冰灯玉露松散型胚性愈伤组织的诱导方法

为了获得冰灯玉露松散型胚性愈伤组织,采用冰灯玉露组培苗叶片为外植体,在含有不同激素的培养基上,通过不同的继代培养,从中找到诱导出松散型胚性愈伤组织的最适条件。结果显示,在1/2 MS+2 mg·L~(-1) 2,4-D+20 g·L~(-1)蔗糖的培养基上可以诱导出松软的愈伤组织。再将这些松软的愈伤组织转接到MS+1 mg·L~(-1) BA+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上,经过3~5次继代培养,继代培养时选择质地较硬、结构松散的愈伤组织进行转移,最终获得结构松散的愈伤组织。再将这些松散型愈伤组织在MS+2 mg·L~(-1) BA+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上继续培养,经过2~3次继代培养即可获得冰灯玉露松散型胚性愈伤组织。该试验结果可为冰灯玉露离体诱变育种及其相关的科学研究提供良好的试材。     

花椰菜松散型胚性愈伤组织的诱导

本研究采用花椰菜组培苗不同外植体诱导愈伤组织,从中筛选出理想外植体类型;将诱导出的愈伤组织转移到不同培养基上进行松散型愈伤组织的诱导,从中筛选出理想的培养基配方;将诱导出的花椰菜松散型愈伤组织转接到不同的胚性愈伤组织诱导培养基上,找到理想的培养基配方。试验结果表明,选用花椰菜组培苗茎段为外植体,在MS+0.5 mg·L~(-1)BA+1.0 mg·L~(-1)2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上进行愈伤组织诱导,可以获得松散型愈伤组织;在MS+1 mg·L~(-1)BA+1 mg·L~(-1)2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基上通过3～4次继代培养,可以诱导出花椰菜松散型胚性愈伤组织。     

黑莓松散型胚性愈伤组织的诱导

为了诱导出黑莓松散型胚性愈伤组织,试验采用黑莓试管苗叶片、叶柄和茎段为外植体,在含有不同2,4-D及分裂素的MS培养基上进行愈伤组织的初步诱导,从中筛选出松散型愈伤组织的最佳培养基配方;再将诱导出的黑莓松散型愈伤组织转移到含有不同激素种类和浓度的MS培养基上进行松散型胚性愈伤组织的诱导,从中筛选出最佳培养基配方。结果表明,在1/8 MS+3 mg/L 2,4-D+100 mg/L Vc+10 g/L蔗糖的培养基上可以诱导出松散的黑莓愈伤组织;先在MS+2 mg/L 2,4-D+1 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上进行胚性愈伤的诱导继代2~3次,然后转移到MS+0.5 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上继续培养并继代3~5次后即可诱导出黑莓的松散型胚性愈伤组织。试验结果将为采用黑莓体细胞诱变育种研究奠定基础。     

微甘菊愈伤组织的诱导及培养研究

本文试验了微甘菊愈伤组织诱导的影响因素 ,结果表明 :芽尖和嫩茎作为外植体时诱导率较高 ;最适诱导培养基是MS培养基附加激素 2 ,4 -D2 .0mg/L +KTl.0mg/L ,pH值 5 .7;于 2 5± 1℃条件下黑暗诱导。另外优化了微甘菊愈伤组织继代培养条件 :浓度为 5 .0mg·L-1 的抗坏血酸 (Vc)对于微甘菊愈伤组织褐变情况有良好的抑制作用 ;继代培养基中较好的激素组合为 (2 ,4 -D1 .0mg·L-1 +NAA2 .0mg .·L-1 +KT0 .5mg .·L-1 +BA0 .5mg .L-1 ;添加 1 5 %新鲜椰子汁能够明显促进愈伤组织生长 ,而且对褐变有一定的抑制效果。依此反复继代的微甘菊愈伤组织有良好的增殖效果。     

