基于天蚕素A和胡蜂毒素的杂合肽设计及活性鉴定

为了进一步改善胡蜂毒素（mastoparan,MP）的抗菌、抗肿瘤活性并减少细胞毒性,本研究通过分子杂合方法对其进行改造,并初步鉴定设计的杂合多肽的生物活性。以天蚕素A的N-端1-8序列片段和胡蜂毒素的保守序列为模板进行杂合设计,获得一条新型杂合肽KL-21。以胡蜂毒素MP-L作为参照,采用生物信息学方法、微量倍比稀释法、杀菌动力学方法、溶血试验、CCK-8法分别对KL-21和MP-L进行理化参数分析、结构预测、最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）测定、杀菌动力学研究、溶血活性测定及肿瘤细胞毒性试验。结果表明,KL-21可以在短时间内迅速杀灭细菌,对革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌）和阴性菌（大肠杆菌）的MIC均为4~8 μg/mL,MBC均为8~16 μg/mL;KL-21对真菌（白色念珠菌）的最小MIC为32 μg/mL,MBC为64 μg/mL。兔红细胞溶血试验表明,KL-21在128 μg/mL时溶血活性仅为20%,较MP-L的溶血活性明显降低。细胞毒性试验表明,KL-21对肺癌细胞A549具有良好的抑制作用,16 μg/mL的体外抑制率达86%。研究表明,新型杂合肽KL-21较MP-L的抗菌和抗肿瘤活性有较大提高,细胞毒性显著降低,可以作为先导肽进一步研究和开发。     

天蚕素A-马盖宁杂合肽对小鼠小肠黏膜结构、小肠黏膜免疫功能和肠道菌群的影响

本试验旨在研究天蚕素A-马盖宁杂合肽对小鼠小肠黏膜结构、黏膜免疫功能和肠道菌群的影响。选取18只健康且体重相近的BALB/c小鼠随机分成3组:对照组(生理盐水0.75 m L/d灌胃)、低剂量杂合肽组(0.26 mg/m L的杂合肽0.75 m L/d灌胃)、高剂量杂合肽组(0.52 mg/m L的杂合肽0.75 m L/d灌胃)。试验期为6周。结果表明:1)2个杂合肽组十二指肠绒毛长度均显著大于对照组(P<0.05),各段小肠的隐窝深度均显著低于对照组(P<0.05),各段小肠绒毛长度/隐窝深度均显著高于对照组(P<0.05)。2)与对照组相比,2个杂合肽组各段小肠黏膜内免疫球蛋白A阳性表达水平均显著升高(P<0.05)。3)2个杂合肽组小肠黏膜内白细胞介素(IL)-2、干扰素-γ(IFN-γ)及IL-4含量均显著高于对照组(P<0.05),而IFN-γ/IL-4各组之间差异不显著(P>0.05)。4)2个杂合肽组盲肠内容物中的大肠杆菌数量均显著低于对照组(P<0.05),双歧杆菌与乳酸杆菌数量均显著高于对照组(P<0.05)。由此得出,天蚕素A-马盖宁杂合肽灌胃能改善机体小肠黏膜结构;可促进免疫球蛋白A的表达来提高小肠黏膜免疫防御功能;可促进IL-2及IFN-γ的分泌来提高肠道细胞免疫水平,促进IL-4的分泌以提高肠道体液免疫水平并能够保持辅助性T细胞(Th)1/Th2的平衡状态;可有效降低肠道致病菌大肠杆菌的数量并显著增加肠道益生菌双歧杆菌和乳酸杆菌的数量。     

杂合抗菌肽Mel-MytB在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性测定

为了获得抗菌活性较强的抗菌肽,将蜂毒肽（Melittin）与贻贝素B （Mytilin-B）的核心功能序列杂合,以Melittin （3-14）和Mytilin-B （13-27）的成熟肽段作为模板序列,根据巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）偏好密码子,采用SOE方法合成杂合抗菌肽Mel-MytB（MEM）基因。改造后的基因克隆到pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-MEM,而后经Sac Ⅰ酶切线性化后电转入毕赤酵母受体菌X-33。结果表明,在醇氧化酶（AOX）启动子调控下,分子质量约3.0 ku的Mel-MytB杂合抗菌肽获得表达,具有热稳定性和酸稳定性,煮沸40 min、pH 2.0~10.0范围内抑菌活性基本不变。抗菌特性研究结果表明,该表达产物具有广谱抗菌活性,其对大肠杆菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923/ATCC6538、肠道沙门氏菌ATCC13076、鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、副溶血弧菌ATCC17802、创伤弧菌ATCC27562、枯草芽孢杆菌ATCC6633的MIC值分别为5.1、2.2、2.0、4.6、7.6、9.4、13.2和59.4 μg/mL。因此,重组抗菌肽Mel-MytB在疾病防治和动物饲料添加剂等方面具备较好的应用前景。     

