二倍体马铃薯野生种高效再生体系的建立

以二倍体马铃薯野生种(Solanum cardiophyllum)的叶片和茎段为材料,进行离体再生体系的研究.结果表明,叶片和茎段愈伤组织最适诱导培养基分别为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,平均诱导率分别达93.75%和99.26%;来源于叶和茎段的愈伤组织不定芽分化的最适培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA<,3> 2.5 mg/L和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA<,3> 5.0 mg/L,不定芽平均分化率达96.43%和97.25%.生根培养基以MS+NAA 0.3 mg/L效果最好,平均生根率达100%.     

苎麻叶片高效再生体系的建立

以湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川洪县园麻的叶片为材料,构建4个品种高效、稳定的不定芽再生体系. 湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川洪县园麻最适诱导愈伤组织及分化不定芽的培养基分别为MS+0.7 mg/L TDZ+0.02 mg/L 2,4-D,MS+0.3 mg/L TDZ+0.01 mg/L 2,4-D,MS+0.3 mg/L TDZ+0.05 mg/L 2,4-D,MS+ 0.9 mg/L TDZ +0.05 mg/L 2,4-D;不定芽分化率分别为83.3%,81.7%,90.0%,86.7%;4个品种再分化时出现丛生芽,新宁青麻愈伤组织的平均再生不定芽数达2.62个,其他3个品种也都有数量不等的丛生芽产生,不定芽生根培养基为MS+ 0.05 mg/L NAA;叶块经过添加6%蔗糖培养基培养2周,再转入含3%蔗糖的培养基中培养,其中经6%蔗糖培养能显著提高湘苎2号、新宁青麻、四川洪县园麻不定芽分化率、平均再生不定芽数.     

马铃薯叶片愈伤组织再生体系的建立

以8个马铃薯品种(系)为试材,进行叶片离体再生研究。结果表明,云薯501愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA310 mg/L,愈伤诱导率为100%,诱导不定芽分化的优化培养基为MS+6-BA 3 mg/L+GA310 mg/L,芽的分化率为86.3%;会-2的愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA310 mg/L,愈伤诱导率为95.7%,诱导不定芽分化的优化培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.02 mg/L+GA310 mg/L,芽的分化率为65.4%。上述2个品种适宜用作马铃薯转基因实验的载体,其他6个马铃薯品种(系)的愈伤诱导率很低,有的品种(系)没有愈伤组织产生,不能作为马铃薯基因转化的载体。     

杂合二倍体马铃薯RH再生体系的初步研究

以杂合二倍体马铃薯(Solanum tuberosum)RH89-039-16(RH)无菌植株为材料,利用控制变量法对植物生长素和细胞分裂素浓度进行筛选以获得再生体系所需激素配比。结果表明,叶片愈伤组织诱导的培养基激素浓度配比为ZT 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L;茎段愈伤组织诱导的培养基激素浓度配为比ZT0.5 mg/L+IAA 2.5 mg/L;愈伤组织分化不定芽的培养基激素浓度配比为ZT 2.0 mg/L+GA310 mg/L。     

全粉加工兼早熟菜用马铃薯品种LK99再生体系的建立

以马铃薯品种LK99试管苗茎段为外植体,分别在6种培养基上进行愈伤组织的诱导,比较接种28 d时的出愈率及愈伤组织的形态,并将胚性愈伤接到8种不同分化培养基上进行再生苗的分化。结果表明,在接种28 d后,6种培养基均可诱导出大量的愈伤组织,以MS+2.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3 mg/L GA3+0.5 mg/L 2,4-D培养基上胚性愈伤诱导率最高,生长状态最好。胚性愈伤在MS+2.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L ZT+3.5 mg/L GA3培养基上分化率最高,并且分化苗键壮。     

库尔勒香梨离体叶片再生体系的建立

【目的】建立库尔勒香梨叶片诱导再生的稳定高效再生体系。为梨的遗传转化研究奠定基础。【方法】以库尔勒香梨离体培养的继代30 d左右的无菌苗叶片为材料,1/2 MS为基本培养基,用 TDZ与 IBA或 NAA分别组合设计配方,研究不同生长调节剂质量浓度组合对不定芽诱导过程中愈伤组织形成率和不定芽形成率的影响,选取最优配方附加不同质量浓度的AgNO₃,获得不定芽再生的最佳培养基。用IBA和NAA分别组合设计生根生长调节剂的配比,根据生根率、平均生根数以及平均生根长度筛选最适宜生根的生长调节剂的配比,建立生根的培养体系。【结果】库尔勒香梨叶片诱导不定芽再生的最佳培养基为1/2 MS+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+AgNO₃ 0.5 mg/L,愈伤组织诱导率100%,不定芽形成率84.92%。最适宜香梨再生苗生根的培养配方为1/2 MS + 0.5 mg/L IBA + 0.9 mg/L NAA,结合前期暗培养7 d,生根率可达100%,平均生根条数为5.66,平均根长度为 2.8 cm。【结论】建立了库尔勒香梨的再生体系。     

