间控制进样的方式检测,测定磺胺嘧啶线性范围为(4.0~50.0)×10-8g/ml,检出限1×10-8g/ml,对2.0×10-7g/ml磺胺嘧啶连续11次测定的相对标准偏差RSD为1.4%。     

烟草野火病病原菌对农用链霉素的抗药性测定

为合理防治烟草野火病,减少抗药性产生,减少农药残留,从云南省8个地州分离烟草野火病菌菌株43个,并就分离菌株对农用链霉素的抗药性进行了测定,结果表明,供试43个菌株中高抗菌株8个,中抗菌株比例较高17个,低抗菌株18个。不同来源的烟草野火病原菌株的抗药性存在差异,文山、昆明的菌株抗药性最高,红河菌株抗药性最低,抗性倍数最高达2000多倍,其余地州抗药性居中。不同地州分离菌株高、中、低抗菌株的比例存在明显差别。分离自文山邱北县双龙营镇的25#菌株抗药性最强,抗性倍数达45907.75,来自文山砚山县阿猛镇租白村的34#菌株抗药性最低。43株烟草野火病菌菌株对农用链霉素的EC50值平均为4.65,范围在0.004～183.631。高、中、低抗菌株的平均抗性倍数分别为6124.69、49.72、6.40。     

两种方法检测奶牛结核的比较

采用变态反应ＥＬＩＳＡ同时奶牛结核病进行检测，并以剖检和细菌进行验证。结果表明，变态反庆和ＥＬＩＳＡ奶牛结核的检出率分别为１．３％和０．３７％，变态反应阳性并不能包括ＥＬＩＳＡ阳性。变态反应与剖检及细菌学检查的符合率分别为１８．８％和７．２％，而ＥＬＩＳＡ与剖检及细菌学检查的符合率分别为６６．６％和５５．５％，ＥＬＩＳＡ检测具有较好的特异性。     

食品中链霉素检测方法研究进展

介绍了目前链霉素的主要检测方法(包括微生物法、免疫法和仪器分析法等),并对各种方法的优缺点和应用范围进行了分析。     

液相色谱-库仑陈列电化学法检测鸡肝中氯羟吡啶残留

利用液相色谱-库仑阵列电化学检测器(HPLC-ECD)对鸡肝中残留的氯羟吡啶的检测进行了研究。将样品经液液萃取,使用液相色谱-库仑阵列电化学检测器检测,结果表明,鸡肝中氯羟吡啶在15～1 000 ng/g范围内线性良好,回收率为85.22%,检测限达10ng/g,达到国家检测标准,适用于氯羟吡啶的检测。     

肉鸡组织中马杜霉素残留检测的研究

用混合酸酐法和活化酯法合成5种马杜霉素结合抗原。用其中2种免疫家兔制备出对马杜霉素具有极高亲和性和特异性的抗体;用其余3种作包被原,发现马杜霉素分子羧基上连接一个6个碳分子后再与卵清蛋白结合成的包被抗原（M-C#-6-OVA）,能大大提高ELISA检测灵敏度。首次制备针对马杜霉素的特异性高容量免疫亲和色谱柱（Ⅰ柱动态柱容量为3750ng/ml胶,Ⅱ柱为7160ng/ml胶）。组织样品用甲醇提取,经免疫亲和色谱（IAC）柱分离纯化,ELISA检测,即建立IAC-ELISA方法。检测时,只需制备PBST-10%甲醇为介质的标准曲线即可,组织样品添加回收率测定结果证明了这一点。以不同剂量马杜霉素添加于饲料饲喂肉鸡,测得马杜霉素主要残留于脂肪,其次是肝脏,最少是肌肉。以5.0mg·kg#+(-1)剂量马杜霉素混拌料饲喂肉鸡,停药2～3d,鸡组织中马杜霉素的残留量就低于最高残留限量的规定。     

RP-HPLC法测定鸡肉组织中的嘧菌酯残留量

利用反相高效液相色谱法测定鸡肉组织中嘧菌酯杀菌剂残留量,色谱条件是Shim-pack VP-ODS 色谱柱,乙腈/水(75/25,V/V)溶液为流动相,流速0.6 mL/min,检测波长225 nm.在该色谱条件下,嘧菌酯能较好地分离,在0.03～12.40 μg/mL(r=0.9994)的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,检测限为0.01μg/mL.结果表明,该法简便快速,可应用于实际鸡肉组织中嘧菌酯的测定.