槲树不同发育时期胚珠石蜡切片制备体系的优化

【目的】建立并优化适宜槲树子房或胚珠石蜡切片的制作体系,为后续槲树胚胎发育学研究提供技术支撑。【方法】以不同发育时期的槲树雌花为试验材料,将材料以60 d为界分为60 d前和60 d后两部分,对材料处理方式(授粉60 d前后的材料分别进行仅保留子房与胚珠处理)、浸蜡时间（18,24,36 h）与浸蜡条件（60 ℃烘箱内抽真空处理0,6,8,12 h）、切片厚度（6,8,10 μm）进行优化;在此基础上,以授粉70 d样品切片为材料,对染色方法（染色液分别为5 g/L苏木精、1 g/L甲苯胺蓝和10 g/L番红 固绿）及染色时间（1,2,5,10,15 min）进行优化,建立适合槲树胚珠的石蜡切片制备体系。【结果】授粉60 d前的样品仅保留子房部分,授粉60 d后的样品仅保留胚珠,两者在50 ℃烘箱经甘油乙醇浸泡48 h的软化处理后,所得切片效果最佳,可避免蜡带破裂等不良现象出现。将浸蜡时间延长至36 h,并于第1次浸纯蜡过程中在60 ℃烘箱内先进行12 h抽真空处理,可保证发育后期体积较大材料的充分浸蜡;脱蜡前将玻片进行3 h抽真空处理,可明显降低脱片率;授粉60 d前样品的切片厚度以8 μm为宜,授粉60 d及以后的样品以10 μm最佳。槲树胚株石蜡切片制备时,采用5 g/L苏木精染色5 min时的制片效果最好。【结论】建立并优化了槲树不同发育时期子房或胚珠石蜡切片的制备体系,采用该优化体系可获得蜡带连续、结构完整、染色均匀、背景清晰的槲树子房或胚珠切片。     

石榴花芽石蜡切片制作方法的改良

[目的]摸索适合石榴花芽及胚珠结构观察的石蜡切片方法。[方法]以"突尼斯软籽"石榴花芽及胚珠为试材,在传统石蜡切片方法的基础上,结合石榴花芽鳞片厚、子房多室的特点,对样品处理、软化、透明、浸蜡、染色等重要制片环节进行研究。[结果]不同样品处理方式对比发现,将子房纵切4瓣进行固定,切片效果较好。软化结果表明,纱布包裹花芽浸入水中加热至沸腾30 min,有助于提高制片效果。不同染色方式对比发现,爱氏苏木精染色法更适合石榴胚珠切片观察。[结论]通过优化常规石蜡切片方法,得到了适合石榴花芽及胚珠结构观察的石蜡切片方法,该方法同样适用于与石榴花芽及胚珠结构类似的其他结构。     

蕨类植物石蜡切片制作技术探讨

石蜡切片是一种常规的生物组织形态结构研究手段.由于蕨类植物不同世代的样本具有显著差异,仅依常规流程进行石蜡制片与切片,往往不能达到预期的效果.在实际操作中,操作者会遇到一些书本上没有答案的难题,从而影响试验的进程与操作.试验以荷叶铁线蕨(Adiantum reniforme L.var.sinense Y.X.Lin)...     

含羞草石蜡切片的制作

通过对含羞草进行取材、固定、脱水、透明、浸蜡、切片、脱蜡、染色、透明等一系列过程的试验研究,掌握了含羞草石蜡切片的制作方法,总结出了含羞草石蜡切片制作过程中的关键技术,并通过显微观察分析,从解剖学上为研究含羞草的运动机理提供了理论基础。     

动物胃平滑肌组织石蜡切片制作技术研究

为解决动物胃平滑肌组织石蜡切片的制作过程中肌束出现严重分离的问题,设定3组不同的试验方案,分别改变组织脱水、透明和浸蜡时间,制作兔胃和狗胃的石蜡切片,HE染色,光镜观察.结果表明,组织经过50%乙醇180min、70%乙醇180min、80%乙醇660min、95%乙醇(Ⅰ)50min、95%乙醇(Ⅱ)50min、100%乙醇(Ⅰ)50min、100%乙醇(Ⅱ)50min的脱水效果最好;经过二甲苯乙醇(二甲苯:乙醇=1:1)20min、二甲苯5min、二甲苯石蜡(二甲苯:石蜡=1:1)40min的透明效果最好;经过石蜡Ⅰ(52～54℃)60min、石蜡Ⅱ(54～56℃)60min和石蜡Ⅲ(56～58℃)50min的浸蜡效果最好;在42℃水中展片,将水分晾干后,放置在52～54℃的摊片机上40 min的展片效果较好.以上方案均可有效改善动物胃平滑肌组织肌束分离的现象.     

植物石蜡切片技术改进

以植物龙蒿为材料,为提高试验的效率.在大量的试验基础上,对常规植物石蜡切片技术进行了改进.     

