短葶山麦冬茎尖愈伤组织的诱导与植株再生

以短葶山麦冬茎尖为外植体,进行了优化愈伤组织诱导与植物再生的最适激素配比试验。结果表明：诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA,愈伤组织紧密块状,生长状况良好,诱导率达94.55%;愈伤组织继代培养最佳培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+1.50 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA,愈伤组织净增鲜重为1.08g,增殖系数达到5.1;愈伤组织分化不定芽最佳培养基在MS+4 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,不定芽增殖系数达到5.54,最有利于不定芽形成。     

丹红杨愈伤组织诱导与器官再生的影响因子分析

采用正交设计,首次建立了丹红杨离体培养技术体系.结果表明:丹红杨叶片最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.20 mg/L+6-BA1.00 mg/L,诱导率为57.50%;叶柄、无芽茎段最佳胚性愈伤组织培养基诱导为MS+6-BA0.30～0.80 mg/L+ZT0.30～0.80 mg/L+NAA0.02～0.05 mg/L,诱导率为82.26%;根最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA1.00 mg/L+KT0.50～1.00 mg/L+NAA0.50～1.00 mg/L.胚性愈伤组织增殖最佳培养基为MS+BR0.10 mg/L+NAA 0.10 mg/L.胚性愈伤组织分化不定芽最佳培养基为WPM+6-BA0.20 mg/L+TDZ0.001～0.003 mg/L+KT0.50 mg/L+NAA0.05～0.10 mg/L.     

‘凤丹’子叶愈伤组织诱导及分化研究

研究了层积时间对‘凤丹’胚萌发的影响,并探讨了基本培养基、植物激素等因素对子叶愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明:40d层积时间对胚萌发的效果最好,MS+Ca2++2mg/L2,4-D+30g/L蔗糖是胚诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率85%;MS+Ca2++1.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+20g/L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基;不定芽高约1.5cm转入生根培养基,生根率可达80.7%。     

朱顶红愈伤组织诱导及增殖发育体系的建立及优化

以朱顶红带有小鳞茎的试管苗作为外植体,进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究,结果表明:诱导愈伤组织形成的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT2.0mg/L。愈伤组织增殖需要的最佳2,4-D 2.0mg/L浓度为1.0mg/L,促进不定芽分化及植株再生的6-BA浓度为0.5mg/L。     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的适宜培养条件

为了探索以红松成熟合子胚为外植体诱导愈伤组织的适宜培养条件,以GD、DCR、LM、MS等为基本培养基,以2,4-D和6-BA组成不同浓度激素组合,进行愈伤组织诱导试验。结果表明,1供试培养基均可诱导红松成熟合子胚产生愈伤组织,但DCR培养基上诱导的愈伤组织出现最早,出愈率显著高于其他培养基,达93.3%;2在DCR培养基中添加2,4-D与6-BA的各种组合均获得了较好的愈伤组织发生,但以2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和2,4-D6 mg/L+6-BA 1 mg/L的出愈率最高,达96.7%。综上所述,红松成熟合子胚外植体诱导愈伤组织时,适宜基本培养基为DCR,适宜激素组合为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

香蕉薄切片愈伤组织再生体系的建立研究

以巴西香蕉品种的薄切片为外植体高频地诱导出愈伤组织,并诱导出了不定芽,获得了再生植株。在实验过程中,利用正交实验中筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 4.0 mg.L-1+KT 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1+活性炭200 mg.L-1,诱导率可达100%,愈伤组织增殖的最佳培养基是MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1+活性炭100 mg.L-1,继代3-4次的愈伤组织在6-BA浓度为5.0 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽,继代10次之后愈伤组织在继代培养基上开始出现褐化现象,愈伤组织增殖明显受到抑制,褐化的愈伤组织逐渐死亡。     

