百脉根WRKY基因家族生物信息学分析

WRKY转录因子是一个超家族的调节因子,参与植物的多种生物过程和逆境胁迫反应。然而,在百脉根中对WRKY家族还没有相关的研究。本研究共鉴定出79个LjWRKYs基因,它们不均匀分布在各染色体上的基因位点编码,与拟南芥At WRKYs进行系统发育分析,分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类。保守基序和外显子-内含子数目表明79个LjWRKYs在不同亚簇中均具有较大的差异,顺式作用元件结果显示在上游2 000 bp启动子区域包含多种逆境胁迫、激素和生长发育相关的元件。共线性结果有36对片段复制和1对串联重复复制共线性基因,且Ka/Ks均小于1。本研究通过分析百脉根WRKY基因家族的基本结构与性质,为深入研究百脉根WRKY基因家族提供了基础。     

百脉根离体再生体系的优化

本研究以百脉根叶片、叶柄、茎段、花柄和根组织为外植体,比较了它们在不同激素配比培养基中的愈伤组织、不定芽及不定根的分化情况,优化并建立百脉根组织培养再生体系。研究结果显示:除根外,其它组织均可通过组织培养获得再生植株;外植体类型是影响愈伤组织、不定芽及不定根诱导的主要因素,叶片外植体的诱导效果最好。优化的百脉根组织培养再生体系为:使用叶片外植体,愈伤组织诱导培养基为MS+3.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA、芽分化培养基为MS+0.3 mg/L KT、生根培养基为1/2 MS+0.4 mg/L IBA。通过该体系60~75 d可获得百脉根再生植株,约为无性繁殖周期的1/3~1/2。     

百脉根LjCaM4启动子的克隆与功能分析

为克隆并分析百脉根LjCaM4启动子序列,本研究以百脉根(Gifu-129)为实验材料,根据LjCaM4基因序列设计特异性引物进行染色体步移法扩增得到启动子序列,并对其进行生物信息学分析.同时构建载体瞬时转化拟南芥,通过β-葡萄糖苷酶染色法染色后检测所获得的启动子活性.经两次连续步移,最终得到LjCaM4启动子序列为2...     

青藏高原野生百脉根种子休眠及萌发特性的研究

百脉根(Lotus corniculatus L.)是一种富合营养物质的豆科牧草,适应酸性、干旱及贫瘠的土壤,在我国分布广泛,然而种子的休眠特性限制了它的利用.为此,以青藏高原亚高山草甸的野生百脉根种子为试验材料,通过擦破种皮、化学腐蚀、低温冷冻等方法研究打破种子休眠的办法.研究结果表明,野生百脉根种子的硬实率高达92.3％,种皮厚度为(65.63±2.26)μm,比对照高出60.4％ (p＜0.01),可见野生百脉根种子以种皮厚、透水性差为特点.试验还发现,擦破种皮后,种子的发芽率由8.7％提高到85％;浓度为98％的浓硫酸浸泡5,15,25 min均能有效地降低种子的硬实率,提高发芽率,其中以15,25 min处理效果最好,相比而言,浓度为40％的NaOH处理效果不明显.GA3、低温湿沉积+GA3及-4℃,-20℃及液氮超低温冷冻能显著提高发芽率.     

百脉根侧部花瓣发育突变体的研究(英文)

为了研究调控花瓣形状发育的基因网络,我们在豆科模式植物百脉根中筛选影响侧部花瓣发育的突变体。我们鉴定了两个独立的突变体:kew2和kew3。这两个突变体有相似的表型:突变体的侧部花瓣转化为类似野生型的腹部花瓣。遗传分析表明kew3和已报道的kew1等位,由同一个单隐性基因位点控制。kew1突变体定位于基因座位KEW1,与豌豆K位点直系同源。kew2的遗传分析暗示在侧部花瓣发育中有其它遗传因子与kew有相互作用。对这些突变体的分析和基因克隆有助于阐明两侧对称花型发育的调控机制和理解两侧对称花型的进化途径。     

百脉根ACC氧化酶基因LcACO1的克隆及序列分析

植物激素乙烯参与植物生长发育多个生理过程的调控。ACC氧化酶是植物乙烯合成途径中的关键合成酶。本研究依据其它物种ACC氧化酶序列信息设计简并引物,并结合RT-PCR和快速扩增c DNA末端技术从牧草百脉根中首次克隆到ACC氧化酶基因的全长c DNA序列,命名为LcACO1。LcACO1全长c DNA为1 012 bp,具有一个924 bp ORF可编码307个氨基酸残基。生物信息学分析表明,LcACO1是含有Fe2+依赖的加氧酶结构域的稳定亲水蛋白,没有信号肽和跨膜结构域,亚细胞定位于细胞质。与其它植物中的ACO蛋白进行同源性比对显示,LcACO1蛋白与鹰嘴豆中ACO蛋白的一致性高达90%。实时荧光定量PCR表明,LcACO1基因在百脉根不同组织器官中差异表达,根中表达量最高,推测其主要在根的生长发育调节方面发挥作用。     

