鸡大肠菌株F11菌毛的鉴定

大肠杆菌败血症或大肠杆菌病是家禽最常见的一种疾病，以气囊炎，心包炎，肝周炎和偶尔发生输卵管炎为特征。大肠杆菌病通常是一种继发感染，当原发性病原如传染性支气管炎病毒或霉形体造成组织损害后，大肠杆菌通过呼吸道进入体内引起继发感染。大肠杆菌的血清型很多，但大多数的研究表明，一半以上的致病菌株属于下列血清型之一，O1：K1，O2：K1，O78：K80和O35。关于鸡大肠杆菌病的致病机理，曾经提出厂致病菌株的毒力与细菌对气管或咽粘膜上皮细胞的吸附密切相关，菌毛参与厂这种交叉反应和分析N－端氨基酸序列作出结论。本项研究旨…     

抗鸡大肠杆菌F11菌毛单克隆抗体的研制

将充分菌毛化的大肠杆菌（C1976－79（pap )经4‰甲醛灭活作为免疫原免疫BALB／c小鼠，经淋巴细胞杂交瘤技术，用间接ELISA筛选获得FA1、FB11两株抗FB11菌毛单抗，其FLISA效价分别为18log2和15log2试管凝集价分别为8log2和6log2。免疫印迹实验表明：两株单抗均能与鸡大肠杆菌F11菌毛反应，识别分子量为18kD左右的菌毛蛋白。同时对猪病原性大肠杆菌进行检测，结果均无交叉反应。这表明F11菌毛是不同于K88、K99、987P、F41及F18等粘附素的一种大肠杆菌菌毛。     

鸡大肠杆菌菌株的分离鉴定与药敏试验

2001年、2002年从济南周边县分离了16株鸡致病性大肠杆菌，对它们进行了生化鉴定和药敏试验，并与标准株O1、O2、O78相对照，发现该地区鸡的大肠杆菌对临床上常用的喹诺酮类药物产生了明显的耐药性，但与两年前有了明显的好转。同时还发现引起该地区鸡发病的大肠杆菌对丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素等药物最为敏感。     

大肠杆菌F18ac菌毛FedA蛋白的表达与鉴定

根据已经发表的F18ac菌毛A亚单位的基因序列(FedA)设计一对引物,利用PCR技术从重组质粒T 8813A 中扩增到一段序列,并按预定的阅读框插入表达性质粒载体pGEX 6p 1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedA/ac,并转化大肠杆菌BL 21 获得重组菌PPFedA/ac。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该序列大小为456 bp,与已发表的FedA/ac结构编码序列完全一致。通过对菌体裂解物的SDS PAGE 分析以及Western blotting 鉴定,证明重组大肠杆菌PP FedA/ac的可以表达融合蛋白形式的FedA/ac (命名为GST FedA/ac),即FedA/ac蛋白(15.317 ku)与谷胱苷肽转移酶(27.335 ku)相连组成分子量为42.652 ku的融合蛋白。利用GST FedA/ac制备的兔抗GST FedA/ac 血清与大肠杆菌F107/86 株( F18ab )、2 134 P 株(F18ac )进行的玻板凝集试验呈现阳性反应,进一步表明了表达的正确性。     

山东省鸡大肠杆菌部分流行菌株的分离鉴定

鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏杆菌某些血清型菌株所引起的一类疾病的总称，是危害养鸡业的一种重要传染性疾病。为摸清该病在本地区流行情况、血清型和耐药性特点等，我们对具有代表性地区的养鸡场进行了调查，从部分发病肉鸡分离到若干株具有典型特征的大肠杆菌，并做血清学鉴定、药敏试验，并对较少见的菌株进行致病性动物实验，以为更右效防治该病提供依据．     

鸡的致病性大肠杆菌分离鉴定

鸡的致病性大肠杆菌分离鉴定吴耀妹，任建鸾（南京农业大学２１００９５）侯世忠（胜利油田肉鸡场）南京某鸡场和山东某鸡场的罗曼鸡群先后发生了一种以气囊炎、腹膜炎、败血症、输卵管炎及脐炎为特征的疾病，经调查及病原分离鉴定，确诊为大肠埃希氏菌病，并对分离的１１...     

山东省鸡致病性大肠杆菌的血清型鉴定

山东省鸡致病性大肠杆菌的血清型鉴定范伟兴胡敬东肖传发李桂杰（山东农业大学动物科技学院，泰安２７１０１８）鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌的某些血清型所引起的一种综合征，１８９４年Ｌｉｇｎｉｅｒｅｓ首先报道了该病［１］，以后有关鸡大肠杆菌病的研究不断增多［...     

