病毒感染对I型和Ⅱ型细胞凋亡影响的研究

细胞凋亡是多基因严格控制的过程如Bcl-2家族、胱冬酶家族、c-myc、P53等。随着分子生物学技术的发展,人们对多种细胞凋亡的过程有了相当的认识,但是病毒家族对机体感染过程中对凋亡发生和抑制的过程确切机制尚不完全清楚。该研究将集中阐述与经典的细胞凋亡和副凋亡相关的信号转导途径和病毒蛋白参与其中的多种调节因子的作用机理。     

bcl-2基因对栗疫病菌细胞凋亡影响的初步研究

Bcl-2家族蛋白是目前已知的细胞凋亡中最重要的调控因子,在细胞凋亡通路中起着重要的调节作用.本研究通过把外源bcl-2基因转入栗疫病菌中,采用RT-PCR的方法检测bcl-2基因在栗疫病菌株中的表达情况,对表达bcl-2基因的转化子及野生型的菌株进行病毒传递率和致病性测定.结果表明:表达bcl-2基因的转化子表现出病毒传递率提高、致病性增强等一系列特征.由此可知:bcl-2基因对栗疫病菌细胞凋亡起调节作用,并对病菌的生物学特征有一定影响.     

低浓度紫杉醇诱导A549细胞凋亡研究

采用0、1．5、3、6nmol／L紫杉醇处理A549细胞,建立低浓度紫杉醇诱导非小细胞肺癌凋亡模型．分别采用流式细胞术、细胞计数和免疫印迹法分析细胞凋亡、细胞增殖和Bcl-2家族凋亡相关分子的表达。结果表明,低浓度紫杉醇以浓度和时间依赖的方式诱导细胞凋亡并上调Bim分子表达,而对Bcl-2家族其他凋亡相关分子无显著影响。     

细胞凋亡的研究进展及其在农业上的应用

细胞凋亡是生物体生长发育、细胞分化和病理条件下主动的、有序的死亡过程。通过对线虫、哺乳动物和植物的凋亡研究发现，保守的Asp特异性半胱氨酸蛋白酶家族是细胞程序性死亡的介导者和执行者。胞外的死亡信号经过相应的转导途径传至胞内，再通过激活靶分子而产生凋亡效应。凋亡过程受到生物体精确的调控，具有独特而复杂的信号系统。细胞凋亡在医学和农业领域有着广泛的应用。     

禽(番鸭)呼肠孤病毒诱导脾脏单核—巨噬细胞和淋巴细胞凋亡的超微观察

用禽(番鸭)呼肠孤病毒YB分离株,人工感染1日龄雏番鸭及鸭胚,扑杀典型症状的病雏鸭.采取病变的器官组织,进行透射电镜超微结构的观察和研究.结果显示:全身多种器官组织中的单核—巨噬细胞、淋巴细胞和成纤维细胞都受到番鸭呼肠孤病毒不同程度的破坏,其中以脾脏细胞受破坏最为严重,这些细胞除了急性死亡以外,均可在病毒诱导下发生细胞凋亡,表现为:细胞皱缩→染色体浓缩、边聚、外排→形成凋亡小体、自噬小体→被周围吞噬细胞包裹、吞噬、消化降解→终末溶酶体形成.     

胰岛素样生长因子(IGFs)及其在早期胚胎发育中的作用

胰岛素样生长因子(IGFs)在哺乳动物的生长发育过程中通过受体介导对生物体的生长起重要的调节作用。其在早期的胚胎发育过程中,对胚胎的生长发育十分重要。IGFs通过与IGFBPs家族蛋白的结合调节早期胚胎发育过程中的细胞凋亡。IGF-1可以增加体外培养的胚胎的囊胚发育率,并与其它基因协同作用调节胚胎细胞的凋亡,但其确切的抗凋亡的分子机理目前仍在研究中。     

凋亡抑制因子Livin的研究进展

Livin是凋亡抑制因子(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族的重要成员,其表达的Livin蛋白主要通过抑制胱天蛋白酶-3、7、9的活性来阻断细胞凋亡过程。Livin在多种肿瘤细胞中高表达,参与抑制细胞凋亡,与肿瘤发生、发展密切相关,可为肿瘤的早期诊断及预后评估提供可靠依据。近几年来研究发现,通过抑制Livin基因的表达及诱导产生特异性地识别Livin的抗体可抑制、杀死肿瘤细胞,为恶性肿瘤的治疗提供了新的方法。     

ASPP家族对p53诱导细胞凋亡发挥调节作用的研究进展

ASPP（apoptosis stimulating protein of p53）即p53凋亡刺激蛋白家族,是科学家们近年来发现的新的蛋白家族.该家族包含有三个成员：ASPP1,ASPP2和iASPP.它们均可以与p53相结合,从而正向或负向地调节p53诱导细胞凋亡的作用,成为肿瘤治疗的新靶点.     

