黑节铁皮石斛组织培养技术研究

对黑节铁皮石斛茎尖原球茎诱导和茎尖增殖以及小苗生根进行了初步研究。采用黑节铁皮石斛无菌苗茎尖,经过75%乙醇消毒30 s后,去除表皮,黑节铁皮石斛带节茎尖原球茎诱导与茎尖增殖最佳培养基为1/2MS+5.5 g/L琼脂+0.55 mg/L 6-BA+0.55 mg/L NAA+0.1 mg/L AgNO_3+100 g/L土豆泥+20 g/L白砂糖+0.45 g/L活性炭。黑节铁皮石斛生根最佳培养基为1/2MS+5.5g/L琼脂+0.15 mg/L 6-BA+0.55 mg/L NAA+0.1 mg/L AgNO_3+100 g/L香蕉泥+20 g/L白砂糖+0.25 g/L活性炭。     

大花蕙兰原球茎的诱导和增殖研究

通过对大花蕙兰茎尖和茎段的组织培养,建立了大花蕙兰原球茎的无菌繁殖体系。结果表明:芽诱导的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;原球茎诱导培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+2.5 mg/L 6-BA+100 mg/mLVC;原球茎诱导增殖培养基为1/2MS+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;适宜原球茎增殖培养的外植体为原球茎。     

流苏石斛茎段组织培养的初步研究

对流苏石斛茎段的添组织培养进行了初步研究。结果表明,在诱导茎段腋芽萌发中,以MS+6-BA4.0 mg/L+NAA1.0 mg/L效果最好;在芽增殖阶段,以MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L增殖效果最佳;在研究附加物对无菌苗增殖影响时,添加15%的椰乳可有效提高芽的增殖率。     

不同激素水平下对石斛进行组织培养的影响分析

本文通过试验研究单一激素下不同浓度对石斛进行组织培养的影响,从而确定不同激素组合对石斛进行组织培养的影响,得出原球茎诱导培养:MS培养基下添加浓度1.0mg/L的NAA+浓度为0.6mg/L的6-BA;石斛原球茎分化以1/2MS培养基配加1.0mg/L的NAA+浓度为6mg/L的6-BA;石斛生根培养以N6培养基,添加浓度为0.3mg/L的NAA与浓度为1.0mg/L的IBA。     

外源激素对长距石斛种子的发芽及原球茎增殖的影响

探讨适合长距石斛组织培养和快速繁殖的最佳途径。用不同激素诱导长距石斛种子形成原球茎,接入添加不同浓度激素比例的培养基中进行组织培养,研究长距石斛组织培养和快速繁殖的最佳途径。不同种类和不同浓度的激素对长距石斛原球茎分化成芽有明显影响。随2,4-D浓度的增加,长距石斛原球茎分化率增大。NAA比2,4-D更有利于长距石斛原球茎的分化。添加适合浓度6-BA有利于长距石斛苗的形成。在激素组合试验中,NAA和6-BA浓度均为1 mg/L时,发芽率达85%,叶片数多达5片。当6-BA和NAA浓度分别为2.00~3.00 mg/L和0.25~0.50 mg/L时,长距石斛原球茎的外观形态更适合于增殖。MS+2.00 mg/L 6-BA+0.50 mg/L NAA的增殖率最高。MS培养基单独添加6-BA时长距石斛种子的萌发效果较好。     

顶果木离体培养研究

[目的]研究顶果木离体培养最佳方法。[方法]以顶果木种子获得的无菌苗进行离体培养,通过诱导丛生芽的发生,获得再生植株。[结果]采用MS+6-BA 0.8～3.0 mg/L+NAA 0.2～0.5 mg/L培养基、改良MS+6-BA 0.2～1.2 mg/L+NAA 0.18～0.2 mg/L培养基均能保持无菌苗的生长,其中改良MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.18 mg/L培养基最适宜无菌苗生长,但培养40 d后,未见芽苗分化;将无菌苗转入改良MS+6-BA 0.5～1.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基中培养,均能诱导芽的分化和增殖,培养20 d后,芽繁殖系数可达1.72～2.30,其中改良MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基芽繁殖系数达2.30,总体芽苗生长情况差异不明显。[结论]改良MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基为诱导顶果木最适培养基。     

不同激素水平对金线莲组织培养的影响

以金线莲的茎片、带节茎段和不定芽为外植体,研究不同植物生长激素组合和浓度配比对福建金线莲原球茎诱导、丛生芽诱导及幼苗生根壮苗的影响.结果表明:适合原球茎诱导的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+ZT 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L,诱导率达81％;适合丛生芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+TDZ 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L,丛生芽诱导增殖效果最佳,90 d时增殖倍数达23倍;适合不定芽生根的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 4.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L+AC 3 g/L+香蕉汁100g/L.     

