果树体细胞胚胎发生研究进展

近年来有关果树组织培养的研究很多,其中对果树体细胞胚胎发生的研究越来越受到重视。现对近10a来国内外果树通过体细胞胚胎发生途径再生植株的研究现状进行了总结,分析了果树体细胞胚胎在发生途径上的特点,并从发生过程分析了体细胞胚胎发生的影响因素,同时对其生理生化代谢以及实际应用等方面进行综述。提出该领域今后应逐步开展对果树体细胞胚胎发生的生理生化和分子机理研究,促进体细胞胚胎发生研究成果在生产实践中的应用。     

分葱组织培养体细胞胚胎发生的研究

利用分葱茎尖培养成功地诱导了体细胞胚胎发生。具体步骤如下：Ⅰ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上诱导愈伤组织；Ⅱ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上进行愈伤组织的继代培养，继代培养３次以后，转变为胚性愈伤组织；Ⅲ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．２５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上进行胚状体的诱导；Ⅳ．在无任何激素的ＭＳ培养基上使胚状体再生植株。切片观察表明，胚状体大多数起源于愈伤组织表层及其以下细胞。     

百合体细胞胚胎发生研究进展

通过对百合体细胞胚发生的方式、诱导胚性愈伤组织形成中的影响因素、培养条件和方式等方面进行总结概括,并且对存在问题进行了分析,为今后百合体细胞胚胎发生的相关研究提供参考依据。     

柑桔胚珠培养及胚状体发生的研究

选用‘Peng柑’、‘锦橙’、‘桃叶橙’、‘华农本地早’花后7周幼果胚珠进行培养，其胚状体发生的百分率分别是：48.5%、21.2%、19.8%、6.4%；胚性愈伤组织则为：28.2%、13.5%、15.8%、5.8%。各品种胚状体和胚性愈伤组织发生的百分率明显不同，与品种胚数多少相一致。不同激素和有机物对柑桔胚珠培养、胚状体的发生及胚性愈伤组织形成产生不同的影响，多单胚的‘华农本地早’仅从基本培养基中产生胚状体和胚性愈伤组织。胚珠培养中，胚状体发生的方式，根据来源不同分为三种：第一种是由胚珠（或已黄的球形胚上）长出白色的胚性愈伤组织，继而产生胚状体；第二种是在已分化的幼苗下胚轴或根部产生胚性愈伤组织和胚状体；第三种是在畸形胚上直接不断的分化出胚状体。     

柑桔胚珠培养及胚状体发生的研究

选用‘椪柑’、‘锦橙’、‘桃叶橙’、‘华农本地早’花后7周幼果胚珠进行培养.其胚状体发生的百分率分别是:48.5%、21.2%、19.8%、6.4%;胚性愈伤组织则为:28.2%、13.5%、15.8%、5.8%.各品种胚状体和胚性愈伤组织发生的百分率明显不同.与品种胚数多少相一致.不同激素和有机物对柑桔胚珠培养、胚状体的发生及胚性愈伤组织形成产生不同的影响.多单胚的‘华农本地早’仅从基本培养基中产生胚状体和胚性愈伤组织.胚珠培养中,胚状体发生的方式,根据来源不同分为三种:第一种是由胚珠(或已黄的球形胚上)长出白色的胚性愈伤组织,继而产生胚状体:第二种是在已分化的幼苗下胚轴或根部产生胚性愈伤组织和胚状体;第三种是在畸形胚上直接不断的分化出胚状体.     

枣幼胚愈伤组织诱导和胚状体发生

以陇东马牙枣盛花后50～60d的幼胚为试材,采用三步培养法诱导胚状体。结果表明:诱导愈伤组织适宜的培养基为Nitsch培养基上附加BA 1.0mg/L+2,4-D 1.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L。诱导胚状体培养基宜选用,MS+BA 1.0mg/L+IBA 0.2mg/L+LH0.5mg/L+VC 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L,并获得完整植株。     