二穗短柄草植株再生体系的建立

以成熟种子为外植体建立二穗短柄草植株再生体系,结果表明:二穗短柄草成熟种子经1%次氯酸钠消毒液处理20min,接种于MS+4%蔗糖(pH 5.5)培养基中培养5d,萌发率为90%,褐化率为10%,污染率为0;萌发种子转入到愈伤组织诱导培养基MS+1mg/L 6-BA+1mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)上继代培养,光照条件下愈伤组织诱导率为86%,黑暗条件下愈伤组织诱导率为64%;二穗短柄草愈伤组织在MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)进行不定芽诱导,不定芽发生率为90%;无根丛生芽继代转入到不定根诱导培养基1/2MS+0.5mg/L IBA+0.25mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)中,5d以后可以见到不定根的形成,15d后不定根发生率为91%;在研究中还发现,二穗短柄草种子萌发后可直接继代转入不定芽分化培养基形成健壮不定芽,不定芽诱导率为94%。     

油茶胚组织离体培养实验

采用油茶上胚轴、下胚轴和子叶作外植体进行油茶组织离体培养诱导愈伤组织发生和不定芽分化的实验.实验结果表明,0.2％的HgCl2消毒处理油茶种胚外植体10 min效果较好;油茶上胚轴、下胚轴和子叶组织在MS+2,4-D2mg/L+KT0.5 mg/L的培养基上,愈伤组织诱导率分别为95.0％、66.7％和30.0％;在MS+6- BA2.5 mg/L+ KT0.1 mg/L+ NAA0.5 mg/L培养基上,不定芽诱导率分别是66.7％、33.3％和11.1％;以MS+6- BA 2 mg/L+ NAA 0.2 mg/L继代培养,上胚轴、下胚轴和子叶所形成愈伤组织芽增殖系数40天时为5.8、5.6和5.3.     

银白杨不定芽诱导与增殖分化研究

为建立优良银白杨离体快繁再生体系,培育速生高产的银白杨苗木,以西藏银白杨叶片、茎段作为不定芽诱导的初始材料,以MS为基本培养基,对不定芽诱导中产生的愈伤组织进行二次不定芽诱导,研究不同激素浓度及配比对银白杨不同材料不定芽诱导与增殖分化的影响。研究表明:6-BA∶NAA为5∶1是银白杨不定芽诱导的最优激素浓度配比,银白杨不定芽诱导的最佳培养材料为当年生带腋芽茎段;6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+KT(0.2mg/L)为愈伤组织诱导不定芽最优激素浓度组合;不定芽增殖的最优激素7浓度组合为6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.2mg/L)+KT(0.2mg/L)+IBA(0.2mg/L),平均增殖系数最高。综合考虑得出:MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)为银白杨不定芽诱导分化的最佳培养基,不定芽诱导的最佳材料为银白杨当年生带腋芽茎段;愈伤组织不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+KT(0.2mg/L);不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA(1.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+KT(0.2mg/L)+IBA(0.2mg/L),pH5.8。     

植物生长调节剂对黑果枸杞愈伤组织诱导、增殖及分化的影响

为建立黑果枸杞高频再生体系及进行细胞突变体筛选、遗传转化奠定基础,以黑果枸杞叶片、茎段和腋芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的继代培养过程中,高浓度的2,4-D有利于愈伤组织的诱导,但对愈伤组织的生长有一定的抑制作用,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的再分化过程中,6-BA对再生芽的分化效果最好,出芽率高,且多诱导出丛芽,最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.10mg/L。试验表明:黑果枸杞叶片、茎段和腋芽均可诱导愈伤组织,茎段诱导率最高;筛选出了茎段愈伤组织诱导、增殖及再生芽分化的适宜培养基,为其细胞工程育种及规模化生产提供支撑。     

短柄五加愈伤组织诱导及再生体系的建立

以短柄五加(Acanthopanax brachypus Harms)当年生嫩枝为材料,选择叶片、叶柄为外植体,使用6-BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行短柄五加愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽增殖培养基的最佳配方,建立短柄五加植株的再生体系。结果表明,短柄五加叶片是较适宜诱导愈伤组织的外植体,愈伤组织诱导的培养基是MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率为75.0%;愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,不定芽诱导率为100%;适宜不定芽增殖的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数为5.80;同时活性炭能够有效防止愈伤组织诱导过程中的褐化问题。     