春石斛的组织培养和快速繁殖研究

试验结果表明:春石斛不定芽诱导、增殖的最佳培养基为1/2MS+6-BA1 mg/L+NAA 1 mg/L+香蕉泥100 g/L;原球茎诱导的培养基以1/2MS+NAA最佳;不加任何生长调节剂的1/2MS培养基最适宜原球茎的增殖;原球茎分化的最适基本培养基为1/2MS;最适宜的壮苗生根培养基为1/2MS+NAA2 mg/L+香蕉泥100 g/L。     

铁皮石斛组培苗快速繁殖的研究

[目的]研究铁皮石斛组织培养与快速繁殖方法.[方法]以铁皮石斛蒴果为材料,分别探究不同培养基及培养基添加物对铁皮石斛原球茎诱导、增殖及生根的影响.[结果]最适宜的铁皮石斛萌发的培养基为1/2 MS,加入0.2 mg/L NAA的培养基中原球茎增殖率达120％,在培养基中加入1.0mg/L 6-BA和20％香蕉提取液均对其茅的增殖有良好的促进作用,添加0.25mg/L NAA、2.0mg/L6-BA和20％马铃薯提取液的培养基中其再生率可高达220％,0.2 mg/L NAA和20％马铃薯提取液均可显著提高铁皮石斛苗生根生长.[结论]该研究为铁皮石斛快速繁殖技术的应用奠定了理论基础.     

大幅度提高马齿苋组培效率的培养环境条件优化

为了提高马齿苋的组培效率,解决马齿苋出愈时间迟、愈伤组织诱导率不高、愈伤组织诱导需要使用2,4-D、不定芽增殖来源有限等问题,根据马齿苋的最适生长条件,将组织培养环境调整为温度(30±1)℃、全光照,并从无菌苗上直接取材进行外植体培养。结果表明:种子在高温、全光照条件下萌发快,且无菌苗长势好。取材于无菌苗上的根、茎和叶均可以在不添加2,4-D的MS培养基中脱分化形成愈伤组织,且茎在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中、叶在MS+NAA 1.5 mg/L+6-BA 0.5~1.5 mg/L培养基中的初始出愈时间均提前至4 d,且诱导率均达到100%,愈伤组织长势旺盛。带腋芽的茎段在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 5.0 mg/L培养基中可以直接分化出大量不定芽,增殖率达10.5。在最适光温环境下,马齿苋外植体出愈迅速,愈伤组织诱导率和不定芽增殖率大幅度提高。     

铁皮石斛圆球茎增殖影响因素的研究

[目的]探讨培养基的不同组成对铁皮石斛圆球茎增殖的效果及影响,为提高其组培种苗的商业化生产效率提供技术参考。[方法]以无菌播种获得的铁皮石斛圆球茎为材料,对影响铁皮石斛圆球茎增殖的几种因素进行了研究。[结果]铁皮石斛圆球茎在1/2MS培养基中增殖效果较好;在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L培养基中加入BA 2.0 mg/L可促进铁皮石斛圆球茎增殖;培养基中加入天然物质有利于铁皮石斛圆球茎的增殖生长,以加入椰子汁100 ml/L为最佳。[结论]铁皮石斛圆球茎在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L＋BA 2.0mg/L＋椰子汁100 ml/L培养基上增殖效果最佳,增殖系数达到4.8。     

铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究

通过单因素浓度试验和正交试验研究了5种金属离子、不同激素组合及不同天然附加物对铁皮石斛类原球茎增殖、分化的影响。试验结果表明,5种金属离子对类原球茎增殖影响的主次顺序为Mg2+(Fe2+(Ca2+(Mn2+(Zn2+,类原球茎增殖的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+10%马铃薯汁+3%蔗糖(含Mg2+1.0 mmol/L、Ca2+2.0 mmol/L、Fe2+0.1mmol/L、Mn2+0.1mmol/L和Zn2+0.03 mmol/L)。培养基1/2MS+NAA 0.5mg/L+20%马铃薯汁+蔗糖20g/L+琼脂0.8g/L最适于铁皮石斛类原球茎的分化。     