诱发柑桔“适应型”珠心愈伤组织体细胞胚胎发生的研究

以我国四个优良柑桔栽培品种为试材,研究了他们的适应型珠心愈伤组织高频率体细胞胚胎发生与植株再生的条件,观察了胚胎发生时胞壁、细胞器的变化,发现2,4—D、IBA、KT、GA、BR、ABA、PP333等植物生长调节物质,CH、LH、YE等天然复合物和葡萄糖抑制胚胎发生;而乳糖(3%～8%)。半乳糖(5%～7%),特别是甘油(1%～5%)能诱发高频率体细胞胚胎发生。乳糖、甘油的这种效应不受PP333、BR、CH、AAC、ME的影响,但AC会显著地推迟胚胎发生。低温预处理对诱发体细胞胚胎发生不利。对球形胚状体的继续发育,以添加麦芽、SAD或ABA的MT培养基较好。电镜和光镜观察表明,适应型珠心愈伤组织由胚性细胞和非胚性细胞组成。胚性细胞质浓、核糖体特别多、淀粉粒多、液泡小而少、核大、壁较厚。胚状体从单个胚性细胞开始形成,一个胚性细胞分裂成的多个子细胞共存于一个厚壁之内。     

朱顶红体细胞胚胎发生及植株再生研究

 通过诱导朱顶红（Hippeastrum hybridum）小鳞茎形成胚性愈伤组织,建立间接的体细胞胚胎发生途径和植株再生的无性繁殖体系。试验结果表明,0.5  mg · L^-1的2,4-D附加0.5 mg ·  L^-1 6-BA对试管小鳞茎外植体初代胚性愈伤组织的诱导和继代增殖有明显的促进作用,初培养松脆愈伤组织诱导率可达83.3%。2.5 ~ 5.0 mg · L^-1 的6-BA对体细胞胚胎的发育有显著的促进作用,培养50 d大于20个体细胞胚发生的愈伤组织约为50%;相同浓度6-BA附加不同浓度NAA的试验组间体细胞胚发育无明显差异。     

仙客来体细胞胚胎发生的研究进展

综述了近年来国内外对仙客来体细胞胚胎发生的研究,表明品种的基因型、外植体的类型、外源激素、外界条件以及附加成分等对胚性愈伤的产生都有重要的影响,另外综述了仙客来胚性愈伤和体细胞胚胎的保存方法.     

小菘菜游离小孢子培养技术研究

以4个引自日本的小菘菜杂交种为试材进行小孢子培养,对影响小菘菜胚状体发生及其成苗的因素进行分析。结果表明：通过游离小孢子培养,获得了大量的小孢子胚状体及再生植株85株;不同基因型间的小孢子胚诱导率差异显著;4 ℃低温预处理24 h对小孢子胚的发生具有促进作用;NLN-13+0.2 mg?L-1 6-BA+0.1 mg?L-1 NAA为适宜的诱胚培养基;50 r?min-1低频振荡培养有利于提高子叶形胚发生的比例;MS+3 %蔗糖+0.75 %琼脂+0.1 g?L-1活性炭是小孢子植株继代和壮苗的适宜培养基;MS+3 %蔗糖+ 0.75 %琼脂+0.1 mg?L-1 NAA是小孢子植株适宜的生根培养基。     

朱顶红离体培养快速繁殖体系及胚状体发生

 以朱顶红鳞茎基部鳞片为外植体, 在MS + NAA 1 mg/L + BA 2 mg/L 培养基上愈伤组织的诱导频率最高, 为93. 3 % , 愈伤组织上可以直接生芽, 生芽频率为90. 0 %。NAA 的诱导效果优于2 ,42D , BA 优于KT。愈靠近鳞茎基部愈容易诱导产生愈伤组织和不定芽。愈伤组织继代培养4 次后有胚状体产生。诱导产生的不定芽和胚状体在MS0 培养基上可以100 %生根。生根后的再生植株移栽到蛭石中, 浇MS 无机盐营养液, 成活率达98 %以上。不生根直接将不定芽移栽到消毒蛭石中, 成活率为85 %以上。     

芥蓝游离小孢子培养初报

 以芥蓝的5个基因型为试材，对游离小孢子培养诱导胚状体发生及植株再生进行了初步探讨。结果表明：供体基因型对成功诱导胚状体发生至关重要；振荡培养明显有利于胚状体的发育；改良MS和B培养基对诱导植株再生没有差别。     

水芋体细胞胚胎发生及植株再生体系的建立

以水芋幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基,建立了水芋体细胞胚胎发生体系。对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明了水芋体细胞胚胎的发育过程。结果表明：水芋叶片胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导最适宜培养基为：LS＋6-BA0．5mg／L＋2,4-D2．0mg／L,诱导率为98．5％;体胚发育及植株再生最适宜的培养基为：IS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋IAA 10mg／L,体胚萌发率为96％,萌发的体胚在发育培养基上继续培养25d后全部发育成完整植株。     

