A型肉毒毒素治疗偏侧面肌痉挛24例

目的：介绍A型肉毒毒素(BTXA)面肌局部注射的具体操作方法，观察其治疗偏侧面肌痉挛的临床疗效。方法：对24例偏侧面肌痉挛患者行BTXA局部面肌注射，评价其疗效。结果：24例患者，完全缓解13例(54．2％)，明显缓解11例(45．8％)。2—5d起效．作用维持3—7个月。结论：BTXA治疗偏侧面肌痉挛疗效显著、安全，只要注射操作恰当，可避免眼睑下垂，降低口唇明显歪向健侧的发生率。     

C型肉毒梭菌肉毒毒素的抗原性分析

[目的]通过对分离纯化的C型肉毒毒素抗原性分析,提供快速鉴定动物因C型肉毒梭菌中毒的理论基础.[方法]对分离纯化的C型肉毒梭菌的肉毒毒素灭活后通过SDS - PAGE测定浓度,确定浓度后与弗氏佐剂乳化后免疫家兔,免疫结束后采家兔血液并分离血清.[结果]将不同稀释倍数的肉毒毒素经SDS -PAGE电泳分离后,转移至HybondNC膜,家兔三免后提取的血清作为一抗,用二抗进行Western blotting检测,大约在98.0和53.0 kDa处出现特异反应带;抗原与抗体在琼脂凝胶上结合时,会形成清晰的沉淀带.[结论]分离纯化的C型肉毒毒素,经免疫后家兔可见:C型肉毒毒素具有免疫原性和反应原性,抗体的效价为1∶8.     

A型肉毒毒素重链C片段基因的克隆及序列分析

成功克隆了A型肉毒毒素重链C片段部分基因．以肉毒梭菌(62A)基因组DNA为模板，以此基因特异性引物为介导，采用Touchdown PCR方法，从肉毒梭菌基因组中扩增出目的基因片段后，将其克隆入T载体，进行酶切鉴定和序列分析．结果表明，此基因片段与(Genbank中的BoNTa基因(收录号：M30196)核苷酸序列的同源性为100％，说明目的基因得到了成功地克隆，为后续研究奠定了基础．     

A型产气荚膜毒素培养工艺研究

兔魏氏梭菌病是A型魏氏梭菌产生的外毒素引起的一种急性、致死性传染病,A型魏氏梭菌致病因子是菌体产生的外毒素,其中主要是产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringens,CPA).如果要生产优质高效的A型魏氏梭菌疫苗,就必须培养出含大量活性的α毒素菌苗.试验采用A型魏氏梭菌菌种,按照不同比例、不同代次菌种接种及培养基中加入糊精、蛋白胨、硫乙醇酸盐物质等方法,对所产生的A型产气荚膜毒素量、生物活性进行了对比,拓宽了A型产气荚膜毒素培养工艺,对临床A型魏氏梭菌菌苗的生产和检验提供了一定地技术指导.     

D型肉毒梭菌毒素水剂灭鼠效果研究

1 000万毒价/mL D型肉毒梭菌毒素水剂是一种新型生物灭鼠剂,对高原鼠兔、鼢鼠、草原鼠、家鼠均有毒杀作用。具有毒性强、用量少、成本低、无二次中毒、适口性好、见效快、不污染环境、对人畜安全、使用方便等特点。通过2005—2006年在退耕还林地进行灭鼠试验,效果显著。2006—2010年在场区进行了大面积的推广使用。     

A型肉毒毒素单克隆抗体的制备及初步鉴定

制备了A型肉毒毒素(BoNT/A)单克隆抗体(mAb),并对其免疫学特性进行了初步鉴定.用BoNT/A重组抗原(BoNT/A Hc)免疫Balb/c小鼠后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,经3次亚克隆建立了3个稳定分泌抗BoNT/A抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A8、4F7和2F2,3株抗体均属IgG1亚型,效价为10-4～10-5,3株单抗抗相同抗原表位,交叉反应结果表明,3株单抗与BoNT/A的类似物均无交叉反应,具有较高的特异性.     