一品红茎段组织培养研究

以一品红(Euphorbia pulcherrima)中的深红一品红(AnnetteHegg)幼茎和腋芽为外植体,以MS为基本培养基并附加不同的生长激素,进行了愈伤组织诱导、愈伤组织分化出芽以及腋芽增殖的研究。结果表明茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;愈伤组织分化出芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L;腋芽启动的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L。     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。     

铁皮石斛以芽繁芽离体培养技术体系的建立

【目的】建立铁皮石斛以芽繁芽离体培养技术体系,为广西铁皮石斛良种选育及种苗繁殖提供技术支持。【方法】以广西桂平种、容县种和西林种3种野生铁皮石斛后代材料茎段为外植体,进行丛生芽诱导、增殖和壮苗生根培养,探讨不同消毒时间和不同激素配比对丛生芽诱导培养等过程的影响。【结果】3种材料外植体的最佳消毒时间为10min,污染率仅10．0％-20．0％;桂平种丛生芽最佳诱导培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,丛生芽诱导率7．8％;容县种和西林种丛生芽诱导最佳培养基为MS＋1．5mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,丛生芽诱导率分别为23．1％和30．8％。3种材料丛生芽继代增殖最佳培养基为MS＋0．5mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,平均增殖倍数为3～5倍;壮苗生根最佳培养基为1／2MS＋0．5mg／LNAA＋0．2mg／LIBA＋10％香蕉泥,生根率在95．0％以上;以松树皮为移栽基质,移栽成活率在90．0％以上。【结论】以桂平种、容县种和西林种3种野生铁皮石斛后代材料茎段为外植体均可建立以芽繁芽离体培养技术体系;在诱导培养基和继代培养基中增加继代次数,可提高铁皮石斛的诱导率和增殖倍数。     

报春石斛再生体系的建立

以茎段为外植体,建立了报春石斛Dendrobium primulinum的离体培养再生体系。结果表明:愈合组织诱导以培养基MS（Murashige and Skoog） + 5.0 mg·L－1 6-苄氨基嘌呤（6-BA） + 1.5 mg·L－12,4-D为最优,诱导率达33.33%;分化和增殖培养基均以MS + 1.0 mg·L－16-BA + 0.1 mg·L－1萘乙酸（NAA） +体积分数10%椰子水为佳,分化率最高可达83.20%,增殖倍数达3.82,外源物质椰子水可促进不定芽的形成及增殖。形成的无根苗转移到1/2MS + 0.5 mg·L－16-BA + 1.0 mg·L－1 NAA + 0.5 g·L－1活性炭培养基上诱导生根发育形成完整植株。图1表4参12     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

激素因子对铁皮石斛离体培养开花诱导的效应（摘要）

[目的]筛选铁皮石斛离体培养开花诱导的适宜激素因子。[方法]采用铁皮石斛茎段离体培养的试管苗为试验材料,以MS为基本培养基,进行单因子激素处理（PP333、TDZ的不同浓度梯度）和多因子激素处理（PP333、TDZ、6-BA以及NAA的不同组合）的比较试验,研究激素因子对铁皮石斛离体培养开花诱导的效应。[结果]单因子激素处理中,PP333、TDZ的适宜浓度和其诱导的花芽形成率分别为0.2mg/L和8.5%、0.06mg/L和15.5%;多因子激素处理对开花诱导的效应依次为：PP333＋6-BA＋NAA＋TDZ组合处理﹥PP333＋6-BA＋NAA组合处理﹥PP333＋6-BA组合处理和PP333＋NAA组合处理;适宜的激素组合为PP3330.3mg/L＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.5mg/L＋TDZ0.06mg/L,其花芽形成率和花开放率高达80.4%和90.3%。[结论]PP333和TDZ对铁皮石斛离体培养开花诱导具有重要影响,TDZ的效应大于PP333。适宜的TDZ浓度与其他激素的合理配比,有利于花芽的形成。     

铁皮石斛原球茎的增殖培养研究

为探索最适宜铁皮石斛原球茎增殖的固体培养基配方,以获得高质量的组培苗,为工厂化育苗提供技术支撑,在相同的实验室培养条件下,把同一阶段的原球茎接种于不同激素比的4种培养基中,培养周期为60 d,每隔15 d取样检测1次,对不同生长状况的试验结果进行分析研究.结果表明,在基本培养基1/2 MS中加入浓度为1.0 mg/L的6-BA、0.5 mg/L的NAA和浓度为20%的马铃薯提取液进行固体培养,铁皮石斛原球茎的增殖效果好.