葡萄松散型愈伤组织的培养及其白藜芦醇含量的测定

【目的】获得葡萄(Vitisvini fera L.)松散型愈伤组织,并了解其白藜芦醇含量的变化。【方法】以葡萄的叶、叶柄和茎分别作为外植体,在不同激素组合(6-卞氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)、吲哚丁酸(IBA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D))的培养基(以B5培养基为基本培养基,含30g/L蔗糖和6g/L琼脂)上,进行愈伤组织的诱导和继代培养,并利用高效液相色谱法(HPLC)对不同来源愈伤组织中的白藜芦醇含量进行测定。【结果】以葡萄叶为外植体时,诱导的愈伤组织出愈率很低;以叶柄和茎为外植体时,愈伤组织的出愈率均较高。利用叶柄和茎获得松散愈伤组织时,其诱导培养基组成分别是:B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L和B5培养基+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L,其继代培养基均为B5培养基+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.1mg/L。在诱导培养基产生的愈伤组织中,白藜芦醇含量由高到低的顺序为叶柄>叶>茎。以叶、叶柄和茎为外植体诱导愈伤组织时,其白藜芦醇含量最高的培养基分别为B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L、B5培养基+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L和B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L。【结论】葡萄叶柄和茎易被诱导产生松散的愈伤组织,且经多次继代可以用于建立悬浮培养体系;葡萄愈伤组织中的白藜芦醇含量随外植体及培养基组成的不同而有所差异。     

绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织的诱导

以绒毛白蜡组培苗茎段为外植体,建立绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织诱导体系,为绒毛白蜡遗传转化与离体诱变等研究奠定基础。试验结果显示：幼嫩茎段在WPM+0.5 mg·L^-12,4-D+5 mg·L^-1GA₃+30 g·L^-1蔗糖的培养基上可诱导出理想的松散型愈伤组织;将松散型愈伤组织在MS+0.5 mg·L^-12,4-D+1.0 mg·L^-1KT+30 g·L^-1蔗糖的培养基上继代培养,每15 d继代1次,继代时选择结构松散质地较硬的愈伤组织,3次继代培养后,可获得绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织。     

萝卜诱导愈伤组织的影响因素

以萝卜种子为试材,研究了不同外植体、不同激素、不同激素浓度及继代培养对萝卜外植体形成愈伤组织的影响.结果表明:(1)诱导萝卜愈伤组织最好的外植体为子叶.(2)不同的生长素诱导效果不同,诱导效果为NAA＞2,4-D＞IBA;(3)萝卜子叶和下胚轴诱导愈伤组织的最佳初代培养基均为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂.(4)继代培养能促进愈伤组织的形成,子叶和下胚轴的最佳继代培养基分别为:MS+6 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂和MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂.     

萝卜诱导愈伤组织的影响因素

以萝卜种子为试材,研究了不同外植体、不同激素、不同激素浓度及继代培养对萝卜外植体形成愈伤组织的影响。结果表明:(1)诱导萝卜愈伤组织最好的外植体为子叶。(2)不同的生长素诱导效果不同,诱导效果为NAA>2,4-D>IBA;(3)萝卜子叶和下胚轴诱导愈伤组织的最佳初代培养基均为MS 3 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂。(4)继代培养能促进愈伤组织的形成,子叶和下胚轴的最佳继代培养基分别为:MS 6 mg/L6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂和MS 4 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂。     

一种适于小麦愈伤组织诱导与继代培养的培养基

培养基是植物离体培养体系中最能体现人为调控作用的因素.N6培养基的出现曾极大地推动了禾本科植物组织和花药培养的进步,并且至今仍在许多重要作物组织及细胞培养中发挥着重要作用.     

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究

以玉米自交系87-1、郑22、齐319、昌7-2和杂交种齐319×HiⅡA、齐319×87-1、郑22×87-1、昌7-2×HiⅡA等的幼胚为外植体诱导愈伤组织,研究了玉米不同基因型对愈伤组织诱导和继代的影响。结果表明,不同基因型的胚性愈伤诱导率、继代能力有着显著差异。郑22×87-1胚性愈伤诱导率为83.86%,而昌7-2×HiⅡA胚性愈伤诱导率为41.15%,相差很多。但在继代能力上由于昌7-2×HiⅡA高度松散,具有明显的颗粒状,其继代扩繁能力明显高于郑22×87-1,这说明胚性愈伤诱导率和继代繁殖能力之间没有必然的联系,昌7-2×HiⅡA繁殖能力强,是最好的组培材料。自交系中只有87-1诱导出较好的Ⅱ型愈伤组织,但诱导率比较低。刚诱导出的愈伤组织比较坚硬,经过3～4次继代后,愈伤组织生长旺盛,色泽鲜亮,增殖快,是进行基因转化的最好时期。     

核桃子叶胚性愈伤组织的诱导

用正交设计法研究了不同植物生长调节剂处理对核桃子叶胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明,植物生长调节剂影响核桃子叶胚性愈伤组织诱导的因素大小为6-BA>KT>IBA,其最佳诱导培养基为DKW+6-BA 1.3 mg/L+KT 2.2 mg/L+IBA 0.02 mg/L。     