抗菌肽Tachyplesin Ⅰ的分子设计、结构与活性分析

本研究旨在抗菌肽Tachyplesin Ⅰ(TP Ⅰ)的结构活性基础上,重新设计一种全新的抗菌肽TP Ⅰ-Y4。保持母肽链长与电荷数不变,将序列中形成TP Ⅰ两个二硫键的4个半胱氨酸用酪氨酸进行替换后得到TP Ⅰ-Y4。经生物信息学软件分析,与TP Ⅰ相比,TP Ⅰ-Y4的热稳定性更好,亲水性更强,同时具有与母肽相似的结构与抗菌活性。化学合成后经圆二色谱检测发现,TP Ⅰ-Y4在水相及在模拟细胞膜疏水环境的50%三氟乙醇中都表现出β-折叠结构,疏水环境中TP Ⅰ-Y4的β-折叠含量高于水相,也高于不同环境中的TP Ⅰ。抑菌试验表明,TP Ⅰ-Y4对细菌和真菌都有较强抑菌活性,且对细菌的抑菌活性强于TP Ⅰ。TP Ⅰ-Y4对小鼠红细胞溶血性降低,并保留了很强的内毒素中和能力,浓度为40 μg·mL^-1时中和率可达50%以上。TP Ⅰ-Y4抗菌活性的提高以及溶血活性的降低,可能与β-折叠强形成者酪氨酸的替代有关,进而导致抗菌肽分子中β-折叠结构增强。     

鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体的制备及鉴定

为制备效价高、特异性强的鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体,并对制备的多克隆抗体进行鉴定和初步应用,采用Fmoc固相化学合成法合成鸭抗菌肽Dcath的成熟肽段,与血蓝蛋白偶联后,与弗氏完全佐剂乳化,按照免疫程序免疫接种大白兔,采集免疫兔血清,亲和层析纯化多抗,ELISA检测多抗效价,以制备的多抗为一抗,用Western blot检测鸭血外周异嗜性粒细胞中Dcath的表达,用免疫组化(IHC)检测鸭回肠、肾脏组织中Dcath的表达。结果显示,合成的鸭抗菌肽Dcath纯度达98.28%,经ELISA检测,纯化的兔多抗效价达到1∶128000,经Western blot检测,鸭血外周异嗜性粒细胞大量表达Dcath,经免疫组化检测,鸭Dcath在肾脏及回肠组织细胞中广泛表达。结果表明,成功制备了鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体,效价高、特异性强,为深入研究鸭抗菌肽Dcath的生物学特性提供了技术支持。     

鸡肠道抗菌肽的提取及活性研究

取新鲜鸡肠黏膜超声波破碎,乙酸浸提,经Sephadex G-50层析后,收集具有抑菌活性的组分进行超滤离心,抑菌实验表明滤过物具有抑菌活性.滤过物经SDS-PAGE分析为一个条带,分子量约为6.078KD,得到电泳纯的鸡肠道抗微生物肽.该肽具有一定的耐热性,但经90℃以上热处理后活性下降较大;pH值对其活性影响较大,在pH6～8时活性最强.     

抗菌肽Cecropin P1基因表达载体构建与表达

根据大肠杆菌的密码子偏好性,人工设计并合成了3条抗菌肽Cecropin P1基因寡核苷酸片段,通过PCR扩增得到抗菌肽Cecropin P1基因,将此基因克隆到原核表达载体pMAL-p2X中,然后将重组质粒pMAL-p2X-Cecropin P1转化E.coliTB1,经IPTG诱导进行融合表达,以Amylose Resin亲和层析纯化。通过SDS-PAGE分析,融合蛋白MBP-Cecropin P1表达与纯化成功。抗菌肽Cecropin P1基因的成功表达为进一步研究其抗菌活性、抗菌机理及应用研究打下基础。     

