网状内皮增殖病病毒（REV）感染SPF雏鸡后局部免疫组织抗体生 …

对ＳＰＦ雏鸡人工感染ＲＥＶ后局部免疫组织盲肠扁桃体和哈德氏腺的ＩｇＡ、ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体生成细胞数量动态变化进行了检测。结果发现,ＲＥＶ感染ＳＰＦ雏鸡后７～４９天消化道局部免疫组织盲肠扁桃体和呼吸道相关局部免疫组织哈德氏腺的ＩｇＡ、ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体生成细胞数量明显低于未感染对照雏鸡。表明雏鸡感染ＲＥＶ后消化道局部组织盲肠扁桃体和呼吸道相关免疫组织哈德氏腺体液免疫机能均显著下降。     

感染网状内皮组织增殖病病毒SPF雏鸡局部免疫组织的免疫学变化

研究１日龄ＳＰＦ雏鸡感染网状内皮组织增殖病病毒后局部免疫组织均浆涂片的免疫学变化。结果表明：雏鸡感染ＲＥＶ后其局部免疫组织中,淋巴细胞数、ＡＮＡＥ、Ｔ细胞数以及颗粒型和弥散型ＡＮＡＥ＾＋Ｔ淋巴细胞数明显低于未感染雏鸡。说明病消化道和呼吸道相关的局部免疫组织的细胞免疫呈现抑制。     

网状内皮组织增殖病病毒感染SPF雏鸡后局部体液免疫球蛋白含量变化

试验对ＳＰＦ雏鸡接种网状内皮组织增殖病病毒（ＲＥＶ）后,应用间接酶联免疫吸附分析法检测了泪液、气管液、肠液和胆汁的免疫球蛋白ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ含量的动态变化。结果发现,感染ＳＰＦ雏鸡泪液、气管液、肠液和胆汁的ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ含量于感染后７～４２ｄ明显降低,表明ＲＥＶ感染鸡的局部体液免疫能力降低     

网状内皮组织增殖病病毒感染SPF雏鸡后病毒在各器官内的分布

以间接免疫荧光抗体技术研究了１日龄ＳＰＦ雏鸡感染网状内皮细胞增殖病病毒（ＲＥＶ）后，病毒在机体各器官内的分布。结果表明，雏鸡感染ＲＥＶ后中在腔上囊、脾、肝和胸腺内大量存在，其它器官分布少。这与ＲＥＶ造成机体各免疫器官和肝的严重变性、导致机体免疫功能降低密切相关。     

感染REV雏鸡免疫器官中抗体生成细胞的动态变化

禽网状内皮组织增殖病 ( RE)是指由逆转录病毒科中网状内皮组织增殖病病毒 ( REV)引起的鸡、鸭、火鸡和其它禽类的病理综合征。包括急性网状内皮细胞肿瘤形成 ,矮小综合征 ,淋巴组织和其它组织的慢性肿瘤形成。REV是马立克氏病和淋巴细胞性白血病之后 ,第三种病因清楚的禽类病毒性肿瘤病 [1] ,自 5 0年代末首次在美国分离到 REV以来 [2 ]许多国家相继分离到 REV[3 ,4 ,5,6] ,根据病原分离和血清学调查结果 ,认为 REV呈世界性分布。REV侵害雏鸡后 ,引起的免疫抑制是该病的主要发病环节 ,是导致感染雏鸡免疫防御能力降低 ,易发其它禽…     

SPF雏鸡感染网状内皮组织增殖病病毒后肿瘤坏死因子的动态变化

采用微量细胞病变法和四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法研究了１日龄ＳＰＦ雏鸡感染网状内皮细胞增殖病病毒（ＲＥＶ）后,免疫器官脾脏肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）诱生活性动态变化。结果表明,雏鸡感染ＲＥＶ后脾脏细胞ＴＮＦ诱生活性极显著增高（Ｐ〈０．０１）,ＴＮＦ诱生活性明显增高与ＲＥＶ在机体各器官内长期大量繁殖紧密相关,并引起各免疫器官严重的变质性变化,以及由于ＴＮＦ高含量的免疫损伤作用而降低机体各免疫器官的机能。     

鸡贫血病雏鸡ND免疫后局部免疫组织抗体生成细胞变化

对感染鸡贫血病毒（ＣＡＶ）雏鸡新城疫（ＮＤ）疫苗免疫及其强毒攻击后局部免疫组织——盲肠扁桃体和哈德尔腺的ＩｇＡ、ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体生成细胞数量的动态变化进行了检测。结果发现,ＣＡＶ感染雏鸡ＮＤ免疫后７、１４、２８ｄ及新城疫强毒（ｖＮＤＶ）攻击后,上述免疫组织的三种抗体生成细胞数量均不同程度地低于未感染ＣＡＶ的ＮＤ免疫对照雏鸡。其中盲肠扁桃体弥散区的ＩｇＡ减少最为明显。表明ＣＡＶ感染雏鸡消化道和呼吸道局部免疫组织对新城疫疫苗的体液免疫应答功能降低。新城疫强毒攻击后ＣＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率也明显低于未感染ＣＡＶ的免疫对照雏鸡。     