黑荆树愈伤组织诱导、增殖与分化

以黑荆树叶片为外植体,MS培养基为基本培养基,研究了外源激素对愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。结果表明:外源激素6-BA与IBA组合、6-BA与2,4-D组合、TDZ与IBA组合均可诱导愈伤组织,但诱导率差异达极显著水平;不同外源激素组合上诱导的愈伤组织,其增长率为165.21%~208.53%,其中以6-BA与IBA组合的增长率最大;在添加TDZ与IBA的培养基上易分化出不定芽,但不同培养基上诱导的愈伤组织对不定芽的分化率和芽的生长影响达极显著差异。综合考虑,筛选适宜愈伤组织诱导、增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5mg/L IBA,诱导率为43.36%,平均增量和增长率分别为1.04 g和208.53%;最适宜继代时间为18~21 d;最适宜愈伤组织分化培养基为MS+0.05 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,分化率为51.85%,每块愈伤组织上分化5~8个芽点。     

植物生长调节物质对成熟红松合子胚愈伤组织诱导的影响

诱导成熟红松合子胚愈伤组织的关键,是选择正确的诱导培养基以及适宜浓度及配比的生长调节物质。结合松柏类针叶树种体胚发生文献,从7种基本培养基中筛选出LM培养基为最佳诱导培养基;在植物生长调节物质的筛选中,2,4-D优于NAA;LM+2mg/L 2.4-D+(0~0.5)mg/L 6-BA可以诱导出更多的Ⅱ型有效愈伤组织;LM+2mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA的诱导培养基中加入0.5mg/L KT或0.5mg/L TDZ,可显著提高有效愈伤组织的诱导率(75.7%)。     

不同激素浓度配比对贯叶连翘茎段离体培养不定芽形成和生长的影响

为规模化工厂化快速繁殖贯叶连翘(Hypericum perforatum),满足国际市场日益增长的需求,保护贯叶连翘野生种质资源,用野生贯叶连翘嫩梢带节茎段诱导形成愈伤组织,将愈伤组织作为外植体,继代增殖;以MS(MuraShige and Skoog)为基本培养基,采用随机区组试验设计,3次重复。研究6-BA 3.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L、6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L、6-BA 1.0mg/L+IBA 0.2mg/L对贯叶连翘嫩茎切段愈伤组织诱导形成不定芽数量和高生长的影响,结果显示:3种处理诱导形成不定芽数量、不定芽高生长处理间差异均达显著水平,其中:6-BA 3.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L诱导愈伤组织形成不定芽数量最多,平均为6.971 7±3.463 8个,最高可达24个;6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L对促进不定芽高生长最有利,平均芽长3.333 3±0.738 2cm。     

香荚蒾组织培养快速繁殖的研究

为满足栽培对种苗的需要,以香荚蒾的嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导、分化、不定芽生根,试管苗的生根继代、移栽和定植的研究。研究结果证明：MS＋6-BA 0.5mg/L＋2,4-D 2.0mg/L是茎段愈伤组织诱导培养的理想培养基;1/2MS＋6-BA 0.4mg/L＋NAA 0.1mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;...     

芽变毛白杨组织培养初步研究

以芽变毛白杨幼嫩枝条为外植体进行愈伤组织和茎段组织培养试验研究。结果表明:芽变毛白杨诱导愈伤组织培养基为:MS 6-BA 2.0~4.0 mg/L 2,4-D 1.5~2.0 mg/L NAA 0.25 mg/L KT 2.0~4.0 mg/L 3%蔗糖,愈伤组织分化芽培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L KT 2.0 mg/L 3%蔗糖时,培养效果好。茎段培养时,适宜无根苗生长的培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L 3%蔗糖,生根诱导适宜的培养基为1/2MS IBA 0.5~1.0 mg/L 1.5%蔗糖。     