山羊体细胞重编程过程中慢病毒对细胞的毒性作用

[目的]检测慢病毒对普通山羊、克隆奶山羊和转基因克隆奶山羊的作用.[方法]采用慢病毒作为载体感染普通山羊、克隆奶山羊(♂12001)和转基因克隆奶山羊(♀12003)体细胞,通过细胞生长曲线,检测慢病毒对3种山羊细胞的毒性作用.[结果]感染后的3种体细胞在感染前3 d,细胞大量凋亡,4~7 d筛选出的细胞大量增殖.未经慢病毒感染的3种细胞接种2 d后数量开始明显增加,第25天进入对数生长期,第57天进入平台期,呈现典型的"潜伏期-对数生长期-停滞期"生长模式.[结论]慢病毒对细胞有毒性作用,会引起细胞大量凋亡.     

高等植物细胞凋亡的诱因及生物学意义

细胞凋亡是一种由基因控制的、主动的细胞死亡过程,它对植物正常生长发育起重要作用.本文对高等植物细胞凋亡的诱因及生物学意义进行了综述,为深入研究植物细胞凋亡提供参考.     

昆虫细胞凋亡的线粒体通路研究进展

介绍了哺乳动物和一些代表昆虫的线粒体凋亡途径研究进展,特别是与线粒体途径密切相关的凋亡调控因子,如细胞色素C,caspases家族,Bcl-2家族等的功能作用,阐述了线粒体在昆虫细胞凋亡中的作用,为进一步研究昆虫细胞凋亡机制以及发展以昆虫细胞凋亡因子为靶标的特异性杀虫剂提供理论基础。     

妊娠过程中细胞凋亡的免疫调节作用

细胞凋亡是有机体在自身基因控制下的细胞有序死亡的方式.概述了当前关于正常妊娠和流产过程中细胞因子IFN、TNF、Ils、NO与细胞凋亡基因Bcl-2、Fas相互作用的研究情况,指出了妊娠过程中细胞凋亡的生物学意义,旨在为从事生殖免疫研究的工作者提供信息.     

鸡马立克氏病发病过程中肝肾细胞凋亡的电镜观察

通过透射电镜对人工诱发的马立克氏病病鸡的肝、肾细胞进行了细胞凋亡观察,其肝、肾实质细胞发生了细胞凋亡.细胞凋亡呈现多阶段的过程:早期,染色质发生凝聚和边集;中期,染色质凝集十分明显,核变成致密小体,随后裂解成数个团块;后期,凋亡小体形成.肿瘤细胞浸润越严重,细胞凋亡也越明显.凋亡的细胞细胞质内自噬体和同心板层小体形成,内质网扩张成空泡状.细胞膜完整,线粒体无明显变化.     

Argonaute蛋白在植物逆境胁迫响应中的功能

Argonaute(AGO)蛋白是生物体中普遍存在的一类相对分子质量较大(约105)、成员数量众多的蛋白,该家族在不同物种中高度保守,由可变N端、PAZ、MID和PIWI等结构域组成.AGOs通过与不同的sRNA形成复合体参与植物生长发育、形态建成、细胞增殖凋亡、病毒防御、逆境响应等多种生物过程.综述了植物AGO家族的...     

猪传染性胃肠炎病毒诱导ST细胞凋亡的初步研究

【目的】探讨猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染猪睾丸细胞(ST细胞)后是否可诱导细胞发生凋亡,并对凋亡的信号通路进行初步探究,为进一步揭示TGEV的致病机制提供理论基础。【方法】用TGEV感染对数生长期的ST细胞,同时设立对照组,在感染后不同时间取细胞样品,通过细胞形态观察、细胞活性检测、细胞凋亡率检测和细胞内Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性检测及Western blot分析等方法,研究TGEV感染对ST细胞的影响。【结果】TGEV感染可抑制ST细胞生长,并且呈现病毒感染剂量和感染时间的依赖性。倒置显微镜和荧光显微镜观察结果显示,10MOI(感染复数)的TGEV感染24h后,ST细胞出现典型的凋亡特征,细胞皱缩变圆、聚堆,细胞核内染色质固缩。流式细胞仪检测及Caspases活性检测表明,感染TGEV的ST细胞凋亡比例随感染时间的延长而逐渐增加,细胞内Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性逐渐升高。Western blot分析表明,Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9无活性的酶原形式随着TGEV感染时间的延长逐渐降解,同时Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活化片段逐渐增加。TGEV感染能够促进FasL和Bax的表达而下调Bcl-2的表达。【结论】TGEV感染能够诱导ST细胞凋亡,Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9及FasL介导的死亡受体通路和Bcl-2家族调控的线粒体凋亡通路,在调控TGEV感染诱导的细胞凋亡过程中可能起着非常重要的作用。     