辣椒营养器官离体培养中体胚发生研究进展

利用植物离体培养和遗传转化技术进行辣椒植株性状改良,培育新品种,可以克服物种间基因交流障碍,并且性状改良针对性强、目的明确,具有较高的研究价值和应用价值。本文对辣椒离体培养中营养器官与合子胚外植体体胚发生途径进行了综述,讨论了外植体种类、基础培养基、植物生长调节剂及其他添加物质、培养条件和预处理以及外源基因等对体胚发生的影响,并对今后的研究进行了展望。     

植物生长调节剂对羽衣甘蓝小孢子胚发生的影响

 以‘圆叶红心’和‘皱叶红心’2个羽衣甘蓝F1杂交种为试材, 进行游离小孢子培养, 研究了6-BA、NAA和2, 4-D对其胚状体诱导的影响, 结果表明: 6-BA对诱导胚状体起促进作用, 其适宜浓度为0.2 mg·L ^{- 1} ; NAA抑制小孢子胚状体发生, 但能促进其发育, 提高正常胚比例; 2, 4-D有较强的抑制作用, 只有少量细胞团的形成; 6-BA、NAA综合作用能显著提高胚状体诱导率, 其浓度配比以1∶1或2∶1为佳。     

胡萝卜愈伤组织诱导培养的研究

以胡萝卜"七寸人参"为试材,探讨了不同外植体、激素、培养基、光照对胡萝卜愈伤组织诱导的影响。结果表明:胡萝卜愈伤组织的诱导以下胚轴为外植体为宜;在添加2,4-D1.0mg/L和KT 0.5mg/L的MS培养基上愈伤组织的诱导频率为100%,且愈伤组织生长良好,增殖快速;光照对愈伤组织的诱导没有影响,但却进一步阻碍了愈伤组织的增殖生长。     

‘过山香’香蕉多芽体的诱导及其体细胞胚的发生

 以我国重要香蕉种质‘过山香’ (AAB) 为材料, 研究了香蕉多芽体诱导、多芽体茎尖薄切片即分生组织性的表层结构物( scalp) 愈伤组织诱导和体细胞胚发生的合适条件。结果表明, 该品种单个不定芽茎尖在P4培养基(含BAP 100 μmol·L ^{- 1}和IAA 1 μmol·L ^{- 1} ) 中继代5个周期后可诱导获得类似花椰菜结构的多芽体。从30 μmol· m ^{- 2} ·s^{- 1}光强, 光/暗周期(16 h /8 h) 培养的多芽体所获得的scalp在添加2,4-D 5μmol·L ^{- 1}和Zeatin 1 μmol·L ^{- 1}的愈伤组织诱导培养基中黑暗培养, 45 d后愈伤组织诱导率可达97.6%。诱导20 d后黄色分生小球体类结节状愈伤组织开始发生, 90～120 d后在分生小球体局部可获得白色或浅黄色松散的胚性愈伤组织(诱导率为17.5% ) 。从胚性愈伤组织诱导的体细胞胚在成熟培养基上培养60 d后体胚萌发率和植株转化率分别为14.5%和11.1%。     

六月鲜枣愈伤组织诱导及胚状体发生

采用5因素4水平的正交试验设计,对六月鲜枣的幼叶、嫩茎、冷藏5d后的花药、花后48～50d的胚乳,利用3因素3水平的正交试验设计,对花后58～60d的幼胚及子叶,进行愈伤组织诱导再分化试验。探讨了不同激素、碳源和基本培养基对产生愈伤组织的影响。结果表明:碳源对胚乳、花药器官,基本培养基对嫩茎、幼叶、花药愈伤组织的诱导有显著影响,而且生长素种类和浓度对不同外植体的愈伤组织诱导作用不同;嫩茎、子叶及幼胚较易诱导产生愈伤组织,但只有子叶及幼胚产生的愈伤组织具较强的再生能力,并可诱导出不定芽,不定芽分化率分别为51.1%和9.5%,ZT较BA易诱导愈伤组织产生不定芽,不定芽转移生根成苗获得了完整植株。另外,用子叶及幼胚培养获得了大量胚状体,且胚状体最终可发育成苗。