连翘酯苷A对内毒素致鸡脾淋巴细胞白介素-6的影响

试验旨在研究内毒素和连翘酯苷A对鸡脾淋巴细胞中炎症因子白介素-6(IL-6)水平的影响,将1日龄雏鸡正常饲养至50日龄时,心脏采血处死,表面消毒后,剖检分离鸡脾脏,用脾淋巴细胞分离液分离脾淋巴细胞,将脾淋巴细胞共分为20个组,具体为4个剂量组×5个时间点=20个组。4个剂量组分别为:对照组、LPS组(5μg/m L)、连翘酯苷A低剂量预防组(5μg/m L LPS+200μg/m L连翘酯苷A)、连翘酯苷A高剂量预防组(5μg/m L LPS+400μg/m L连翘酯苷A)。5个时间点分别为:0、6、12、24、48 h,经内毒素和连翘酯苷A处理不同剂量和不同时间后,收集脾淋巴细胞,通过采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR(q RT-PCR)方法检测脾淋巴细胞中IL-6水平。ELISA结果显示:与对照组相比,LPS组脾淋巴细胞中炎症因子IL-6蛋白含量升高;与LPS组相比,连翘酯苷A不同剂量预防组脾淋巴细胞中IL-6蛋白含量均下降,表明脾脏中IL-6蛋白含量的变化与连翘酯苷A的剂量呈正相关性,通过抑制LPS诱导的鸡脾脏中IL-6蛋白含量的升高,可减轻炎症反应。q RT-PCR结果显示:与对照组相比,LPS组脾淋巴细胞中IL-6 mRNA表达量升高;与LPS组相比,连翘酯苷A不同剂量预防组脾淋巴细胞中IL-6 mRNA表达量均下降,IL-6 mRNA表达量与连翘酯苷A的剂量呈负相关性,试验表明连翘酯苷A可以通过转录水平抑制LPS诱导的鸡脾淋巴细胞中IL-6 mRNA表达量的升高,减轻炎症反应。结果表明,连翘酯苷A抑制鸡脾淋巴细胞中IL-6水平,对免疫功能有一定免疫影响,具有抗炎功能。     

连翘酯苷A对内毒素致炎鸡脾脏IL-17和IL-6水平的影响

为了研究连翘酯苷A的抗炎效应,试验选取80只1日龄健康AA肉仔鸡采用LPS诱导鸡炎症模型随机分为4组,分别为对照组、LPS组、FA低剂量组(30 mg/kg)和FA高剂量组(60 mg/kg),通过剖检并分离鸡脾脏,计算鸡脾脏器官指数,并通过qRT-PCR和ELISA方法检测脾脏中IL-17和IL-6的mRNA表达量和蛋白水平。结果表明:与对照组相比,LPS组脾脏器官指数上升,脾脏中IL-17和IL-6的mRNA表达量升高;与LPS组相比,FA低剂量组和FA高剂量组脾脏器官指数下降,脾脏中IL-17和IL-6的mRNA表达量下降。与对照组相比,LPS组脾脏中IL-17和IL-6的蛋白含量升高;与LPS组相比,FA低剂量组和FA高剂量组脾脏中IL-17和IL-6的蛋白含量下降。可见连翘酯苷A可以通过抑制LPS诱导的鸡脾脏中IL-17和IL-6的蛋白含量和mRNA表达量的升高,使鸡脾脏器官指数下降,起到调控鸡脾脏免疫反应,通过影响IL-17和IL-6的基因和蛋白水平发挥抗炎功能的作用。     