p21蛋白的功能及在病毒感染中的作用

p21蛋白是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(CDKI),具有多种生物学功能。首先,p21蛋白可降解细胞周期蛋白(cyclin)、抑制细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)活性、与cyclin/CDK复合物或增殖细胞核抗原(PCNA)结合,阻滞细胞周期进程。其次,p21蛋白可通过巨噬细胞的活化和极化及中性粒细胞的凋亡参与调控机体炎症反应。再次,p21蛋白调控细胞的凋亡过程。它既可与细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)和促凋亡因子相互作用抑制细胞凋亡,又可上调促凋亡蛋白Bax或激活TNF家族死亡受体(TRAIL)促进细胞凋亡。最后,p21蛋白可上调微管相关蛋白1A/1B轻链3B(LC3)和Unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)蛋白促进细胞自噬。此外,p21蛋白在多种病毒感染过程中也发挥重要作用。在人免疫缺陷病病毒(HIV)感染的细胞中,p21蛋白可抑制HIV逆转录酶的活性、dNTP的生物合成及宿主细胞抗病毒蛋白SAMHD1失活抑制HIV复制。p21蛋白可与人乳头瘤病毒(HPV)编码的E7蛋白相互作用,诱导细胞进入S期。Epstein-Barr病毒(EBV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、鼠肝炎病毒(MHV)和A型流感病毒(IAV)感染引起p21蛋白水平变化,进而调控细胞周期。本文综述了p21蛋白的功能及在病毒感染中的作用,以期为研究病毒感染和p21蛋白之间的相互作用提供参考。     

牛疱疹病毒Ⅰ型诱导MDBK细胞凋亡的初步研究

【目的】研究牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-Ⅰ)对牛肾细胞(MDBK细胞)的作用,为探讨BHV-Ⅰ诱导细胞凋亡的分子机制奠定基础。【方法】常规方法培养MDBK细胞,于对数生长期感染BHV-Ⅰ,同时设立对照组,于感染后不同时间取样,采用细胞形态观察、细胞活性检测、细胞核形态观察、DNA ladder检测、细胞凋亡率检测和细胞内Caspase-3活性检测等方法,对BHV-Ⅰ感染的MDBK细胞进行凋亡指标检测。【结果】接毒后24h,MDBK细胞即出现明显的细胞病变。活性检测表明,感染BHV-Ⅰ的细胞活性降低,并且呈病毒感染量和感染时间的依赖性。感染细胞出现核固缩,并呈新月形变化。DNA电泳结果和流式细胞术检测结果均表明,感染BHV-Ⅰ的细胞DNA出现规律的片段化,细胞凋亡比例随感染时间延长而增加,细胞内Caspase-3活性逐渐升高。【结论】BHV-Ⅰ能够诱导MDBK细胞凋亡,并且在诱导细胞凋亡过程中有Caspase-3参与。     

内源性蛋白酶对宰后肌肉嫩化机制研究进展

 肌肉的宰后嫩化机制一直是国内外肉品科学研究的一个热点,目前认为肌肉宰后嫩度的改善主要归因于内源性水解酶作用所引起的肌原纤维蛋白的有限降解。钙激活酶虽然是宰后嫩度改善的一个主要贡献者,但不是惟一的,而是多种内源酶类协同作用的结果。本文综述了溶酶体组织蛋白酶、蛋白酶体、钙激活酶在宰后嫩化过程的作用;介绍了细胞凋亡的特点、通路及凋亡酶,并对细胞凋亡酶对宰后嫩度改善的潜在贡献进行了讨论;最后分析了细胞凋亡酶和钙激活酶在宰后成熟过程中的交互作用及共同贡献于肌肉宰后嫩化的可能性。     

慢病毒介导shRNA抑制Sirt1基因表达对猪前体脂肪细胞凋亡的影响

【目的】探讨慢病毒介导的shRNA干扰系统抑制脱乙酰基酶1(Sirtuin type 1,Sirt1)表达对猪前体脂肪细胞凋亡的影响。【方法】构建pLentiH1-Sirt1shRNA慢病毒载体,将其感染猪前体脂肪细胞,运用Hoechst33258染色,于荧光显微镜下观察细胞的形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western印迹检测细胞凋亡标志物Cleaved caspase-3的表达情况。【结果】pLentiH1-Sirt1shRNA慢病毒载体可抑制猪前体脂肪细胞中Sirt1的表达,显微镜下可见细胞体积缩小、染色质凝集、核固缩等典型的凋亡特征;流式细胞术显示细胞凋亡率较空载体对照组明显增加,早期和晚期凋亡细胞百分率分别从4%和9%(P0.05)上升至30%和32%(P0.05);Western印迹检测显示Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著上调。【结论】慢病毒介导的shRNA可有效地抑制猪前体脂肪细胞中Sirt1的表达,显著促进细胞凋亡,提示Sirt1可能在前体脂肪细胞凋亡中发挥着重要作用。     

HSP70/HSP27对免疫细胞保护作用的研究进展

热休克蛋白（Heat shock proteins,HSPs）作为一类重要的非特异性细胞保护蛋白,在免疫细胞应激耐受和应激保护中发挥着重要作用,其分子伴侣和抗细胞凋亡作用对于维持免疫细胞生存和内环境的稳定具有重要意义.热休克蛋白70（HSP70）和小分子热休克蛋白（Small heat shock proteins,sHSPs）中的HSP27是HSPs家族中的重要成员,也是近年来被广泛关注的研究对象,已经证实在参与调解细胞的增殖、分化和细胞凋亡过程中起到重要的作用.文章就HSP70/HSP27在热应激条件下对免疫细胞的保护作用进行了综述,对该领域中存在的问题进行了回顾,并对其发展前景进行了展望.