彩色马铃薯叶片再生体系的研究

以云南省农科院马铃薯研究中心选育的4个彩色马铃薯品系为试验材料,进行了叶片离体再生的研究.结果表明,DE02-24-24的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;DE02-24-39的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;JC02-27-1的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;JC02-27-2的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L.愈伤组织的诱导率均可达到100%.愈伤组织诱导不定芽分化的最佳培养基分别为DE02-24-24为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 3.0 mg/L;DE02-24-39为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L+GA3 2.0 mg/L;JC02-27-1为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA3 2.5 mg/L;JC02-27-2为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA32.0 mg/L.其不定芽分化率分别为83.3%、100%、93.3%、100%.     

影响马铃薯再生体系建立的主要因素

再生体系的建立是进行马铃薯遗传转化的基础,从影响马铃薯高效再生体系建立的遗传因素、外植体的生理状态、培养基配方和环境条件等内外因素进行了总结,以期为马铃薯无性变异系的筛选和基因工程改良提供依据。     

珍稀植物香果树植株再生体系的建立

通过不定芽直接再生和经愈伤组织诱导器官发生两种途径,建立了香果树快速、高频率发生的植株再生体系,探讨了不同外植体（幼叶切块、茎段、叶柄和根）、叶片放置方式、植物生长调节剂和培养条件对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响.香果树愈伤组织诱导器官发生结果表明:不同外植体在MS附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L 2,4-D的培养基上愈伤组织诱导率均为100%,其中叶片外植体叶面向下放置效果最好;愈伤组织在MS添加0.5 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA的培养基上不定芽的分化率为94.35%.香果树不定芽直接再生结果显示:叶片外植体在MS添加6-BA或ZT的培养基上,不定芽直接再生率均高达100%,其中在MS附加2.0 mg/L 6-BA培养基上,产生的不定芽数目多,生长旺盛;附加1.0 mg/L ZT 培养基上,不定芽数目多达56.67个/cm[[sup]]2[[/sup]],但生长较弱.黑暗预培养有利于香果树叶片外植体不定芽的再生.两种途径得到的不定芽转到1/2 MS培养基上均可生根,生根率达100%,附加1.0 mg/L 的IBA和0.5%的活性炭有利于再生植株根的生长.      

马铃薯新品种陇薯10号再生体系的建立

以陇薯10号试管苗茎段为外植体,分别在5种培养基上进行愈伤组织诱导,比较接种后28d时的出愈率及愈伤组织的形态,并将胚性愈伤接到10种不同分化培养基上进行再生苗分化。结果表明：接种28d后,5种培养基均可诱导出大量的愈伤组织,MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋3．0mg／LGA3＋0．5mg／L2,4-D培养基上胚性愈伤诱导率最高,生长状态最好。胚性愈伤在MS＋2．0mg／L6-BA＋2．0mg／LZT＋3．0mg／LGA3培养基上分化率最高,且分化苗粗壮。     

马铃薯延薯4号再生体系建立

为了建立马铃薯高效、稳定离体再生体系,以延薯4号无菌试管苗茎段为材料,通过对茎段再生体系的筛选,优化了培养基内最佳激素配比浓度。结果表明:马铃薯延薯4号无菌试管苗茎段诱导愈伤组织最适培养基为:MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+NAA1.0 mg·L~(-1)。茎段丛生芽分化的最适培养基为:MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+NAA0.20mg·L~(-1)+G A_31.0mg·L~(-1)。     

康乃馨‘白雪公主’叶片培养植株再生

为建立一套快速、有效的康乃馨白色品种的再生体系,以康乃馨‘白雪公主’的幼叶为外植体,对其愈伤组织和不定芽诱导、不定芽伸长和不定根诱导各阶段所需的植物激素、植物材料的影响进行了探讨。结果表明,当叶片外植体的长度为5 mm时,在TDZ 0.5 mg·L^-1、NAA 0.5 mg·L^-1的MS培养基上,愈伤组织和不定芽的诱导效果最为理想;从愈伤组织切下不定芽,移植于单独添加NAA为0.5 mg·L^-1的培养基能有效地促进不定芽的伸长;不定芽伸长至3~4 cm后,在添加NAA 0.1 mg·L^-1的培养基上,不定根分化的数量最多;再生植株经移栽和炼苗后生长状态良好。     

人参植株再生体系的建立和优化

以人参种子、芽胞、茎、叶为外植体,通过器官发生途径建立人参高效再生体系.筛选出不定芽诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L BA+0.2 mg/L IBA,继代培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L IBA和MS+2.5 mg/L BA+0.2 mg/L IBA,生根培养基为1/2 MA+1.0 mg/L NAA;16 h光照/8 h黑暗培养.移栽获得再生植株.     