抗菌肽添加量对杂交鲟生化指标的影响

为研究抗菌肽添加量对杂交鲟血清和组织免疫相关指标和抗损伤能力的影响。挑选体格健壮、大小一致的杂交鲟（俄罗斯鲟Acipenser gueldenstaedtii♀×史氏鲟Acipenser schrencki Brandt♂）200尾,随机分成4组。对照组投喂基础饲料,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础饲料中添加400、800和1 200 mg/kg的抗菌肽,在（16.0±1.0）℃水温条件下养殖30 d。结果表明,摄食添加抗菌肽的杂交鲟,其血清和组织中白蛋白（ALB）和总蛋白（TP）含量随抗菌肽质量浓度的增加先增后减,其中Ⅱ组杂交鲟血清和组织中ALB和TP含量显著高于对照组（P<0.05）。血清中谷草转氨酶（GOT）和乳酸脱氢酶（LDH）活性随抗菌肽质量浓度的增加先降低后增加;Ⅰ组杂交鲟血清和组织中GOT活性显著低于其他组（P<0.05）;而Ⅲ组GOT和LDH活性显著高于其他组（P<0.05）。杂交鲟组织中总胆固醇（TCHO）含量随抗菌肽质量浓度的增加逐渐减少,Ⅲ组TCHO含量在组织中显著低于其他组（P<0.05）。溶菌酶（LZM）活性随抗菌肽质量浓度的增加而逐渐增加,Ⅱ、Ⅲ组杂交鲟心脏、脾脏和小肠中LZM活性显著高于其他组（P<0.05）。因此,在基础饲料中添加抗菌肽可有效提高杂交鲟的部分非特异性免疫能力和抗损伤能力,抗菌肽添加剂量在400~800 mg/kg时效果最佳。     

CecA-Mag及其突变体在Pichia pastoris中的表达及抗菌活性试验

参考相关天蚕素类抗菌肽的作用机制及抗菌肽结构与功能关系的假说,设计了杂合肽CecA-mag的3个突变体并利用重组聚合酶链式反应定点诱变技术,使突变体得以合成,利用琼脂孔扩散法检测CecA-mag和其突变体对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌等临床分离菌株的抑菌效价.结果显示,3个突变体的抑菌活性比CecA-mag分别提高了1....     

天蚕素和合生素对AA肉鸡小肠黏膜形态和小肠免疫细胞的影响

为研究日粮中添加天蚕素、合生素对AA肉鸡小肠黏膜形态及免疫细胞的影响,试验选用480只1日龄健康AA肉鸡,随机分为4组,每组4个重复,每个重复30只鸡。对照组（Ⅰ组）饲喂基础日粮,试验组（Ⅱ~Ⅳ组）分别在基础日粮中添加0.5%天蚕素、0.3%合生素、0.5%天蚕素+0.3%合生素。试验期42 d。结果显示,与Ⅰ组相比,Ⅳ组十二指肠、回肠绒毛高度极显著升高（P<0.01）;Ⅱ组空肠和回肠、Ⅲ组小肠各段隐窝深度显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）;Ⅱ、Ⅲ组小肠各段和Ⅳ组十二指肠、回肠绒毛高度/隐窝深度显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;Ⅱ组空肠绒毛宽度显著降低（P<0.05）,Ⅲ组十二指肠和空肠、Ⅳ组空肠和回肠绒毛宽度均极显著降低（P<0.01）;Ⅱ、Ⅲ组空肠黏膜厚度显著升高（P<0.05）,Ⅳ组小肠各段黏膜厚度均极显著升高（P<0.01）。Ⅱ组回肠上皮内淋巴细胞数量显著升高（P<0.05）,Ⅲ组十二指肠、Ⅳ组小肠各段上皮内淋巴细胞数量极显著升高（P<0.01）;Ⅲ组十二指肠、Ⅳ组十二指肠和回肠杯状细胞数量极显著升高（P<0.01）;Ⅳ组空肠肥大细胞数量显著升高（P<0.05）。综上所述,天蚕素、合生素单独或联合添加均能改善AA肉鸡小肠黏膜结构,促进小肠黏膜免疫细胞增殖,联合添加效果最佳。     

Effects of Cecropin and Synbiotics on the Intestinal Mucosal Morphology and Intestinal Mucosal Immune Cells of AA Broilers

