东方百合快繁培养基优化与脱毒技术研究

摘 要：【研究目的】为实现百合种球的国产化,繁育大量的优质种球,笔者以东方百合的西伯利亚和索邦品种为材料,研究东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较不同的组织培养方法的脱毒效果。【方法】设置不同的激素浓度梯度筛选东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较新鲜百合球茎尖培养、冷藏处理百合球的茎尖培养、鳞片培养、鳞片扦插苗茎尖培养和试管苗茎尖培养等5种组织培养方法的脱毒效果。【结果】试验结果表明,百合茎尖诱导的适宜培养基为MS + 2.0mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA,芽形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA,苗形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.08mg/L NAA,生根的适宜培养基为1/2MS + 0.4mg/L NAA + 4%AC (Active Charcoal)。病毒检测表明试管苗茎尖培养的脱毒效果最好,但成活率较低;冷藏处理百合球的茎尖培养的脱毒效果也较好且成活率较高。【结论】筛选的东方百合各阶段的培养基配方能满足东方百合快速扩繁的技术要求,茎尖培养在东方百合依然是较好的脱毒方法。     

辽东楤木愈伤组织诱导及增殖技术研究

以辽东楤木茎尖、幼叶、嫩茎、休眠芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同种类和浓度的植物生长调节物质诱导丛生芽及再生植株,筛选出适合于辽东楤木组织培养的系列培养基配方.结果表明,愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L(或IAA0.2mg/L),幼叶为愈伤组织诱导的理想外植体,30d继代一次分化效率较高,达到73%;不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA1.0～1.5mg/L十IAA0.1～0.15mg/L+NAA0.1～0.15mg/L;不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L;按1∶1混配的蛭石与草炭为试管苗移栽最适基质.     

四季凤仙的组织培养及快繁体系的建立

以四季凤仙的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,对四季凤仙的组织培养及快繁技术进行了研究。结果表明:最佳的外植体除菌方式为5%的NaClO处理5min;四季凤仙的最佳不定芽诱导培养基为:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.10mg/L+GA30.01mg/L;芽的最佳增殖培养基为:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L;最佳生根培养为:1/2MS+IAA1.0mg/L。     

草莓组织培养与快速繁殖技术

以"红颜"草莓的匍匐茎尖为外植体,选择附加不同激素组合的MS培养基为诱芽培养基和继代培养基,以1/2MS为生根培养的基本培养基,对"红颜"草莓的组织培养及快繁进行研究。结果表明:草莓茎尖在MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基上能很好地诱导不定芽形成,其诱导率高达80%;继代增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L+GA1.0 mg/L时增殖系数较高;生根培养基为1/2MS+IAA0.5 mg/L时生根率可达99%,移栽至田间后,成活率高且匍匐茎繁殖能力强。     

玉蝉花愈伤组织的诱导及植株再生研究

以玉蝉花的茎尖和嫩叶为外植体进行愈伤组织诱导和再分化研究,成功建立了通过茎尖愈伤诱导途径的植株再生体系。研究得出:玉蝉花茎尖诱导愈伤的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,最高诱导率为51.51%;不定芽诱导的培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+KT 1.0mg/L,分化率达到72.31%,平均分化不定芽数为5.81;不定芽生根最佳培养基为MS+NAA 1.5mg/L,生根率为100%。     

红香椿组织培养和快速繁殖研究

摘要：以“红香椿一号”的茎段为外植体进行植物组织培养,采用四因素三水平正交设计法试验筛选出生根、诱芽的适宜培养基,以不同培养基的生根数为鉴定指标,筛选出适宜红香椿一号茎分化苗生根的培养基,以不同培养基的增芽数为鉴定指标,筛选出适宜红香椿一号茎分化丛生芽的培养基,进而掌握不同生长素之间的适宜配比。通过试验研究表明：在9个培养基中生根最佳的培养基是（MS+6-BA0.1mg/L+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L+ZT0.2mg/L）;增殖适宜的培养基是 (MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+IBA.01mg/L+ZT0.1mg/L)。     

草莓茎尖组织培养和快繁体系的建立

以草莓主栽品种鬼怒甘的茎尖为材料,研究了Hg Cl2浓度及其消毒时间、基础培养基、白砂糖、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)、吲哚乙酸(IAA)、活性炭(AC)等9种主要因素对草莓茎尖组织培养的影响,分析筛选出了一套能够产出具有优良素质草莓种苗的组织培养技术,建立起了比较完善的草莓茎尖组织培养快繁体系。结果表明:不同因素对草莓茎尖组织培养的影响较大,尤其是影响草莓的形态发育(分化、增殖、生根和生长)。最佳外植体消毒方法是0.20%Hg Cl_2 8~11min,适合初代培养的培养基为MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+NAA 0.01mg/L+白砂糖30g/L,增殖继代培养基为MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+NAA 0.01~0.05mg/L+白砂糖20~30g/L,生根培养基为MS+NAA 0~0.01mg/L+IBA 0~0.1mg/L+IAA 0~0.1mg/L+白砂糖30g/L。     