连翘酯苷A对LPS诱导的鸡血液和脾脏IL-1β mRNA表达水平的影响

试验旨在研究鸡经过脂多糖和连翘酯苷A处理后,鸡血液和脾脏IL-1β基因和蛋白水平的影响。选取240只1日龄健康AA肉鸡,并随机分为4组,经不同处理方式后,采集鸡血液和脾脏,分别采用Real-time PCR和ELISA检测IL-1β基因和蛋白水平。结果显示:与对照组相比,LPS组鸡血液和脾脏中IL-1β mRNA表达量升高(P0.05);与LPS组比较,连翘酯苷A组鸡血液和脾脏中IL-1β mRNA表达量下降(P0.01),并表现为一定的剂量效应。与对照组相比,LPS组脾脏中IL-1β蛋白含量显著升高(P0.01);与LPS组比较,连翘酯苷A组鸡血清和脾脏中IL-1β蛋白含量下降(P0.01),并表现为一定的剂量效应。表明连翘酯苷A可分别从基因和蛋白水平抑制鸡脾脏和血中IL-1β mRNA表达量与蛋白含量,进而通过影响炎症通路其他炎症因子或介导抗氧化功能调控免疫应答,减轻炎症反应。     

连翘酯苷-羟丙基-β-环糊精包合物制备及其特性

针对连翘酯苷稳定性较差,限制了药物制剂制备及临床应用的问题,采用环糊精包合技术研制连翘酯苷注射剂,利用研磨法制备连翘酯苷-羟丙基-β-环糊精包合物.表征分析表明包合物光谱和熔点发生变化,对光稳定性和热加速实验稳定性明显增加.高效液相色谱分析鸡静脉注射给药血药浓度,表明连翘酯苷包合物与连翘酯苷药物动力学差异较小,血液中包合态药物能较快发生脱包合作用.     

连翘酯苷的研究进展

连翘酯苷作为连翘属植物中的主要有效成分之一,目前被广泛研究.连翘酯苷是一种还原剂,具有多种药理作用,包括有很强的抗菌活性,其抗菌谱广,并有较强的抗病毒和抗氧化活性,还有解热镇痛和免疫调节作用,为此,是一种多功效的中药活性成分,具有较大的研究价值.     

连翘苷对原代大鼠肝细胞CYP3A1的影响

连翘是常用中药,具有清热解毒、消肿散结之功效,主治温热、丹毒、斑疹、疮疡肿毒、瘰疬等病症,其有效成分连翘苷具有较强的抑菌、抗病毒能力.细胞色素:P450酶(CYP450)主要存在于肝脏中,参与一系列的药物代谢,对维持机体内环境稳定有重要作用,是药理学、毒理学研究的热点.细胞色素P4503A酶(CYP3A)占CYP450总量的25%～28%.约有60%的药物经肝脏CYP3A代谢,在药物代谢中起着重要作用.     

鸡脾水解液对鸡淋巴细胞和巨噬细胞免疫调节的影响

为了定量研究鸡脾水解液对鸡的免疫增强功能,将SPF鸡随机分为4组,按高、中、低剂量分别灌服鸡脾水解液,并设立空白对照组来测定不同剂量鸡脾水解液对鸡T淋巴细胞数量的影响;将SPF鸡随机分为两组,采用鸡脾水解液点眼滴鼻的方式考察其对鸡巨噬细胞吞噬功能的影响。结果表明:鸡脾水解液在持续用药第7天和第14天,所有接种组的T淋巴细胞百分率均显著高于空白对照组,其中高剂量组比对照组高约30百分点,差异极显著(P0.01);停服后第7天,高剂量组T淋巴细胞百分率仍高于对照组约10百分点,差异显著(P0.05)。通过碳廓清试验证实了鸡脾水解液还能明显提高巨噬细胞吞噬指数,试验组在点眼滴鼻鸡脾水解液后第2天和第5天巨噬细胞吞噬指数增长率比对照组分别高36.61百分点和29.54百分点。说明鸡脾水解液具有免疫增强的功能。     

连翘酯苷A抗大鼠类风湿性关节炎机制研究

[目的]探讨连翘酯苷A对类风湿性关节炎大鼠的抗炎作用及作用原理。[方法]将30只SD大鼠[体重(120±2)g],随机分成3组,每组10只,分别为对照组(A组)、类风湿性关节炎组(B组)和连翘酯苷A治疗组(C组)。首先构建大鼠类风湿性关节炎模型,再观察各组大鼠临床症状、血清中TNF-α蛋白表达量、抗氧化酶和自由基含量。[结果]类风湿性关节炎模型组大鼠血清中TNF-α蛋白表达量增加,SOD含量下降,NO含量上升;而连翘酯苷A治疗组上述指标的趋势正好与之相反。[结论]连翘酯苷A可通过抑制炎症因子TNF-α的含量,并干扰TNF-α蛋白的翻译,影响抗氧化酶及自由基含量,最终发挥抗炎功效。     