低温胁迫对转ChIFN-α基因百脉根抗寒生理生化的影响

为研究转Ch IFN-α基因百脉根的低温生长特性,对其进行4℃低温离体水培和可溶性蛋白(SP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和脯氨酸(Pro)的测定分析,探讨低温胁迫对转Ch IFN-α基因百脉根的影响及机制。研究发现,25 d低温处理期间,百脉根植株均生长迟缓,野生型(WT)还出现叶片枯黄和茎基部腐烂等冻害现象。转基因百脉根(TP)植株同期的MDA含量比WT低1.03倍(p0.01),WT的MDA下降幅度仅为TP植株的86%。TP同期的SP、SOD、Pro含量均较WT高(p0.01),且出现的降幅小。TP同期的SP、SOD和Pro含量分别是WT的1.21倍、1.27倍和1.72倍(p0.01),WT同期的SP和SOD降幅分别是TP的2.26倍和1.93倍(p0.01),TP植株的SOD含量峰值比WT提前5 d,TP的Pro在中后期增至WT植株的150%和129%。结果表明,转基因百脉根具有较好的低温耐受性和耐受生理基础,这对其在高寒山区的进一步应用及管理提供了基础依据。     

观赏药用植物——铁线莲

铁线莲类植物属毛茛科，约300种，园艺栽培品种较多，多分布在北半球温带地区，我国约100种。新疆野生分布有全缘铁线莲、准噶尔铁线莲、甘青铁线莲、粉缘铁线莲、东方铁线莲、西伯利亚铁线莲及其变种伊犁铁线莲，群系分布区域非常广大。新近玛纳斯平原林场又引入了大叶铁线莲（牡丹藤、草牡丹）和转子莲（大花铁线莲），丰富了新疆铁线莲种类资源．     

提高中国粮食安全方法探究——基于深根豆科牧草的利用

作为最大的发展中国家,中国仅占世界耕地总量的10%,却必须保障世界22%人口的温饱,粮食供应十分紧张,粮食安全必须得到充分的重视。为缓解粮食供应压力,以蛋白牧草代替粮食。试用黄花草木樨进行栽培,通过测得其蛋白质、氨基酸、脂肪和多糖含量与粮食营养含量进行当量计算,同时将进行栽种试验的初期和末期的土壤采样,对比两次测得的土壤理化特征值。测得结果如下,黄花草木樨粗蛋白质含量达到鲜重的17.5%,且营养配比合理,可以替代粮食作物,替代率可达35%左右;另外,栽培黄花草木樨的退化土壤的盐、碱含量、pH和钠离子交换率明显下降,土壤有机质和土壤全氮含量明显升高。基于此,开发蛋白质牧草可提高中国的粮食安全水平,并且对其栽种的土壤环境并无毒害污染且具有明显的改良效果。。     

百脉根钙调素蛋白(LjCaM3)基因的克隆及表达分析

钙调素(calmodulin,CaM)是一种广泛存在于真核生物中的钙感受器,参与各种植物生理活动的信号转导。在高等植物中存在多个钙调素基因编码多个不同蛋白亚型的现象,并且不同的蛋白亚型在各器官的不同发育阶段可能有着不同的表达模式或转录调控作用。本研究通过3'-RACE技术克隆获得LjCaM3-1和LjCaM3-2分别为637 bp和746 bp,并且编码同一个蛋白LjCaM3。LjCaM3-2的3'-UTR中具有AU富集元件可能对其mRNA的降解起着调节作用。通过荧光定量PCR实验,发现LjCaM3蛋白在百脉根的根及根瘤中的相对表达量显著高于茎、叶、花和豆荚。LjCaM3很有可能参与了百脉根根的生长发育,为进一步探讨该基因的生物学功能提供了一定的理论基础。     

含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化

在本研究中,用限制性内切酶Nco Ⅰ和Bgl Ⅱ从中间载体pMD18zeolin和pMD18zein 上切下zeolin基因(约1 600bp)和γ-zein基因(约720 bp),将其定向连接在经相同酶切的质粒载体pCAMBIA1302上,构建成植物表达载体pCBzeolin和pCBzein.采用冻融法将pCBzeolin和pCBzein导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株LBA4404,利用该菌株转化百脉根(Lotus corniculatus L.).经过共培养、筛选分化、再生,得到抗件植株.对抗性植株进行了PCR、RT-PCR检测表明,γ-zein和zeolin基因已经整合到百脉根基因组中,在核酸水平得到了表达.含硫氨基酸数据分析表明,转zeolin基因植株含硫氨基酸含量极显著高于转γ-zein基因植株和对照植株的含量(P＜0.01),但转γ-zein基因植株与对照植株间差异不显著.     