绦虫石蜡切片的制作方法

[目的]制作形态完整、结构清晰的绦虫成虫石蜡切片,详细观察其组织结构。[方法]选取扩展莫尼茨绦虫和贝氏莫尼茨绦虫2种绦虫成虫体节,用常规石蜡切片法和改进石蜡切片法分别进行制作。[结果]2种方法均可获得完整性的切片,而改进石蜡切片法制备理想切片的成功率是常规石蜡切片法的5倍。[结论]结果为关于绦虫的教学和科研提供了资料。     

无核葡萄胚珠培养技术研究

对以无核葡萄为母本的9个杂交组合的杂交后代及无核品种的实生后代进行了胚珠培养。结果表明,母本对胚萌发率起着关键作用;大果的胚珠萌发率高;金星无核的最佳胚珠培养基为N itsch+水解酪蛋白100mg/L+活性炭2.0g/L+IAA 1.8mg/L+GA 0.4mg/L+糖20g;喙切可以大大提高金星无核胚珠的萌发率。研究了异常苗、畸形苗、白化苗的成苗情况,确定了相应的成苗培养基;并建立了各杂交组合后代和不同品种的实生后代适宜的快繁培养基。     

海南龙血树茎干石蜡切片技术的研究

根据龙血树的形态结构和植物生理的特点,以海南龙血树茎干为试验材料,探讨龙血树茎干的石蜡切片制作条件。该研究结果可为进一步观察龙血树茎干的微观形态结构提供参考。     

裸鼠淋巴结及肺组织石蜡连续切片的制作体会

裸鼠淋巴结及肺组织石蜡连续切片的制作体会李飞虹，黄剑（广东医学院病理学教研室，湛江５２４０２３）近十年来，我室利用裸鼠进行了鼻咽癌转移及致病机制的科研课题研究。裸鼠淋巴结及肺组织石蜡连续切片或半连续切片的制作，对了解裸鼠移植瘤在这两种组织中的转移情况...     

虎眼万年青胚珠及胚囊发育的研究

采用石蜡切片技术结合扫描电镜技术对虎眼万年青的胚珠及胚囊的发育过程进行系统的观察，发现虎眼万年青的胚珠为倒生胚珠，具双层珠被、薄珠心．具有变形珠被绒毡层。胚囊发育类型为英地百合型，合点端形成胚囊吸器。     

大败育型无核葡萄胚珠培养成苗技术研究

将金星×郑州早红的杂交葡萄果穗在授粉后 60 d采回 ,取出胚珠接种在 1 /2 MS无激素的液体培养基中培养 ,经1 2 0 d后转接到不同处理的培养基中促进胚萌发。试验结果表明 ,1 /2 MS培养基加 BA0 .2 mg/L结合低温处理 3 0 d的培养条件 ,胚萌发率和成苗率最高 ,所获植株占萌发胚的 86% ,占培养胚珠的 45 % ,据此作者讨论和提出了大败育型无核葡萄胚珠培养的成苗技术和培养技术路线     

石蜡切片制片技术的探讨

石蜡切片的制作是组织学和病理学中常用的一种方法。常规制作切片的方法,往往达不到满意的效果。本文根据作者十年的制片经验,摸索其药品的配制,对实验步骤和操作方法等细节方面进行了改良,大大的提高了切片的染色效果和整体质量,明显降低脱片率(低于5%)。     

石蜡切片制作方法的改良

创立了一种时间短、质量高的石蜡切片制作方法。针对动植物材料结构特点不同,在脱水、透明、透蜡、包埋、染色和封固等环节进行了一系列改良,获得了染色清晰、组织结构完整的切片。该文以小蜡树为例,详细介绍了改良后的石蜡切片制作方法。实验结果表明,相比传统制作方法,改良后的制作方法减少了切片制作时间,缩短了实验周期。同时,有效地提高了批量制备石蜡切片标本的整体质量,有利于实验教学和组织学、病理学等领域的研究工作。     

石蜡切片方法的改良

[目的]快速且安全高效制作石蜡切片。[方法]采用不同的方法,对植物材料进行透明和脱蜡以及包埋处理,把材料制成透明的玻片标本,利用正丁醇代替二甲苯作为透明剂和脱蜡剂,其他和传统的石蜡切片方法相同。[结果]正丁醇既能与乙醇混合,又能与中性树胶相融合;正丁醇作用相对较缓和,透明后的组织平整,没有明显的收缩、变形现象,并且不存在透明时间过长的问题,还减少了对实验人员的伤害。[结论]该方法可以快速地制作石蜡切片,且安全有效。     

微波快速石蜡切片法观察水稻叶片组织

 石蜡切片是植物解剖学和病理学观察的重要手段。该方法从取样到切片完成约需一周的时间,操作周期较长。本试验对水稻品种丽江新团黑谷的叶片分别进行了微波石蜡和传统石蜡的切片并用苯胺蓝染色对结果进行比较。在微波石蜡切片中通过对固定、脱水和浸蜡等操作的改进使得该方法只需约3h即可完成切片。微波石蜡切片组织的完整性和染色的效果与传统石蜡切片相近,叶片的表皮、叶肉细胞和维管束等不同叶片结构均可清楚地进行显微观察和拍照。结果显示,可利用微波石蜡方法对水稻叶片进行制片且可较大幅度缩短处理的时间,提高工作效率。     

樟子松松针石蜡切片制备

[目的]以樟子松松针为材料,探索一套适合樟子松松针制备石蜡切片的条件。[方法]在传统植物石蜡切片技术的基础上,结合松针的结构特点,对固定、脱水、粘片、染色等环节进行了系列摸索。[结果]FAA固定剂配比中采用70%乙醇;粘片时材料置于40℃水浴锅中展开,用防脱载玻片捞取,置35℃烘箱24 h;松针切8μm厚度,染色条件为伊红5 min,苏木精1 min。[结论]获得的条件可强化固定和脱水效果,粘片操作简便,不易脱片,染色效果较好。     

植物石蜡切片的固定与保存

石蜡切片是观察植物组织构造常用的制片方法之一。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,才能清晰辨认其形态结构。重点研究了植物石蜡切片的固定与保存,拟为今后固定剂及固定方法的选择提供科学依据。