大肠杆菌F1菌毛表达条件的初探

Ｆ１菌毛在体外表达受到许多因素的影响。为了对Ｆ１菌毛的进一步研究,本试验以只产Ｆ１菌毛的菌株Ｃ６００为对象,从培养基、温度、ｐＨ、通氧等条件进行了摸索,实验结果表明：培养条件的限制极为显著,在ＭＤ－１肉汤（ｐＨ６．８～７．２）中、３７℃、静止培养４８ｈ可使Ｆ１菌毛获得较好表达;通入氧气将有利于Ｆ１菌毛的表达。     

鸡致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛的研究进展

鸡致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛是鸡大肠杆菌病的重要致病因子.本文对其生物学特性、在感染中的作用、分子生物学等8个不同方面的研究进展做了综述.     

鸡大肠杆菌病病原分离与鉴定

通过在甘肃及西北部分地区进行鸡大肠杆菌病流行病学调查,采集病料１２０份,分出大肠杆菌１０５株,分离率为８５％。对２６株大肠杆菌进行了血清型鉴定出血清型１０个,其中血清型Ｏ７８、Ｏ１、Ｏ２、Ｏ１１４占受检菌株的７６．９２％。     

地高辛标记P菌毛基因检测探针鸡大肠杆菌

用地高辛标记鸡大肠杆菌Ｐ型菌毛结构基因（ｐａｐＡ）制成核酸探针,作斑点杂交试验,检测２８个血清型鸡大肠杆菌５０个菌株与该探针的同源性。结果表明有５个菌株被检测为阳性,阳性率为１０％。     

大肠杆菌新型菌毛(F1987)基因文库的构建

用碱裂解法从表达新型菌毛 (F1987)的 E.coli DH5 α阳性转化子中提取相应质粒 DNA,用 Bam H 对相应质粒和载体质粒 (p U C19)分别进行酶切 ,酶切产物经过纯化并按一定比例混合后 ,加入 T4 DNA连接酶进行连接 ,连接产物用热激法转化受体菌 E.coli DH5 α,构建了相应的基因文库。     

新乡县鸡大肠杆菌菌株分离培养及鉴定

于2010年7月到2011年6月,笔者通过对新乡县境内疑似鸡大肠杆菌病的病死鸡病例进行细菌的分离、培养和鉴定,了解本地鸡大肠杆菌病的病原特性,进而为有效控制本地鸡大肠杆菌病在鸡群中的传播、流行奠定研究基础。     

大肠杆菌F18菌毛的研究进展

F18菌毛是致猪水肿病的产Vero细胞毒素大肠杆菌（VTEC）与某些产肠毒素大肠杆菌（ETEC）的主要毒力因子之一，现已知，F18菌毛抗原有F18ab,F18ac两种血清型变异，F18ab即为F107，而18ac则包括近来才发现并命名的菌毛2134P及定居因子8813。现将有关F18菌毛的研究进展概述如下。     

大肠杆菌F18菌毛A亚单位基因的多样性分析

根据已经发表的大肠杆菌F18ab菌毛A亚单位(FedA／ab)的基因序列(fedA／ab)设计1对引物，利用PCR技术从本实验室保存的10株大肠杆菌(F107／86、YCED1、YCED2、C、D、E、12F、2134P、8199、8813)中分别扩增到一段序列．并克隆至pGEM-T载体，获得重组质粒TF107A、TYCED1A、TYCED2A、TCA、TDA、TEA、T12FA、T8813A、T8199A、T2134PA。通过序列测定，并与已发表的fedA／ab进行比较、基因树分析，可将这10个菌株分为2个基因群，其中F107／86、YCED1、YCED2、C、D、12F与fedA／ab具有高度同源性，属于fedA／ab．大小为513bp；E、8813、8199、2134P构成另一单独的分支，属于fedA／ac．大小为516bp。     

禽大肠杆菌菌毛粘附特性的研究

用透射电镜观察了鸡大肠杆菌的３个致病菌株ＧＬ７（Ｏ５０）、ＨＢ５（Ｏ７８）及ＴＧ１８（Ｏ８８），发现在营养肉汤中于３７℃培养均表达菌毛，但在１８℃培养不表达菌毛，用３７℃培养的大肠杆菌对鸡气管粘膜做粘附试验，并用扫描电镜观察，发现它们对体内体外的鸡气管均可粘附，但１８℃培养的大肠杆菌均缺乏这种粘附作用。采用粘附抑制试验测定这３种菌株对体外鸡气管节段粘附的特异性，结果是抗这３种细菌菌毛的抗体能显著抑制各自相应的菌株对气管上皮的粘附；Ｏ７８株和Ｏ８８株对气管上皮的粘附作用可被甘露糖显著抑制，表明甘露糖对介导菌体对气管粘膜上皮细胞受体起重作用。用甘露糖不能抑制Ｏ５０菌株对气管上皮的粘着，表明该菌体的粘附作用不由甘露糖介导。用高碘酸钠处理能抑制所有菌株的粘附作用，再次表明细菌对气管上皮的粘附作用是由单糖介导的