加拿大枫树离体再生体系的建立

为了建立加拿大枫树的高效再生体系,以加拿大枫树无菌苗为试材,通过采用不同外植体和含有不同激素的培养基配方,获得了加拿大枫树的芽再生、根系诱导的最佳配方。结果显示：培养基配方2（MS＋1．0mg／LBA＋0．2mg／LIAA）的芽再生率较高（80％）,平均每块外植体的再生芽数最高（2．7个芽/外植体块）,再生芽的质量最好;下胚轴和叶柄的芽再生率为100％,子叶最低,为77．5％。下胚轴平均每块外植体的再生芽数最高（6．5个／块）,叶柄的居中（3．6个,块）,子叶的最低（2．6个／块）;1／2MS＋0．2mg／LNAA配方的枫树生根率为100％,单株生根数最高,为5．9条,且根系生长粗壮。     

喀什哈尔葡萄组织培养及再生体系的建立

以喀什哈尔葡萄单芽茎段为材料,进行了离体组织培养并以实验获得的喀什哈尔葡萄组培苗进行了外植体器官直接再生研究.结果表明:喀什哈尔葡萄单芽茎段最适初始培养基是:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L,侧芽萌芽率达100;;最适继代培养基是:MS+KT 0.1 mg/L+IBA 0.4 mg/L,同时伸长生长与生根生长,生根率达100;.探讨了喀什哈尔葡萄器官再生的影响因素,并以叶片为试材,建立了植株再生体系.叶片不定芽再生的最佳培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L ,再生率为14.3;;最佳生根培养基是MS+KT 0.1 mg/L+IBA 0.4 mg/L,生根效果良好,生根率为92;.     

马铃薯品种茎段愈伤组织诱导和植株再生的研究

以2个马铃薯品种夏坡蒂和费乌瑞它茎段为外植体,研究了不同植物激素对马铃薯愈伤组织诱导及其不定芽分化的影响.结果表明,夏坡蒂和费乌瑞它的茎段最佳愈伤诱导组织培养基分别为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+GA30.5mg/L和MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA30.5mg/L,愈伤率均可达到100%;夏坡蒂和费乌瑞它的不定芽最佳诱导培养基分别为MS+ZT 2.0 mg/L+NAA0.1mg/L+GA3 5mg/L和MS+6-BA 2.0mg/L+ZT 2.0mg/L+GA3 5mg/L,诱导率分别为52.38%和53.6%.结果为进一步转基因工作中高效植株的再生奠定了一定的基础.     

I-72杨再生体系的建立

以水培I-72杨（Populus euramericana San Martino）的叶片和叶柄为外植体,探讨了I-72杨植株再生的方法。结果表明：I-72杨愈伤组织诱导和不定芽分化的最佳培养基为MS＋BA 0．5mg／L＋NAA0．1mg/L,愈伤组织诱导率为97．0％,不定芽分化率为91．1％;在诱导培养基中添加Vc（150 mg／L）能有效地抑制叶片的褐变,褐变降低率达25．0％;不定芽在MS＋BA 0．3mg／L＋NAA 0．05mg／L培养基中继代增殖系数为6．3;添加0．8mg／L GA3对继代培养中不定芽的伸长和增殖有显著效果;在生根培养基1／2MS＋NAA 0．05mg／L＋IBA0．2mg／L上,生根率达93．5％。     

夏蜡梅腋芽微繁殖及叶片不定芽再生

夏蜡梅(Sinocalycanthus chinensis)是中国特有的一种落叶观赏花木,为国家二级保护珍稀濒危植物.以夏蜡梅当年生枝条的茎段为供试材料,进行腋芽微繁殖和叶片不定芽再生的研究.结果表明:茎段在附加2.00mg/L ZT和0.05 ms/L IBA的WPM培养基上快繁,萌发迅速、芽体粗壮、叶色淡绿,月繁殖系数超过10.0,可以连续继代10次以上;以无菌苗的叶片为外植体在附加2.0 me/L TDZ、0.1 me/L IBA和1.0 me/L KT的WPM培养基上,不定芽再生频率达40%.在3/5MS大量元素+WPM微量元素+WPM有机成分+0.20 mg/L IBA+0.05%活性炭的生根培养基上,试管苗的根系和地上部发育良好,盆钵移栽成活率达100%.该体系的建立为夏蜡梅工厂化育苗以及运用生物技术手段对夏蜡梅进行改良奠定了基础. ms/L IBA的WPM培养基上快繁,萌发迅速、芽体粗壮、叶色淡绿,月繁殖系数超过10.0,可以连续继代10次以上;以无菌苗的叶片为外植体在附加2.0 me/L TDZ、0.1 me/L IBA和1.0 me/L KT的WPM培养基上,不定芽再生频率达40%.在3/ MS大量元素+WPM微量元素+WPM有机成分+0.20 mg/L IBA+0.05%活性炭的生根培养基上,试管苗的根系和地上部发育良好,盆钵移栽成活率达100%.该体系的建立为