丰花月季YJ‘2004-2’组培快繁技术研究

以丰花月季YJ‘2004-2’带腋芽茎段为外植体,MS为基本培养基,通过不同浓度的激素研究丰花月季YJ‘2004-2’组培快繁技术,建立了丰花月季YJ‘2004-2’的快繁体系。结果表明:(1)芽的最佳诱导培养基是MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.01 mg/L;(2)芽的最佳增殖培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L;(3)生根的最佳培养基是1/2MS+NAA0.1mg/L;(4)组培苗移栽到蛭石基质时,成活率高达83.3%。     

驱蚊香草快繁体系的建立及工厂化育苗主要影响因素研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片作外植体,在含不同激素的不同培养基上进行丛生芽的诱导、芽的继代增殖、芽生根与移栽研究,以快速获得再生植株。结果表明,丛生芽诱导培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L较好,诱导率为96%;增殖培养基以MS（B5）+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L较好,增殖系数达8倍以上,且增殖芽生长好;壮苗培养基为MS（B5）+6-BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L为好;生根培养基以1/2MS+NAA0.1 mg/L和MS+IBA0.2 mg/L为最佳,生根率达100%,幼苗生长势旺。影响工厂化育苗的主要因素有激素浓度、继代次数和移栽管理     

罗汉果微茎尖组织培养与快速繁殖

剥取罗汉果微茎尖进行培养,探讨不同激素配比条件下罗汉果快速繁殖体系的建立.结果表明:罗汉果茎尖最佳诱导培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.05 mg/L+ GA30.1mg/L,增殖培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ IBA 0.1 mg/L+ GA30.1 mg/L,生根培养基为1/2 MS+ IBA 1.0 mg/L +0.1％活性炭,生根率为100％,移栽成活率可达93.33％.     

鸡冠花离体快繁及多倍体诱导

以鸡冠花顶芽为外植体,研究其离体快繁程序并在无菌体繁殖条件下探索了秋水仙素溶液不同浓度和时间处理对鸡冠花的诱变效应.快繁研究结果显示:最适初代培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/L;以芽和茎段为培养对象诱导产生不定芽的最适培养基分别是MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L,MS 6-BA1.0 mg/L NAA 0.02 mg/L,最佳生根培养基是1/2 MS IBA 0.4 mg/L.采用浸泡法将鸡冠花营养芽在0.05%、0.1%、0.15%和0.2%不同秋水仙溶液浓度下分别处理12 h、24 h、36 h和48 h,并对诱导处理后获得的再生植株进行鉴定,得出以0.15%秋水仙素溶液浸泡36 h为诱导多倍体的最佳处理组合,诱导率达23.3%.     

香石竹离体组织培养特性的研究

本实验以香石竹当年生带腋芽的茎段为外植体,研究它的诱导分化、继代增殖、生根培养各阶段离体培养的特性.结果表明:附加1.5mg/LBA和0.1 mg/LNAA的MS培养基适合腋芽的萌发诱导,诱导率达100%;附加0.5mg/LBA和0.1 mg/L NAA的培养基适合香石竹的增殖,增殖率达340%;附加1.0mg/L NAA的培养基为适宜的生根培养基.     

千层金组培快繁技术研究

以千层金茎段为外植体进行离体培养,通过试验筛选出各阶段适宜的培养基,建立了千层金组培快繁体系。结果表明：在诱导不定芽的培养基中,MS+6-BA 1 mg/L的芽萌发率最高,芽体健壮;丛生芽继代增殖培养基为改良MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L;生根培养基为1/2MS+1号生根剂0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L,生根率达100%,且根系发达;栽培基质以椰糠+腐殖土=2:1较理想,移栽成活率为89.3%。     

3个铁线莲品种组培快繁体系的建立

本试验以铁线莲‘卡西斯’(Clematis Cassis)、‘大河’(Clematis Taiga)、‘倾盆大雨’(Clematis Cloudburst)为外植体,研究在3、4月外植体的消毒最佳时长时间,结果表明,3、4月中,‘卡西斯’的最佳消毒时长分别是3 min和4 min,‘大河’的最佳消毒时间均为4 min,‘倾盆大雨’的最佳消毒时长分别为3 min和4 min;以‘卡西斯’、‘大河’、‘倾盆大雨’带芽茎段为外植体,以3种激素不同浓度配比实验,筛选出3个铁线莲品种增殖继代培养的最佳配方分别为:‘卡西斯’:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.1 mg/L VC+20 g香蕉;‘大河’为:1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/LVC+20 g香蕉;‘倾盆大雨’为:1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L KT+0.01 mg/L NAA+0.1 mg/L VC+20 g香蕉。2 mg/L的NAA可以显著提高生根率,但即使不进行生根诱导,培养时间超过30 d后各品种也会相继出现生根现象。     