A型肉毒素注射治疗带状疱疹后神经痛的系统评价

目的:评价A型肉毒素(Botulinum toxin type A,BTX-A)注射治疗带状疱疹后神经痛(Postherpetic Neuralgia,PHN)的疗效。方法:对在Pubmed、Medline、EMBASE、OVID、中国期刊全文(CNKI)数据库中搜索出截止2016年1月的BTX-A注射治疗PHN的随机对照试验采用Revman 5.0进行系统评价。结果:纳入4个BTX-A注射治疗PHN的随机对照试验,共纳入563人。各研究的临床观察时间点及结局指标不统一,BTX-A注射治疗后5~10d3个研究间视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS)得分存在异质性(I2=97%),采用随机效应模型合并效应检验Z=3.50(P=0.0005)。BTX-A注射治疗后12周2个研究间VAS得分存在同质性(I2=0%),采用固定效应模型合并效应检验Z=6.51(P0.00001)。4个随机对照试验中均显示BTX-A注射治疗无明显副作用。结论:BTX-A注射治疗PHN有一定疗效,无明显副作用,但尚需更多高质量的研究验证。     

A型魏氏梭菌毒素毒力测定替代试验

通过Kaerber方法测定α毒素对小鼠的半数致死量后 ,定量出 10LD50 毒力标准的毒素所能引起卵磷脂水解反应的稀释度为 6 ,每一水解稀释度相当于LD50 /6 4的毒力标准 ,从而建立起A型魏氏梭菌毒素毒力测定动物试验的替代试验。α毒素毒力与卵磷脂水解反应的浑浊度在该试验条件下具有稳定的相关性 ,不同批次的卵磷脂及毒素中所含菌体的数量对试验结果的判定无影响。该替代试验比原方法操作更简单 ,取材也经济 ,并能对毒素毒力进行定量计算     

A型魏氏梭菌α毒素羧基端蛋白基因表达与结构分析

利用PCR技术将α毒素羧基端基因CPA251-370克隆到pET-32a载体上,构建了重组表达质粒pXETCPA-C,酶切鉴定和序列分析证实其含有CPA251-370基因且序列和阅读框架均正确。对重组菌株BL21(DE3)(pXETCPA-C)表达的蛋白质进行SDS-PAGE分析,结果表明CPA251-370蛋白表达量占菌体总蛋白质相对含量的16.43%。SOPMA法预测表明CPA251-370蛋白二级结构主要由β折叠和无规则卷曲组成,其3D结构与α毒素羧基端部分相似。CPA和CPA251-370蛋白的圆二色(CD)光谱分析发现两者的CD光谱仅有一些微小变化。免疫攻毒试验表明CPA251-370蛋白免疫的小鼠能抵抗最小致死剂量(MLD) 0.5 mL·只~(-1)(活菌数约为5×10~9 cfu)的A型魏氏梭菌标准株C57-1毒素攻击。该研究深入阐释了A型魏氏梭菌α毒素的分子结构,为揭示其作用的分子机制奠定了坚实基础。     

头功铁药散对A型魏氏梭菌α毒素的mRNA表达及损伤小鼠免疫功能的影响

探讨自拟处方头功铁药散对A型魏氏梭菌α-毒素损伤小鼠免疫功能的影响,并检测了α毒素mRNA表达的情况.检测小鼠部分免疫功能;荧光定量RT-PCR法检测α毒素基因mRNA表达的变化.结果显示,与模型组相比,头功铁药散能拮抗α-毒素对小鼠的损伤,极显著提高小鼠免疫器官指数及巨噬细胞的吞噬能力(p0.01);与细菌模型组相比,头功铁药散能极显著降低α毒素基因表达(p0.01).推测头功铁药散可通过提高小鼠免疫功能,并下调α毒素基因表达,从而减少α-毒素对小鼠的损伤.     

头功铁药散对 A 型魏氏梭菌α毒素的 mRNA表达及损伤小鼠免疫功能的影响

探讨自拟处方头功铁药散对 A 型魏氏梭菌α毒素损伤小鼠免疫功能的影响,并检测了α毒素 mRNA 表达的情况．检测小鼠部分免疫功能;荧光定量 RT‐PCR 法检测α毒素基因 mRNA 表达的变化．结果显示,与模型组相比,头功铁药散能拮抗α毒素对小鼠的损伤,极显著提高小鼠免疫器官指数及巨噬细胞的吞噬能力（p ＜0.01）;与细菌模型组相比,头功铁药散能极显著降低α毒素基因表达（p ＜0.01）．推测头功铁药散可通过提高小鼠免疫功能,并下调α毒素基因表达,从而减少α毒素对小鼠的损伤．     

窄谱中波紫外线联合阿维A胶囊治疗寻常型斑块状银屑病32例疗效观察

目的 观察窄谱中波紫外线(NB-UVB)联合阿维A胶囊治疗寻常型斑块状银屑病疗效.方法 96例确诊为寻常型斑块状银屑病的患者随机分为紫外线组、阿维A组和联合组,每组32例,分别采用窄谱中波紫外线、阿维A胶囊、窄谱中波紫外线联合阿维A胶囊治疗寻常型斑块状银屑病,疗程结束后比较其银屑病面积和严重度指数(PASI)及疗效.结...