连翘酯苷的生物学功能及其在鸡生产中的应用

本文就连翘酯苷的抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗微生物、免疫调节等生物学功能及其在鸡生产中的应用研究进展进行综述。     

镉致体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白损伤

为了探讨镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白损伤的影响。通过对体外培养的鸡脾淋巴细胞以终浓度为10μmol／LCdCIz进行染毒,培养12、24、36、48、72h后,收集细胞并提取细胞膜,聚丙烯酰胺梯度电泳分析膜蛋白组分。结果显示,试验组膜蛋白I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅸ的含量有升高趋势,蛋白区带V、Ⅵ、Ⅶ的百分含量有降低趋势,蛋白区带V、Ⅷ的含量变化不明显。说明镉能对鸡脾淋巴细胞膜蛋白造成损伤,使其膜蛋白组分含量改变,膜蛋白功能受抑制。     

连翘子中连翘酯苷含量测定方法的研究

为了建立连翘子中连翘酯苷含量的测定方法,为连翘资源的综合开发利用提供理论依据,试验采用反向高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil ODS2(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%冰醋酸(35∶65);柱温为30℃;检测波长为290 nm;流速为1.0 mL/min。结果表明:连翘酯苷进样量在0.05~0.80μg范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.81%,相对标准偏差(RSD)为1.60%(n=6)。说明该方法简便、灵敏、准确,可作为连翘子中连翘酯苷质量的控制手段。     

两种提取方法对连翘中连翘脂苷A含量的影响研究

为探讨水提法和70%甲醇提取方法对连翘[Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl]提取物中连翘脂苷A含量的影响,分别采用水回流法和70%甲醇超声法提取连翘中的连翘脂苷A后,用高压液相色谱仪对两种提取液中的连翘脂苷A含量进行检测,结果回流法提取的连翘脂苷A含量为1.12%,70%甲醇超声法提取的连翘脂苷A含量为6.28%。70%甲醇超声法提取的连翘脂苷A含量为水提法的5.61倍。     

铝对体外培养鸡脾淋巴细胞钙稳态的影响

本研究通过对体外培养的鸡脾淋巴细胞进行染铝处理,检测细胞内游离钙离子浓度和CaM mRNA表达水平,以探讨铝对淋巴细胞钙稳态的影响,为探讨铝的免疫毒性机制提供基础资料.     

三氯化铝对体外培养鸡脾淋巴细胞DNA合成的影响

以体外培养1月龄雏鸡脾脏淋巴细胞为研究对象,在细胞培养液中分别添加0、0.2、0.4、0.6mg/mL的三氯化铝(AlCl3),原代培养24h,用3H-TdR掺入法观测不同水平的铝对淋巴细胞DNA合成的影响。结果表明,随染铝剂量的加大,DNA合成呈抑制趋势,低剂量组DNA合成低于对照组,但差异不显著(P>0.05);中、高剂量组DNA低于对照组,组间差异显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。结果提示,高铝对体外培养鸡脾淋巴细胞DNA合成有抑制作用。     

镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜流动性的影响

细胞膜的结构不仅是细胞与外界隔离的屏障和细胞构成的组织形式,而且也是生命活动的主要结构基础,同时也是外源化学物质进入细胞、发挥其生物毒性作用所必须经过的第一道关卡,许多有毒化学物的毒性作用与其对生物膜损伤作用有关。膜流动性是生物膜结构的主要特征,膜流动性的改变会导致膜功能的变化。镉是一种来源广泛、半衰期较长且蓄积性强的有毒重金属污染物。镉吸收入血后可迅速与     

