甘草多糖对小鼠脾淋巴细胞的免疫作用

通过体外脾淋巴细胞的培养试验,测定不同浓度的GPS对淋巴细胞的能量代谢水平和IL-2活性的影响.结果表明,添加GPS能明显增强淋巴细胞的能量代谢水平和IL-2的分泌量(P＜0.01),在添加浓度为300 μg/ml时,基本上达到阳性对照组的水平(P＞0.05),再继续增加浓度,测定结果没有明显的差异.表明GPS能诱导激活淋巴细胞,提高其能量代谢水平和IL-2的分泌,具有免疫调节作用.     

药用菌发酵液多糖对脾淋巴细胞的增殖作用

对3种药用真菌发酵液多糖进行小鼠脾淋巴细胞增殖试验,结果表明:3种药用真菌发酵液多糖对小鼠脾细胞具有增殖作用,但与剂量存在依赖关系。最适剂量赤芝发酵液多糖100μg/mL、蝉花菌发酵液多糖400μg/mL、硫磺菌发酵液多糖50μg/mL。     

半枝莲多糖的纯化及对S180小鼠体内抗肿瘤的作用

初步探明半枝莲多糖的纯化方法及其对动物体内的抑瘤作用.通过Sevag法纯化半枝莲多糖,并采用苯酚-硫酸法测定多糖含量;动物移植性肿瘤实验观察半枝莲多糖对小鼠体内肿瘤细胞生长和免疫器官胸腺、脾的影响.研究结果,多糖含量提高到49.99％,对S180肉瘤生长的抑制率以中剂量为佳,各剂量组均对脾脏指数有显著性差异,大剂量注射(200mg/kg),对胸腺有抑制作用.Sevag法处理后的纯多糖含量与粗多糖中的多糖含量相比有明显差异,该法切实可行.半枝莲多糖对S180小鼠有抗肿瘤作用和免疫增强效果.     

山豆根多糖对小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响

为探讨山豆根多糖对地塞米松诱导的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响,通过腹腔注射地塞米松建立小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡模型,并采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和流武细胞术进行观察和检测.结果表明,除空白对照组外,其余各组的琼脂糖凝胶电泳图均出现梯状条带,而且透射电子显微镜观察凋亡对照组和不同剂量山豆根多糖组均可见典型的凋亡特征,胸腺和脾脏淋巴细胞的胞核染色质凝聚呈半月形、C形及凋亡小体,可见巨噬细胞吞噬凋亡小体.流式细胞仪分析显示,不同剂量山豆根多糖组凋亡率与凋亡对照组凋亡率比较有显著性差异(P＜0.01),且随着山豆根多糖剂量增大,凋亡率降低,山豆根多糖腹腔注射剂量为400mg/kg时凋亡率最低,表明山豆根多糖剂量为50～400mg/kg时对地塞米松诱导的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡有明显的抑制作用.     

半枝莲多糖的纯化及抗肿瘤作用的体内实验研究

初步探究半枝莲多糖的纯化方法及其对动物体内的抑瘤作用。通过Sevag法纯化半枝莲多糖,并采用苯酚-硫酸法测定多糖含量;动物移植性肿瘤实验观察半枝莲多糖对小鼠体内肿瘤细胞生长和免疫器官—胸腺、脾的影响。多糖含量提高到49.99%;对S180肉瘤生长的抑制率以中剂量为佳;各剂量组均对脾脏指数有显著性差异,但大剂量注射(200 mg/kg),对胸腺有抑制作用。Sevag法处理后的纯多糖含量与粗多糖中的多糖含量相比有明显差异,该法切实可行;半枝莲多糖对S180小鼠有抗肿瘤作用和免疫增强作用。     

白蔹多糖的分离纯化及其对小鼠脾细胞增殖的影响

[目的]分离纯化白蔹多糖,研究白蔹均一多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[方法]采用水提醇沉法提取白蔹多糖,通过三氯乙酸法脱除蛋白,用中空纤维超滤膜和DEAE Cellulose DE-52对白蔹多糖进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱法鉴定纯度并测定分子量,PMP柱前衍生化测定单糖组成,采用MTT法测定均一多糖对Con A和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[结果]PAJM-A均一多糖分子量为1.29×105u,由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(Glc A)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xly)组成,其物质的量比为1.36∶1.87∶2.02∶1.58∶1.04,均一多糖对Con A诱导的T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞有较显著的增殖作用。[结论]PAJM-A是一种新的白蔹均一多糖,并与Con A、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用。     

