离本培养橡胶树体细胞诱导纯多倍性无性系方法的研究初报

研究结果表明，用０．５％的秋水仙素处理橡胶树二倍体花劳逸结合本细胞愈伤组织（浸泡或滴渍）１ｄ可有效地从多倍性的细胞再分化成多倍性胚状体并再生植株。所诱导培育获得的多倍胚状体及植株，通过细胞学鉴定表明具有多倍体表型特征的，其体细胞染色体数为２ｎ＝７２，未见嵌合现象，对照的２ｎ＝３６。     

巴西橡胶树自根幼态无性系耐低温分析

为比较橡胶树新型种植材料——自根幼态无性系与同源老态芽接无性系的耐低温能力,本研究将1蓬叶稳定的热研7-33-97老态芽接苗和自根幼态无性系苗5 ℃低温处理后,测定叶片的相对电导率、可溶性糖含量和游离脯氨酸含量等生理指标,并进行叶片受害调查。结果显示,自根幼态无性系叶片相对电导率低于老态芽接苗,可溶性糖含量和游离脯氨酸含量均高于老态芽接苗。此外,对5 ℃处理4 d后叶片受害情况调查发现,自根幼态无性系大部分叶片未受害,而老态芽接苗叶片几乎全部干枯或脱落。因此,室内低温模拟实验表明,自根幼态无性系在耐低温能力方面较老态芽接无性系更强,这为自根幼态无性系的生产应用提供了更广阔的前景。     

甜叶菊多倍体离体诱导技术体系的建立

以甜叶菊茎段为外植体,用不同浓度的秋水仙素在试管苗茎段再生植株过程中进行不同时间处理,探讨适合于甜叶菊离体多倍体诱导的最佳秋水仙素处理时间和浓度,初步建立甜叶菊离体诱导多倍体的技术体系。结果表明,秋水仙素对甜叶菊植株形成影响较大,秋水仙素处理的最佳剂量为0.1%处理3 d,再生植株总数高且多倍体比率达42.3%;同时,再生苗生根也受到了一定影响;多倍体苗叶片厚实、颜色较深、植株矮化,气孔增大,单位面积气孔数较少;多倍体细胞核体积增大,染色体数加倍。     

巴西橡胶树的次生体细胞胚胎发生—— 一种新的长期性体细胞胚胎发生诱导方法

在橡胶树中，以未成熟种子的内珠被为外植体通过其胚性愈伤组织的继代增殖可以持续不断地诱导体细胞胚胎，该方法称为持久体细胞胚胎发生(Maintained Somatic Embryogenesis，MSE)。然而，直接利用内珠被组织诱导易碎型胚性愈伤组织系不但频率很低，而且迄今仅无性系PB260和RRIM703能够藉此途径实现体细胞胚胎的长期诱导。本研究以体细胞胚胎为外植体成功诱导和建立可增殖胚性愈伤组织系。组织学分析显示，体胚外植体切口边缘表皮及周维管细胞脱分化导致易碎型胚性愈伤组织的产生。所获愈伤组织经继代增殖和筛选最终得以建立胚性愈伤组织系。该新方法被称为间接次生体细胞胚胎发生(Indirect Secondary Somatic Embryogenesis，SSE)。我们还就体胚及内珠被2种外植体诱导胚性愈伤系的潜力进行了深入比较。结果表明，采用体胚外植体诱导胚性愈伤组织系其频率明显高于内珠被外植体。除了PB260和RRIM703之外，我们通过SSE途径还成功建立了无性系PB217的胚性愈伤组织系，而该无性系之前一直难以用MSE法获得其胚性愈伤系。此外，采用SSE法建立胚性愈伤系所需继代培养的次数也大为减少。对于不少仅实现初生体细胞胚胎发生的无性系而言，该方法无疑为其长期性体胚发生的诱导开辟了一条新的途径。     

亚麻体细胞无性系的建立及其植株再生

以亚麻无菌苗（７－１０天培养）切取的茎尖和下胚轴作为外植株，分别接种于Ｎ６、Ｂ５基础培养基，均附加ＩＡＡ４ｍｇ／Ｌ、ＫＴ２ｍｇ／Ｌ和ＬＨ２００ｍｇ／Ｌ，经过四个星期的离体培养，获得具备不定苗发生能力的愈伤组织，诱导率平均达９４．２％。然后把它们转移至继代培养基中进行再分化培养，培养得到绿苗及胚性愈伤组织，分化频率平均达６．３倍。切取下的绿苗植于改良后的Ｂ５培养基上进行生根培养，生根率达９０％以上。     