连翘酯苷对体外培养细胞的毒性研究

探讨了连翘酯苷对体外培养细胞的毒性,以期为人们更好地研究利用连翘酯苷提供实验依据。实验采用细胞病变法观察连翘酯苷对猪肾细胞（PK-15）、猴肾细胞（Mare-145）、鸡胚肾细胞（CEK）、鸡外周血淋巴细胞（PBL）等4种细胞的形态损伤;用MTT法检测连翘酯苷作用这4种细胞后的细胞活性和细胞数量的变化。根据这两种方法的结果计算出连翘酯苷对这4种细胞的半数致死量。实验结果显示高剂量的连翘酯苷可致细胞发生病变,而低剂量组的细胞形态优于对照组。经SPSS16．0统计,连翘酯苷对PK-15、Mare-145、CEK3种细胞的半数致死量分别为137．8、87．1、384．4μg／mL,对PBL应用到中华人民共和国兽药典（2000年版）规定药量的10倍剂量,结果未发现致死性。因此,适当合理的连翘酯苷用量对体外培养的细胞没有毒性,反而有一定的维持细胞形态的营养作用和刺激细胞增殖的作用。     

连翘酯苷诱生干扰素-γ对AAⅠ诱导的RTECs转分化的影响

体外培养小鼠RTECs,将其随机分为6组,CCK-8法测连翘脂苷对RTECs的增殖率及存活率的影响,ELISA检测转化生长因子β1（TGF-β1）和干扰素-γ的含量,RT-PCR和Western blot检测CK18和Smad7等相关因子的表达变化。结果显示连翘酯苷质量浓度为160mg/L以下对RTECs无毒性,且诱生干扰素2.392μg/L;用药E组与模型B组比较TGF-β1表达显著下降（P〈0.01）;用药组与模型组相比Smad7mRNA极显著高表达（P〈0.01）、CK18mRNA显著高表达（P〈0.05）,而vimentin、α-SMA mRNA抑制表达（P〈0.01）;Western blot结果表明上调了Smad7的表达量。试验表明连翘脂苷可以提高Smad7的表达量,阻止Smad2/Smad3磷酸化,抑制TGF-β1/Smads信号通路,有效改善AAI诱导的肾小管上皮细胞转分化。     

黄芪甲苷对染镉鸡脾淋巴细胞膜氧化损伤的保护作用

探讨黄芪甲苷对镉致鸡脾淋巴细胞膜氧化损伤的保护效果.设对照组、0.5%二甲基亚砜(DMSO)组、镉(10μmol/L)组和镉(10μmol/L)加黄芪甲苷(分别为5、10和20 mg/L)组,进行体外培养淋巴细胞,分别培养24、48和72 h时收集细胞,提取脾淋巴细胞膜,采用试剂盒比色法,分别检测细胞膜谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性及膜丙二醛(MDA)的含量.DMSO组与对照组相比无显著性差异;镉能明显降低细胞膜GSH-Px和SOD的活性,使MDA含量增加;添加黄芪甲苷的各组中细胞膜GSH-Px和SOD的活性明显升高,MDA含量降低,其影响较为显著的是10 mg/L的黄芪甲苷质量浓度组.结果表明:黄芪甲苷可以保护染镉后鸡脾淋巴细胞膜的氧化损伤作用.     

镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜抗氧化功能的影响

以终浓度为10μmol/L CdCl2对体外培养淋巴细胞进行染毒,分别培养12、24、36、48和72h时收集细胞,提取体外培养脾淋巴细胞膜,采用试剂盒比色的方法,分别检测了细胞膜GSH-Px、SOD的活性、膜MDA和SA含量及培养液LDH的活性,来观察镉性细胞损害时细胞膜的抗氧化功能和通透性。结果显示,随着镉作用时间的延长,淋巴细胞膜GSH-Px、SOD的活性降低,MDA生成量增加,试验组与对照组差异显著（P〈0.05）或极显著（P〈0.01）;培养液中LDH活性升高,膜SA含量降低。表明镉可使淋巴细胞膜的抗氧化功能降低,膜完整性被破坏。