In order to investigate the effects of cecropin and synbiotics on the intestinal mucosal morphology and intestinal mucosal immune cells of AA broilers. 480 of 1-day-old healthy AA broilers were chosen and randomly divided into 4 groups with 4 replicates per group and 30 broilers per replicate. The broilers in group Ⅰ(control group) were fed basal diet,while that in groups Ⅱ to Ⅳ were fed the basal diet supplemented with 0.5% cecropin,0.3% synbiotics,0.5% cecropin+0.3% synbiotics,respectively. The trial lasted for 42 days. The result showed that compared with group Ⅰ,the villus height of duodenum and ileum in group Ⅳ were extremely significantly increased (P<0.01).The crypt depth of jejunum and ileum in group Ⅱ,and that of small intestine in group Ⅲ were significantly or extremely significantly decreased (P<0.05;P<0.01).The villus height/crypt depth of small intestine in groups Ⅱ and Ⅲ,and that of duodenum and ileum in group Ⅳ were significantly or extremely significantly increased (P<0.05;P<0.01).The villus width of jejunum in group Ⅱ was significantly decreased (P<0.05),while the villus width of duodenum and jejunum in group Ⅲ,that of jejunum and ileum in group Ⅳ were extremely significantly decreased (P<0.01).The mucous thickness of jejunum in groups Ⅱ and Ⅲ were significantly increased (P<0.05),while that of small intestine in group Ⅳ was extremely significantly increased (P<0.01).The number of the intraepithelial lymphocyte of ileum in group Ⅱ was significantly increased (P<0.05),and that of duodenum in group Ⅲ and small intestine in group Ⅳ were extremely significantly increased (P<0.01).The number of the goblet cell of duodenum in group Ⅲ,duodenum and ileum in group Ⅳ were extremely significantly increased (P<0.01).The mast cell of jejunum in group Ⅳ was significantly increased (P<0.05).In conclusion,both the cecropin and synbiotics could improve the small intestine mucosal structure and promote the small intestine mucosal immunocompetent cells proliferation in AA broiler, and the effect of combined utilization would be better.     

日粮中添加天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生产性能和血液生化指标的影响

为考察天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生产性能和血清生化指标的影响,选用28日龄、体重相近、健康的北京原种黑猪断奶仔猪192头,采用单因子设计,按体重相近、遗传基础相似的原则,完全随机分为4个处理组:对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮基础上分别添加不同剂量的天蚕素抗菌肽(试验Ⅰ组:180 g/t,试验Ⅱ组:250 g/t,试验Ⅲ组:320 g/t)。每个处理组设三个重复,每个重复16头猪,试验期为32 d。试验结果表明:饲料中添加适量的天蚕素抗菌肽能够提高断奶仔猪平均日增重,但各组间差异不显著(P>0.05);显著降低料重比(P<0.05);提高血液中的免疫球蛋白含量。因此,在断奶仔猪基础日粮中添加适量天蚕素抗菌肽能提高断奶仔猪的生产性能和机体免疫性能,且本次试验中,天蚕素抗菌肽的最适添加量为320 g/t。     

家蚕抗菌肽Cecropin-XJ的原核优化表达及活性检测

Cecropin-XJ是一种从家蚕幼虫体内分离纯化的具有很强热稳定性、酸碱适应性和广谱抗菌性的新型家蚕抗菌肽。以融合不同标签的表达载体构建pET28a-Cecropin-XJ、pET30a-Cecropin-XJ、pET32a-Cecropin-XJ、pMAL-p2X-Cecropin-XJ重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,并优化诱导时间、诱导温度、诱导剂IPTG浓度等条件,通过对目的蛋白表达的检测分析,选择、建立Cecropin-XJ在大肠杆菌中高效、可溶性表达的技术体系。试验结果表明:采用构建的重组原核表达载体pET32a-Cecropin-XJ在IPTG终浓度为0.8 mmol/L、培养温度为37℃的条件下诱导5 h,目的蛋白的表达量可达10 mg/L,重组蛋白主要以可溶性表达产物形式存在,可溶性蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,经金属螯合层析进一步纯化后的Cecropin-XJ融合蛋白纯度可达90%以上。体外抑菌试验显示Cecropin-XJ融合蛋白对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性。     