橡胶树新种植材料——自根幼态无性系

大田试验结果表明:橡胶微繁无性系离地50cm处平均茎围为对照(老态的供体无性系)的130.3%,花药体细胞植株离地50cm处平均茎围为对照(老态的供体无性系)的109.1%~120.2%,头4 a平均单株干胶产量为对照的129.9%~146.3%,自根幼态无性系和供体无性系相比,这2个性状均达显著差异。说明橡胶自根幼态无性系是一种速生、高产的种植材料。      

橡胶树幼态与老态无性系间的MSAP分析

利用MSAP技术,检测橡胶树热研8-79幼态无性系与老态无性系DNA甲基化差异。结果表明,幼态无性系的DNA甲基化水平为33.2%,老态无性系的DNA甲基化水平为22.9%,两者基因组DNA甲基化水平有一定差异,而且DNA甲基化模式也不同。对部分差异片段经同源性比对分析可知,同源序列的功能主要与代谢、细胞生长相关。这些差异可能是导致橡胶树幼态与老态无性系间性状差异的原因。     

亚麻体细胞无性系的建立及其植株再生

以亚麻无菌苗（7—10天培养）切取的茎尖和下胚轴作为外植株，分别接种于N6、B5基础培养基，均附加IAA4mg／L、KT2mg／L和LH200mg／L，经过四个星期的离体培养，获得具备不定苗发生能力的愈伤组织，诱导率平均达94．2％。然后把它们转移至继代培养基中进行再分化培养，培养得到绿苗及胚性意伤组织，分化频率平均达6．3倍。切取下的绿苗植于改良后的B5培养基上进行生极培养，生根率达90％以上。对成活的204株再生植株进行三个世代的连续观察，获得雄性不育体、感病、矮杆等广泛的性状变异。     

水稻体细胞离体辐射诱变的早熟效应

以原丰早、广陆矮4号、桂朝2号等23个品种的5532份再生植株的后代及其对照品种的实生苗为材料进行试验。愈伤组织进行60Co-γ辐射处理,诱导再生的植株在正常季节种植于大田,考查抽穗期等项目。结果表明,各品种的熟性通过组织培养都有较高的变异频率,早熟株系所占比例因品种而异。水稻愈伤组织通过离体辐射后,再生植株后代的生育期有明显的变异,早熟株系的百分率比未辐射处理的有明显提高,而且随辐射剂量的增加而增加。通过大田选择,从5千伦处理的株系中获得两个比Basmati 370早熟15天的优良株系。     

小麦幼穗离体培养初步研究

小麦幼穗离体培养初步研究刘思衡，康水英，连秀叶，巫升鑫，郭玉春（福建农业大学农学系福州３５０００２）八十年代以来，我国小麦以幼胚、幼穗和成熟胚离体培养筛选拉赤霉病细胞突变体的研究日益增多，并逐渐形成生物技术育种的新体系（欧阳闻俊１９９０，吴志风等１９...     

橡胶树体细胞胚发生的最新进展

对近年来橡胶树体细胞胚发生(包括组织培养、转基因研究、分子生物学和发育生物学)的最新研究进展进行阐述,并对其存在问题和应用前景进行分析和探讨。     

橡胶树优良品种IAN873在云南的适应性

通过对国外橡胶树优良品种IAN873在西双版纳24年适应性观察研究,结果表明：该品种生长快,开割前年均增粗5.65cm,高于对照RRIM600（5.06cm）10.67%;林相整齐,开割时平均茎粗50.5cm,开割率80.2%,分别比对照高2.8cm和10.4%;产胶量中等,1-16割年平均干胶产量1 310kg/hm2,为对照RRIM600（1 969kg/hm2）的66.55%;年平均单株产量为4.0kg,略低于对照RRIM600（4.2kg/年.株）0.2kg;抗辐射寒害能力中等偏下,抗寒力小于GT1,但较RRIM600强;耐割性强,割胶16年后死皮发病率为15.79%,病指14.95,分别比对照（28.79%、27.58）轻13个百分点和12.63。     