青钱柳组织培养研究

以青钱柳幼嫩叶片为外植体进行组织培养,观察青钱柳愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,研究不同培养基和不同生长调节物质组合对青钱柳愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,激素及其浓度对愈伤组织诱导有显著影响。愈伤组织在WPM+2.0 mg/L2,4-D+1.0 mg/L 6-BA培养基组合上诱导率最高,达97.6%;(2)青钱柳愈伤组织能分化形成不定芽,激素不同浓度组合及外源物对愈伤组织分化有显著影响。青钱柳叶片愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/LZT+0.5 mg/L2,4-D+10%椰乳的培养基上分化不定芽的频率最高,达66.33%;(3)青钱柳诱导生根的最佳培养基组合为1/2 MS+1.5 mg/L IBA。     

蓖麻离体培养体系的建立

为建立蓖麻的离体培养体系,以其无菌发芽的种子苗为材料,切取其根、茎、叶及顶芽为外植体,探讨不同诱导途径中不同生长调节剂对愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽诱导及腋芽增殖的影响。结果表明:(1)去种皮后消毒种子的萌发率最高,萌发所需时间最短,染菌率也低;筛选出种子萌发适宜培养基为MS 0;(2)器官发生型诱导途径中,诱导愈伤组织最适的培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L,其中以茎为外植体诱导率最高,可达90%,但愈伤组织的分化较困难;(3)器官型诱导途径中,叶基、叶脉处能直接诱导不定芽,最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;(4)顶芽诱导腋芽增殖的效果最佳(51个芽/外植体),最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+TDZ 1 mg/L;(5)生根最适培养基为位1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。     

丝棉木松散型胚性愈伤组织的诱导与增殖

通过建立丝棉木松散型胚性愈伤组织培养体系,为丝棉木组培快繁、体细胞离体诱变育种及遗传转化等研究奠定基础。本试验以丝棉木幼嫩茎段为外植体,研究植物生长调节剂不同种类和浓度对丝棉木松散型胚性愈伤组织诱导与增殖的影响。结果显示,丝棉木茎段在MS+1.0 mg/L 2,4-D培养基上可诱导出松散型愈伤组织,愈伤组织诱导率达100%;将松散型愈伤组织转接到MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上可获得胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转接到MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上,每15 d继代培养一次,继代时选择结构松散、质地硬脆的愈伤组织,继代培养2～3次后可获得均质的丝棉木松散型胚性愈伤组织。本研究表明,丝棉木茎段理想的松散型愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D;最适松散型愈伤组织诱导培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D;最适胚性愈伤组织增殖培养基为MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D。     

孝顺竹愈伤组织诱导及植株再生

利用孝顺竹小穗和种胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织并成功实现植株再生.对影响愈伤组织诱导和分化的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选,结果表明:愈伤组织诱导以NB,N6基本培养基附加4 mg·L-1 2,4-D较好;外植体在NB+500 mg·L-1脯氨酸+500 mg·L-1谷氨酰胺+300 mg·L-1水解酪蛋白+30 g·L-1蔗塘+8 g·L-1卡拉胶(Carrageenan)+4 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上经20 d培养,小穗愈伤组织诱导率达87.30%,种胚愈伤组织诱导率为76.27%.愈伤组织预分化及分化的基本培养基以MS较适宜,经MS+30 g·L-1蔗糖+10 g·L-1卡拉胶+4 mg·L-1 KT培养基预分化7 d后,转入无激素的MS培养基上分化14 d,小穗愈伤组织仅个别长出绿色芽头;但种胚愈伤组织芽分化率可达80.0%.分化芽中有8%左右的白化苗,并伴有花叶苗出现.优化后的种胚愈伤组织预分化最佳培养基是MS+3 mg·L-1 6-BA+3 mg·L-1 KT.分化芽苗在添加2mg·L-1 NAA的MS培养基上生根良好,移栽成活率可达70%以上.