灰树花多糖对甲醛中毒小鼠淋巴细胞的干预作用

[目的]观察灰树花多糖对甲醛中毒小鼠淋巴细胞的干预作用。[方法]取3周龄小鼠,腹腔注射生理盐水和不同浓度的灰树花多糖,10d后制作甲醛中毒模型,正常对照组不作任何处理。利用淋巴细胞计数测定淋巴细胞的数目,利用流式细胞仪检测淋巴细胞的凋亡。[结果]生理盐水组小鼠淋巴细胞数目降低,淋巴细胞凋亡率升高,中、高剂量灰树花多糖组淋巴细胞的损伤明显减轻,与生理盐水组的差异有统计学意义（P〈0．01）。[结论]灰树花多糖对甲醛中毒小鼠淋巴细胞有保护作用。     

纯化前后半枝莲多糖的药效学研究

采用Sevage法纯化半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)多糖,并通过苯酚-硫酸法测定多糖含量;进行急性毒性试验考察半枝莲多糖对小鼠的毒性;通过体内移植肿瘤试验测定不同剂量纯化前后半枝莲多糖对小鼠S180瘤的抑制作用.纯化后半枝莲多糖的纯度为49.99％;急性毒性试验表明800 mg/kg及以下剂量半枝莲多糖对小鼠无毒.纯化后半枝莲多糖的抑瘤率低于半枝莲粗多糖,100 mg/kg半枝莲粗多糖的抑瘤率为46.85％.     

姬松茸液体发酵各组分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).     

树舌荧光多糖的制备及在小鼠脾淋巴细胞中的定位

为确定树舌多糖在小鼠脾淋巴细胞上的定位,应用胺化还原法在树舌多糖(GAP)的还原性末端连接异硫氰酸荧光素(FITC),用荧光分光光度计测定其荧光取代度,xCELLigence RTCA DP全自动实时细胞分析仪检测GAP荧光标记前后生物学稳定性.流式细胞仪检测小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞中的GAP荧光强度,荧光显微镜观察GAP在小鼠脾淋巴细胞中的定位.结果显示:在荧光标记GAP (FITC-GAP)前后的细胞毒活性不变,并且其荧光取代率为0.90％;流式细胞仪检测发现小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞上的荧光信号强度与FITC-GAP加入量成正相关,荧光显微照片显示GAP定位于小鼠脾淋巴细胞表面并可转运至细胞核.     

槲皮素对肉鸡脂肪细胞环腺苷酸信号通路的作用

【目的】研究槲皮素对肉鸡脂肪细胞甘油三酯沉积过程中环腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）信号通路的作用。【方法】将脂肪细胞随机分5组,每组6个重复;空白对照组为基础培养液,溶剂对照组为含2‰二甲基亚砜（DMSO）的培养液,试验组为含10、20和40 mg•L-1槲皮素的培养液,分别于24、48和72 h收集细胞及培养液;ELISA法测定乙酰CoA羧化酶（acetyl CoA carboxylase,ACC）、脂肪酸合成酶（fatty acid synthase,FAS）、脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）、cAMP、腺苷酸环化酶（adenylate cyclase,AC）、磷酸二脂酶（phosphodiesterase,PDE）、蛋白激酶（protein kinase A,PKA）含量;紫外分光光度计测定甘油三酯（triacylglycerides,TG）含量。【结果】与空白对照组相比,①溶剂对照组各指标均无显著差异（P＞0.05）;②20和40 mg•L-1槲皮素组ACC、FAS、LPL、TG和PDE含量显著降低（P＜0.05）,cAMP和PKA含量显著增加（P＜0.05）;③3个槲皮素组AC含量均无显著差异（P＞0.05）。【结论】一定剂量槲皮素可通过调控cAMP信号通路抑制脂肪合成,并减少脂肪沉积。     

环腺苷酸对山羊乳腺上皮细胞增殖的影响

为研究环腺苷酸 (c AMP)对乳腺上皮细胞增殖的影响 ,建立了山羊乳腺上皮细胞培养体系。将细胞分为 8个组 ,分别用 1× 10 ,1× 10 2 ,1× 10 3,1× 10 4 ,1× 10 5,1× 10 6 ,1× 10 7pmol/ m L c AMP刺激细胞 ,从中选出效果明显、组间差异显著的 2组作为试验的高剂量组 (1× 10 7pm ol/ m L)和低剂量组 (1× 10 6 pm ol/ m L)。从细胞群体倍增时间、细胞生长曲线和细胞分裂指数 3个方面研究了 c AMP对山羊乳腺上皮细胞增殖的影响。结果表明 ,低浓度的 c AMP有促进细胞增殖的作用 ,高浓度 c AMP有抑制细胞增殖的作用。     