百脉根原生质体制备酶解液优化及再生壁纤维素含量分析

为了解百脉根细胞壁形成中纤维素含量的变化,以其成熟叶片为材料,筛选优化原生质体分离制备的酶解液组成和制备培养原生质体,并测定原生质体再生壁形成过程中的纤维素含量。结果表明,优化后的酶解液配比为:1.00%纤维素酶+1.00%果胶酶+0.50%半纤维素酶,该酶液制备的原生质体产量和活力分别为1.12×106个/g·FW和68.7%。纤维素含量随着细胞壁的形成而逐渐增加,原生质体在培养1 d、3 d、5 d和7 d时,其纤维素含量分别占再生壁干重的1.13%、4.17%、8.08%和12.79%。     

观赏食用俱佳——胡萝卜

把蔬菜当作花卉栽在盆中,且赏且食,则寻常之家便多了一点自然的田野气息。您不想栽上一盆吗? 欢迎有这方面经验的朋友来稿。     

观赏花木——石笔木

石笔木(Tutcheria shectabi-lis Dunn),山茶科石笔木属。小乔木,枝条淡灰白色,叶革质具光泽,长椭圆形,边缘有浅锯齿,基部全缘。花淡金黄色,单独顶生,直径约6厘米;萼片三列,有金黄色绒毛;花瓣5瓣,顶端凹缺;雄蕊多数,花丝基部与花瓣贴生;子房5室,有绒毛。蒴果球形,直径     

观赏树种——辽梅

农七师林业站位于天山北麓准葛尔盆地的南缘（奎屯市），北纬44°35′，东经84°55′，海拔高度464m，年平均温度7_2cc，年绝对最低温度-36．4℃，1月份平均温度-17．2℃。冬季冻土深度1m，无霜期181d，年降水量178．8mm，土壤条件为中性黄黏土。1998年，农七师林管站从辽宁果树研究所引进观赏树种一辽梅，引进后按株行距0．8m×1．1m种植，生长期每年灌水5～7次。     

药用观赏两相宜——野牡丹

野牡丹虽沾“牡丹”之名,却与牡丹非亲非故,两者之间没有任何血缘关系。它又称金石榴、活血丹,为野牡丹科野牡丹属常绿小灌木。通常株高30～120厘米,茎钝四棱形或近圆形,茎和叶柄密被鳞片状糙伏毛,叶对生,长椭圆形至圆卵形,正反面皆密被长柔毛。聚伞花序顶生,5片玫瑰红或粉红色花瓣,中心是金黄色雄蕊,甚为娇丽,蒴果长1～1.5厘米。花期5～7月,果期10～12月。可用于庭院点缀栽培,也很适合小型盆裁。基本习性野牡丹原产于热带低海拔以下的山坡松林下。我国广东、广西、云南及台湾等地均有分布。性喜温暖气候,生育适温约20～30℃,冬季要求不低于10℃,喜阳光,忌强光直射。耐旱,但土壤湿润则生育较旺盛。     

牧草——墨西哥玉米栽培技术

墨西哥玉米是一种由国外引进的优良牧草.目前在我国南、北方都有示范性栽培.它以其适口性好、产草量高、营养丰富、可与作物套种、轮作等特点,越来越受到农区、牧区群众的重视.     

锌锰钼配施技术在鸡脚草和百脉根混播草地中的应用

针对河南省土壤特点,锌锰钼肥的生理功能以及牧草生产利用中存在的问题,从2000年起对Zn、Mn和Mo肥3种微肥在鸡脚草（鸭茅）(Dectylis glomerata L.)和百脉根(Lotus corniculatus L.)混播草地进行了应用性研究,详实地探讨三种微肥的应用范围和具体措施。研究证明：Zn肥对鸡脚草和百脉根混播草地的有效范围集中在200~600mg/kg之间,最佳利用浓度为200~400mg/kg,能够促进牧草光合作用和提高种子产量,对牧草生产没有影响。200mg/kg的Zn肥与500mg/kg Mn肥和300mg/kg的Mo肥三者配施下,不但提高牧草的光合能力和种子产量,而且也显著地提高牧草产量（11.8%）。     

风景园林中的瑰宝——观赏海棠

观赏海棠在一年四季中都能唤起人们的欣赏兴趣:春天的新叶色泽精美,随着花朵的逐渐开放,其五彩斑斓的色彩令人叹为观止;当花季结束时,其叶片的不同色泽和质感同样是园林中的一道亮丽的风景,尤其是到了秋季,观赏海棠的叶片和果实将呈现出画家手中调色板一样的艳丽色彩,落叶后果实显得更加光彩照人,冬雪无疑是观赏海棠果实、枝条和树姿的绝妙背景。所以有人称观赏海棠为“园林风景中的瑰宝”。文章分别介绍了观赏海棠的观赏性状、相关的栽培养护技术及部分新品种。     

春花观赏草——长芒草

长芒草(Stips bungeana)为禾本科针茅属植物. 　　针茅属植物多为冷季型,喜光,宿根,自然生长于温带地区的草甸和山坡上.细茎针茅(Stipa tenuissima)是其中最受欢迎、应用最广泛的一种.它在北京地区五月抽穗开花,长长的芒为植株增添柔美与飘逸的魅力,但其在北京露地越冬困难,不宜大量推广应用.……