瓜尔豆胚性愈伤组织诱导的初步研究

瓜尔豆子叶和下胚轴为外植体 ,采用均匀设计试验 ,研究了基本培养基、激素水平、蔗糖浓度和活性炭对愈伤组织诱导率的影响。结果表明 :瓜尔豆子叶愈伤诱导率高于下胚轴 ;黑皮型瓜尔豆子叶愈伤诱导率高于白皮型 ;2 ,4 D浓度与愈伤组织的诱导率成正相关 ,且与外植体有很强的交互作用。     

南丰蜜橘胚性愈伤组织诱导及其转化研究

南丰蜜橘是原产于中国的古老柑橘品种,其果实皮薄而内甜,深受消费者喜爱,当前南丰蜜橘的品质发生劣变,影响了其商品价值.为采用基因工程育种以改善南丰蜜橘品质,通过诱导其愈伤组织并以其为试材进行了转基因研究.南丰蜜橘自种子实生苗下胚轴处长产生出愈伤组织,挑选胚性愈伤组织进行增殖后,采用根癌农杆菌介导法进行开花相关基因AP1的转化.结果获得22团抗性愈伤组织,平均产出率为7.3团/皿,表明该品种有较高的转化率.抗性愈伤组织经PCR分析、Southern blot检测证实为转化子.研究结果表明南丰蜜橘胚性愈伤组织是基因工程改良的良好受体,可用于其他基因的转化研究.     

超甜玉米胚性愈伤组织诱导体系的建立

以超甜玉米自交系S1和品种粤甜3号为材料研究了影响愈伤组织诱导和胚性形成的几个关键因素。结果表明,2种基因型都是高诱导力的材料,自交系S1能够诱导出高质量的Ⅱ型胚性愈伤,是理想的基因转化材料。2,4-D浓度为2 m g/L时,2种基因型出愈率和胚性愈伤率达到最高,胚性愈伤率分别达到45.88%和35.00%;在培养基中添加9 m g/L的A gNO3极显著地提高了胚性愈伤率,比对照提高了31.25%;添加700 m g/L的脯氨酸,胚性愈伤率显著地提高了12.41%。据此建立了高效稳定的超甜玉米转基因胚性愈伤组织诱导体系。     

荔枝花药胚性愈伤组织诱导及倍性检测

探讨了影响荔枝花药胚性愈伤组织诱导的因素,通过2,4-D、KT、NAA三因子的正交试验筛选出荔枝花药胚性愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂组合为2.0mg/L2,4-D 2.0mg/LKT。在探讨不同基因型对诱导率影响的基础上,利用流式细胞仪对不同基因型胚性愈伤组织进行了倍性检测。结果表明,不同基因型荔枝花药胚性愈伤组织诱导率存在显著差异,胚性愈伤组织倍性检测结果也不同。     

栓皮栎胚性愈伤组织诱导及增殖体系的建立

由栓皮栎1个月生的实生苗上采集幼叶和茎段做为外植体诱导胚性愈伤组织.结果表明,NAA和BA结合使用(茎段和带叶柄的叶片:1.0～2.0 mg·L-1NAA+0.5 mg·L-1BA;不带叶柄的叶片:2.0～4.0 mg·L-1NAA+1.0 mg·L-1BA)诱导的愈伤组织质量好,胚性愈伤组织较多,增殖能力强.2,4-D和KT结合使用(最适配比为:1.0 mg·L-1 2,4-D+1.0 mg·L-1 KT),虽然诱导时间短,诱导率高,但是愈伤组织质量差,多呈水煮样组织,胚性愈伤组织少并且增殖能力差.最优     

甜玉米成熟胚愈伤组织的诱导及植株再生特性的评价

以45种基因型甜玉米的成熟胚为外植体材料,分析出愈率、愈伤组织增殖量、芽点数与植株再生的关系.结果表明,出愈率与再生能力有较大的相关性,愈伤组织增殖量、芽点数次之.利用主成分坐标分析并在此基础上对不同基因型甜玉米的再生能力进行聚类,并按欧氏距离将45种不同基因型玉米划分为2个大组群.通过对不同基因型玉米成熟胚培养特性的分析,探讨了各指标对于植株再生的意义,从供试材料中筛选出了愈伤组织诱导率和绿苗分化率均较高的材料,如选系B12-2-2和A50.