雏鸡感染马立克氏病病毒后免疫器官组织抗体生成细胞的变化

以马立克氏病病毒（ＭＤＶ）感染１日龄肉用雏鸡，在感染后５、２５、４５ｄ采取法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体和哈德尔腺，用彩色免疫金银染色法检查免疫器官组织中ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞数量的动态变化。结果：ＭＤＶ感染雏鸡的法氏囊、脾脏和哈德尔腺中以ＩｇＧ抗体生成细胞居多，ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞均较正常对照鸡显著减少；盲肠扁桃体中以ＩｇＡ抗体生成细胞居多，ＩｇＡ、ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体生成细胞数量显著低于正常对照鸡。由此表明，ＭＤＶ感染鸡全身免疫器官和消化道、呼吸道局部粘膜体液免疫机能明显抑制。     

SPF雏鸡感染网状内皮组织增殖病病毒后肿瘤坏死因子的动态变化

本试验采用微量细胞病变法和四甲基偶氮唑盐（ Ｍ Ｔ Ｔ）法研究了 １ 日龄 Ｓ Ｐ Ｆ 雏鸡感染网状内皮组织增殖病病毒（ Ｒ Ｅ Ｖ）后，免疫器官脾脏肿瘤坏死因子（ Ｔ Ｎ Ｆ）诱生活性动态变化。结果表明，雏鸡感染 Ｒ Ｅ Ｖ 后脾脏细胞 Ｔ Ｎ Ｆ诱生活性极明显增高（ Ｐ＜ ０．０１）， Ｔ Ｎ Ｆ诱生活性明 显增高与 Ｒ Ｅ Ｖ 在机体各器官内长期大量繁殖紧密相关，并引起各免疫器官严重的变质性变化，以及由于 Ｔ Ｎ Ｆ高含量的免疫损伤作用而降低机体各免疫器官的机能。     

IBD疫苗免疫SPF雏鸡局部黏膜组织的免疫学变化

应用组织化学染色法和免疫酶组织化学法,研究IBD疫苗免疫SPF雏鸡后,雏鸡哈德氏腺和盲肠扁桃体的T细胞及IgA、IgM和IgG抗体生成细胞数量的动态变化。结果发现,免疫雏鸡上述局部免疫组织的各项免疫指标较对照雏鸡均不同程度地增高,表明疫苗免疫能显著提高雏鸡眼部、消化道局部黏膜免疫功能;IBD强毒攻击后,对照雏鸡上述指标明显低于疫苗免疫雏鸡,且发生典型IBD全部死亡,而疫苗免疫雏鸡免疫保护率达60%。     

SPF雏鸡感染REV后免疫器官免疫功能的动态变化

试验通过对 1日龄 SPF雏鸡人工感染网状内皮组织增殖病病毒 ( REV) ,观察了免疫器官胸腺、法氏囊和脾脏 T、B淋巴细胞增殖反应的动态变化。结果表明 ,雏鸡感染 REV后胸腺 T淋巴细胞的增殖反应于7、2 1、4 2和 4 9日龄明显降低 ( P<0 .0 5) ,于感染后 1 4、2 8和 3 5日龄极显著减弱 ( P<0 .0 1 ) ;脾脏 T淋巴细胞的增殖反应分别于感染后 1 4～ 2 8d和 3 5～ 4 9d较对照组雏鸡明显或极明显降低 ( P<0 .0 5,P<0 .0 1 )。法氏囊和脾脏 B淋巴细胞增殖反应分别在感染后 7～ 4 9d和 1 4～ 4 9d极显著减弱 ( P<0 .0 1 )。免疫器官胸腺重量和脾脏重量与体重比值及体重分别于感染后 7～ 4 9、7～ 3 5、7～ 4 9d明显降低 ( P<0 .0 5,P<0 .0 1 )。说明SPF雏鸡感染 REV后 ,免疫器官 (胸腺、法氏囊和脾脏 )淋巴细胞发生变性坏死、数量减少和功能降低 ,机体的细胞免疫和体液免疫功能均发生明显降低或抑制     

禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织CD4+/CD8+细胞及相关细胞因子表达的影响

旨在探讨禽网状内皮组织增生病病毒（reticuloendotheliosis virus,REV）对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织中T淋巴细胞数量以及相关细胞因子表达的影响。将96只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,应用流式细胞术、酸性α-醋酸萘酯酶染色（acid α-naphthyl acetate esterase,ANAE）、荧光定量PCR等方法对上述指标进行检测。试验数据表明,与对照组相比,感染组雏鸡血液CD4⁺T淋巴细胞数量在第7~35天显著降低、CD8⁺T淋巴细胞数量在第7~28天显著升高,CD4⁺/CD8⁺比值在第7~28天显著降低（均P<0.05或P<0.01）;局部淋巴组织哈德尔腺（Hader’s gland,HG）、派伊尔结（Peyer’s patch,PP）和盲肠扁桃体（caecal tonsil,CT）中ANAE⁺T淋巴细胞数量均显著降低（均P<0.05或P<0.01）;GH、PP和CT中细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α 转录量都有不同程度升高。本研究表明,REV感染引起雏鸡血液中CD4⁺ T淋巴细胞数量降低、CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比例失衡、局部淋巴组织中T淋巴细胞数量相对减少及细胞因子TNF-α转录持续升高与REV造成感染雏鸡细胞免疫功能显著降低密切相关。     