橡胶树热垦628品种区域试验结果

以橡胶树胶木兼用型品种作为选育种的目标，通过对海南、云南、广东3个区域试验点适应性试种的热垦628的系统观测，结果表明，热垦628生长快，优于速生品种IAN873；抗平流型寒害强，优于或相当于抗寒品种GT1，比云研77-4及IAN873略差；抗风性好，优于或相当于抗风品种PR107；白粉病抗性好，优于GT1，炭疽病的发病率较低，抗至中感；试开割时干含较高，产量优于PR107及GT1，整体表现出了速生、产量高、抗逆性好的特性及良好的适应性，是具很大推广应用价值的胶木兼优品种。     

橡胶树花药愈伤组织继代培养与胚状体发生能力研究

利用橡胶树花药愈伤组织进行继代培养与胚状体诱导,结果表明,在诱导愈伤组织、继代培养和分化胚状体中MS培养基稍优于改良MS培养基;以继代1代的愈伤组织胚状体的诱导率最高,分别达到70．8％和67．5％;在继代0代、2代和3代之间差异达到极显著,在继代4代时差异达到显著,其他继代次数之间差异不显著。在继代8代后,两种培养基的诱导率逐渐升高,分别达到44．6％和35．3％。     

橡胶树次生体胚植株染色体数目和DNA含量分析研究

遗传稳定是离体繁殖植物种苗的关键。本研究利用染色体制片和流式细胞术，对1～10个增殖世代的次生体胚植株的染色体数目及DNA含量进行了分析，发现1～10个增殖世代的次生体胚植株染色体数目以2n＝36为主，且DNA含量与芽接无性系相同，说明1～10个增殖世代的次生体胚植株在染色体水平保持遗传稳定。     

橡胶树胶木兼优引进品系热试21高级系比试验初报

橡胶树品系热试21是引种的胶木兼优品系,经过10 a的高级系比区试种试验,综合表现突出:开割前离地1.5 m处树围平均增粗8.72 cm,极显著高于对照(RRIM600);开割后3割年间的平均年干胶产量2.22 kg/株和1 012.05 kg/hm2,分别比对照高55.24%和146.04%;在2008年寒害中寒害级别低于对照,10 a累计风害断倒率低于对照;第3割年末死皮停割率为3.0%,比对照高1.2个百分点,无显著差异。根据该品种特性,建议在相似类型植胶环境扩大试验试种面积。     

橡胶树内生真菌分离方法研究

以同一株橡胶树的枝条和叶片为材料,采用5种不同的组织表面消毒方法，在加入3种不同细菌生长抑制剂的PDA培养基中培养橡胶树内生真菌。结果表明，在加入Rifamicin 15 mg/L的PDA培养基中，运用M2培养分离效果最佳。     

橡胶树多倍体诱导机制和途径

多倍体育种作为橡胶树育种的重要手段，曾引起育种工作者的广泛关注并进行了大量研究。本文从获得橡胶树多倍体的机制和途径方面总结前人的研究成果；讨论橡胶树多倍体育种面临的问题；提出橡胶树多倍体育种的研究方向，为橡胶树多倍体育种工作提供理论帮助。     

3个橡胶树引进品种的胶乳生理特性研究

以3个橡胶树引进品种为研究对象,‘热研73397’和‘RRIM600’为对照,测定胶乳产量、干胶含量、排胶初速度及胶乳中蔗糖、无机磷、镁离子和硫醇等生理参数,比较分析不同品种的产排胶特性。结果表明,各测定参数在品种间存在较大差异。‘热试09-5’干胶产量高,蔗糖含量、排胶初速度低于‘热研73397’,干胶含量、硫醇含量、无机磷含量差异不显著,认为该品种产胶潜力大,胶乳稳定性好,排胶快,糖利用率高;‘热试09-6’干胶产量一般,与‘RRIM600’相比,干胶含量、堵塞指数高,排胶初速度和蔗糖含量差异不显著,认为该品种有较好的产胶潜力,但胶乳代谢强度低,可考虑通过刺激提高代谢强度,达到增产;‘热试09-7’干胶产量低,与‘RRIM600’相比,干胶含量高,排胶初速度低,蔗糖含量相当,认为该品种排胶障碍,糖的利用效率低,是否可以通过刺激割胶增加产量还需要进一步的试验验证。     

温度对橡胶树微型芽条培育的影响

以橡胶树优良品系云研73-477花药组培试管苗的茎尖、茎段和基部为外植体,进行不同温度条件下微型芽条培育的比较试验,结果表明：外植体在昼温28℃,夜温26℃的平均不定芽数在1.50个以上,萌生枝较健壮,枯顶较少,培养效果优于其他处理。