夏枯草(Prunella vulgaris)组织培养和快速繁殖

以夏枯草的叶片、茎节、顶芽为外植体在含不同浓度的6-BA和NAA的MS培养基中培养,比较其增值率和分化率.发现以茎节为外植体,诱导不定芽的最佳培养基为MS 3.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA,分化率为100%,增殖倍数为6.8.以顶芽为外植体,不定芽的最佳培养基为MS 3.0 mg/L 6-BA 0.05 mgm NAA或MS 3.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA,分化率分别为88.2%和84.6%,增殖倍数分别为5.8和6.2.最佳生根培养基为1/4MS NAA 0.5 mg/L,生根率为100%.将生根的组培苗经过驯化移栽后,成活率为93%.表明,叶片难以分化;茎节的分化率效果最好;顶芽的分化能力介于二者之间.     

切花玫瑰红唇的组织培养快繁技术研究

以切花玫瑰红唇的带腋芽茎段为材料,研究HgCl₂灭菌时间、茎段粗细度、基础培养基、6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）、α-萘乙酸（NAA）、赤霉素（GA₃）、吲哚丁酸（IBA）、吲哚乙酸（IAA）、活性炭（AC）对切花玫瑰组织培养的影响,分析筛选出了一套能够育出具有优良综合素质切花玫瑰种苗的组织培养技术,建立了切花玫瑰的组织培养快繁技术体系。结果表明：不同因素对切花玫瑰组织培养的影响较大,尤其是对玫瑰的分化、增殖、生根和生长等植物形态发育的影响;外植体的最佳灭菌方法是用0.20% HgCl₂灭菌8min;初代的适合培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+GA₃ 2.0mg/L;增殖继代的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.01mg/L+GA₃ 1.0mg/L;生根的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 1.0mg/L+AC 0.1%。该技术可推广应用于切花玫瑰工厂化组织培养育苗。     

降香黄檀愈伤组织培养与植株再生研究

为了实现降香黄檀工厂化快速繁殖和扩大栽培,并为降香黄檀抗寒基因导入打下一定的基础,以降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖为外植体,MS为基本培养基,对各器官愈伤组织诱导与分化的最适培养基成分进行了研究。结果表明,可从降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖成功地进行愈伤组织培养和植株再生。茎段、叶片、根尖诱导愈伤组织的最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L、1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L和1/4MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;茎段、叶片、根尖的愈伤组织诱导丛生芽最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L、1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L和1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L;茎段、叶片、根尖来源的单芽,其最佳生根培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L和MS+NAA 2.0 mg/L。比较茎段、叶片与根尖的愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率和单芽生根率,得出以无菌实生苗根尖作为外植体是降香黄檀愈伤组织培养和植株再生的最佳选择。     

树状月季‘2004-4’的组织培养及快繁体系的建立

以树状月季‘2004-4’的茎段为外植体,MS为基本培养基,研究不同组合及浓度的植物生长调节剂对树状月季快繁体系建立及不同配比的基质对组培苗移栽成活的影响。结果表明:(1)芽的最佳诱导培养基:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L;(2)芽的最佳增殖培养基:MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.1mg/L;(3)生根的最佳培养基:1/2MS+NAA 0.05mg/L;(4)组培苗移栽到东北山土和珍珠岩比例为2∶1的混合基质时,成活率高达74.2%。     

铁皮石斛组织培养及快繁技术研究

为建立铁皮石斛快繁技术体系,给生产提供参考,研究了铁皮石斛组织培养过程中的灭菌方法、腋芽诱导、原球茎的诱导、增殖与分化的最佳培养基配方。以铁皮石斛成熟茎段为外植体,探讨1/2MS培养基或MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛组织培养过程中各生长、分化阶段的影响。研究表明,腋芽诱导最适宜培养基的配方为MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L,诱导率达91.28%,平均芽数达2.34;原球茎诱导的最适宜培养基为1/2MS+ 6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,诱导率可达66.67%;原球茎增殖最佳培养基为1/2MS+ 6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,原球茎分化最适宜培养基为1/2MS+ NAA 1.0 mg/L+ 6-BA 3.0 mg/L+ KT 1.0 mg/L,最适宜生根的培养基配方为1/2MS+NAA 2.0 mg/L+ AC 0.5 g/L。