REV感染SPF鸡中白细胞介素18的定量检测

建立并利用鸡白细胞介素18（chicken interleukin-18,ChIL-18）荧光定量RT-PCR方法,对于禽网状内皮组织增生症病毒（reticuloendotheliosis virus,REV）感染SPF鸡后主要免疫器官的IL-18mRNA转录水平进行了初步研究。结果表明,与对照组相比,处理组脾脏、胸腺和法氏囊中IL-18的分泌水平除感染后14d脾脏外,在感染后7,14,21,28,35,42,49d均显著升高（P〈0.05）。本研究为探讨REV感染的免疫抑制机理打下了一定基础。     

鹅源H5N1亚型禽流感病毒感染雏鸡免疫器官的病理学观察

应用组织病理学及超微病理学观察手段对HSN1亚型禽流感毒株感染雏鸡免疫器官的病理学变化进行了系统研究。结果显示，感染雏鸡胸腺、腔上囊及脾均表现不同程度的病理学损伤。表明，禽流感病毒感染可造成雏鸡免疫器官组织损伤，这是导致感染雏鸡免疫功能降低的重要机制之一。     

1株鸡传染性贫血病毒野毒株对不同日龄SPF鸡的致病性

从山东省某商品代肉鸡场表现生长迟缓的20日龄病鸡群分离到1株鸡传染性贫血病毒(CAV)SDLY08株,通过口服和肌肉注射2种途径分别感染1,7,21日龄SPF鸡,12d后检测CAV对SPF鸡体质量、免疫器官和血液指标的影响。结果表明,于3个不同日龄感染后12d,SDLY08株均可导致增重减缓,胸腺显著萎缩,脾脏肿大,同时还可引起白细胞、红细胞数及红细胞压积的显著减少。且1日龄和7日龄鸡易感性大于21日龄鸡,肌肉注射比口服感染组的致病性更强。     

CAV与REV共感染SPF鸡对疫苗免疫反应的抑制作用

用1日龄SPF鸡人工感染鸡贫血病毒(CAV)和禽网状内皮增生病病毒(REV),探讨病毒感染对鸡体疫苗免疫反应的影响。结果表明,在用禽流感病毒(AIV,H5和H9)疫苗免疫后,CAV与REV单独感染均显著抑制了鸡体对H5和H9亚型禽流感病毒灭活疫苗的HI抗体反应,在CAV与REV共感染后,这种抑制作用更为明显。CAV单独感染后鸡体对新城疫病毒(NDV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)疫苗的免疫反应受到抑制,但与对照组在统计学上的差异不显著,然而,CAV可以显著加重REV感染对鸡体在NDV和IBDV疫苗免疫后抗体反应的抑制作用。从而证实CAV与REV共感染在疫苗免疫抑制上有协同作用。     

鹅源H5N1亚型禽流感病毒感染雏鸡免疫器官细胞凋亡的研究

为研究鹅源H5N1亚型禽流感病毒(AIV)人工感染雏鸡免疫器官细胞凋亡的动态变化,本研究将50只1日龄SPF雏鸡随机分为两组。试验组雏鸡于7日龄,分别经鼻、眼、口同时感染105TCID50的鹅源H5N1亚型AIV,分别于感染后3d、4d、5d、7d和14d迫杀,采取胸腺、法氏囊和脾脏,应用TUNEL染色法和透射电镜技术观察其细胞凋亡的动态变化情况。结果显示,试验组雏鸡的胸腺和脾脏凋亡细胞数量在感染后3d～7d极显著高于对照组(p<0.01);法氏囊凋亡细胞数量在感染后3d～4d比对照组明显增加(p<0.05或p<0.01)。组织器官超微结构检测可见凋亡细胞核染色质固缩并凝结成块,聚集在核膜周围,呈新月状或环状;细胞质浓缩。表明鹅源H5N1AIV能够诱导感染雏鸡免疫器官发生细胞凋亡。     

鸡胚中人工感染网状内皮增殖病病毒的检测

为了模仿禽网状内皮增生病毒(REV)垂直感染鸡胚,在1和3日龄的发育SPF鸡胚人工接种不同剂量的REV,并继续孵化至12日龄.在将发育鸡胚制成成纤维细胞单层后,再用抗REV单克隆抗体11B118作间接荧光抗体反应检测REV.结果表明,从所有人工感染REV的鸡胚12日龄制备的成纤维细胞中均能在培养48h检测出REV.该方法可用于检测生产弱毒疫苗的SPF鸡胚及其相应细胞有无REV的污染.