怀山药—怀地黄对药多糖对小鼠淋巴细胞增殖的影响

探讨怀山药—怀地黄对药多糖对小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的影响。首先采用MTT法测定怀山药—怀地黄多糖、怀山药多糖、怀地黄多糖对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度,然后,在各多糖安全浓度范围内,用MTT法测定三种多糖对健康和免疫抑制小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明,怀山药-怀地黄多糖、怀山药多糖、怀地黄多糖均具有一定的促进淋巴细胞增殖作用,具有一定的浓度依赖性,综合比较,三种多糖增强小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的作用顺序为:怀山药—怀地黄多糖怀山药多糖怀地黄多糖。结论,怀山药—怀地黄对药多糖增强小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的作用优于其单一中药。     

半枝莲组织培养技术研究

药用植物半枝莲是一种应用范围广使用量大和药效功能多的传统中药,近年研究表明其还具有良好 的抗肿瘤作用,研究了不同激素及添加量对半枝莲继代培养和生根培养的影响,结果表明院不同的细胞分裂素和生 长素比例对半枝莲继代培养的影响不同半枝莲继代培养最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+IAA 0.2 mg/L,不同的细胞分裂素和生长素比例对半枝莲根的生长影响也不同,半枝莲壮苗生根最适培养基为1/2MS+ NAA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L。     

4种中药多糖对猪脾淋巴细胞增殖的影响

为筛选免疫活性较好的中药多糖和研制新型猪用免疫增强剂,用MTT比色法比较了不同浓度的板蓝根多糖(IRPS)、牛膝多糖(ABPS)、山药多糖(CYPS)和黄芪多糖(APS)等4种中药多糖对猪脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明,IRPS,ABPS,CYPS,APS均能显著刺激ConA或LPS诱导的猪脾淋巴细胞增殖(P<0.05),且4种多糖促进猪脾淋巴细胞增殖的作用与多糖浓度有关。     

肌醇脂质和cAMP在血小板活化因子诱导血小板聚集中的作用

目的：探讨肌醇脂质和cAMP两个细胞内第二信使系统在血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集过程中所起到的作用和相互关系。方法：采用PKC激动剂PMA和Ca^2 通道A23187,以及PKA激动剂Sp-cAMPS和抑制剂Rp-cAMPS干预的方法,分析观察这两个信使系统在PAF诱导血小板聚集过程中的作用;采用^3H—Inositol和^14C-Adenine双标记液体闪烁技术测定PAF诱导血小板可逆聚集过程中肌醇-1,4,5-三磷酸酯(IP3)和cAMP的水平变化的方法,分析研究这两个信使系统在PAF诱导血小板聚集过程中的相互关系。结果：(1)PMA和A23187能分别增强PAF的血小板聚集效应,而且两者具有协同作用;(2)Rp-cAMP和Sp-cAMPS两者本身都不能引起血小板聚集,但能分别增强和抑制PAF的聚集效应;(3)IP3和cAMP的水平变化分别与血小板的聚集和解聚过程一致。结论：(1)肌醇脂质信使系统是细胞内转导PAF诱导血小板聚集的主要胞内信使系统。(2)降低血小板内cAMP浓度不能诱导聚集,但能增强肌醇脂质信使系统的聚集效应;升高cAMP水平能拮抗肌醇脂质信使系统的作用,这可能是使可逆相聚集的血小板解聚的一个重要机制。     

持续游泳训练对大鼠杏仁核cAMP浓度的影响

采用大鼠环磷酸腺苷cAMP ELISA法,检测持续游泳训练后大鼠杏仁核cAMP浓度变化,以探讨运动应激引起机体反应的机制。结果表明,持续游泳训练后,除1 h时cAMP浓度显著低于对照组外(P0.01),即刻、0.5 h、2 h大鼠杏仁核cAMP浓度均显著高于对照组(P0.05);训练后即刻,大鼠杏仁核cAMP浓度快速升高,至0.5 h时达到最高值,之后1 h时cAMP浓度急剧下降,2 h时其浓度回升,高于对照组的水平,随后4 h时下降至略低于对照组水平,但差异不显著。整个浓度变化曲线呈锯齿形。持续游泳训练后杏仁核cAMP浓度变化具有时相性;持续游泳训练可激活大鼠杏仁核环磷酸腺苷(cAMP)通路,进而影响机体的后续反应。     

冬枣环磷酸腺苷微波辅助萃取工艺研究

研究了利用微波辅助萃取(Microwave-assisted extraction,MAE)冬枣中环磷酸腺苷(cAMP)的新方法。以HPLC定量测定所萃取的环磷酸腺苷。采用正交试验考察浸泡时间、处理时间、微波功率和料液比对环磷酸腺苷提取率的影响,确定了最佳工艺条件为:微波功率200 W、浸泡时间6 h、处理时间3 min、料液比1∶20。