抗菌肽Sublancin与黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能调节作用的比较分析

旨在比较研究抗菌肽sublancin与黄芪多糖对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的免疫抑制小鼠的免疫功能的调节作用。试验选取60只4～6周龄健康雌性BALB/c小鼠,随机分为6个处理组。正常对照组:第1—3天,腹腔注射生理盐水;第4—10天,灌胃生理盐水。其余五个处理组:第1—3天,腹腔注射CTX(80mg·kg-1);第4—10天,阴性对照组:灌胃生理盐水;低浓度抗菌肽组:灌胃4.0mg·kg-1抗菌肽sublancin;高浓度抗菌肽组:灌胃8.0mg·kg-1抗菌肽sublancin;黄芪多糖组:灌胃200.0mg·kg-1黄芪多糖;阳性对照组:灌胃10.0mg·kg-1左旋咪唑。所有处理均为每天一次,每次0.2mL。于试验第1天小鼠腹腔注射CTX前、第4天灌胃前和第11天对小鼠进行称重。第11天称重结束后,采集全部小鼠的外周血及脾,检测外周血生理生化指标、CD4+与CD8+数量和脾细胞的细胞因子mRNA表达等指标。结果表明,与正常对照组相比,阴性对照组中小鼠体重、外周血的红细胞、血红蛋白和白细胞含量显著降低(P<0.05),脾IL-2、IL-4和IL-6的基因表达显著降低(P<0.05)。灌胃后,与阴性对照组相比,黄芪多糖组和高浓度sublancin组体重无差异但有升高趋势,说明高浓度sublancin与黄芪多糖对小鼠体重有积极影响;低、高浓度sublancin、黄芪多糖组和阳性对照组中小鼠外周血的白细胞含量显著升高(P<0.05);高剂量sublancin组中小鼠外周血的红细胞和血红蛋白显著升高;低、高浓度sublancin和黄芪多糖组中小鼠外周血的CD4+显著升高(P<0.05);低、高浓度sublancin、黄芪多糖组和阳性对照组中小鼠外周血的CD8+显著降低(P<0.05);低、高浓度sublancin组中小鼠外周血的CD4+/CD8+细胞显著升高(P<0.05);低、高浓度sublan-cin、黄芪多糖组和阳性对照组中小鼠脾IL-4的表达均显著升高(P<0.05);高浓度sublancin、黄芪多糖组和阳性对照组中小鼠脾IL-2、IL-6的表达显著升高(P<0.05)。综合上述结果,适宜剂量的抗菌肽sublancin和黄芪多糖均可缓解环磷酰胺造成的免疫抑制。与200.0mg·kg-1黄芪多糖相比,8.0mg·kg-1抗菌肽sublancin对缓解环磷酰胺免疫抑制造成的细胞因子降低的效果更好。     

人工设计天蚕素抗菌肽AMP-D及其活性测定

本试验通过对抗菌肽结构改造优化,得到了一条新设计的抗菌肽AMP-D,并利用固相合成技术人工合成后对其活性和溶血性进行测定。试验结果表明,AMP-D对革兰氏阴性菌及真菌没有生物活性,对革兰氏阳性菌有明显的抑制作用,且其没有溶血活性;AMP-D对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为10.5 μg/mL,较原设计肽活性有较大提高。     

新型黏虫抗菌肽AAP-1对大肠杆菌的抗菌作用

为评价一种新型黏虫抗菌肽（armyworm antimicrobial peptide 1,AAP-1）的抗菌活性,本试验首先采用固相化学合成法合成AAP-1,并通过高效液相色谱纯化和质谱检验,用抑菌圈法测定AAP-1对大肠杆菌的抗菌效果,倍比稀释法检测最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）,细菌平板计数法测定时间抗菌曲线;最后,通过超微量分光光度计评价AAP-1对大肠杆菌核酸泄露的影响,核酸凝胶电泳评价AAP-1对大肠杆菌胞内DNA的影响,透射电子显微镜观察评价AAP-1对大肠杆菌的整体作用效果。结果表明,合成的AAP-1纯度高于98%,分子质量为4 262.17 u;AAP-1对大肠杆菌具有良好的抗菌活性,MIC为7.8 μg/mL;对大肠杆菌的抗菌作用具有浓度依赖性,且在60 min内抗菌效果逐渐增强;AAP-1能够导致大肠杆菌核酸泄露,致使胞内DNA总量减少,且呈现浓度依赖性;AAP-1也会导致大肠杆菌细胞膜破坏、胞内电子密度明显降低、胞质溶解等现象。综上,本研究化学合成了一种新型抗菌肽AAP-1,且纯度高达98%,其对大肠杆菌具有良好的抗菌效果。本研究可为深入研究AAP-1对大肠杆菌的抗菌机制提供前期数据,可为APP-1的临床应用奠定理论基础。     

Antibacterial Effect of Novel Armyworm Antimicrobial Peptide (AAP-1) Against Escherichia coli

In order to evaluate the bactericidal activity of a novel armyworm antimicrobial peptide (AAP-1),the bactericidal effect of AAP-1 on Escherichia coli (E.coli) was investigated.Firstly,AAP-1 was synthesized by solid-phase chemically synthesis,and purified by high-performance liquid chromatography and tested by mass spectrometry.Then,the bactericidal effect of AAP-1 against E.coli was determined by the bacteriostatic circle method.The minimum inhibitory concentration (MIC) was detected by the double dilution method.The time kill curve was measured by bacterial plate counting method.Finally,the effect of AAP-1 on the nucleic acid leakage of E.coli was evaluation by ultra-micro spectrophotometer.The effect of AAP-1 on the intracellular DNA of E.coli was tested by nucleic acid gel electrophoresis.The overall effect of AAP-1 on E.coli was observed through transmission electron microscope.The results showed that the purity of the synthesized AAP-1 was more than 98%,and its molecular weight was 4 262.17 u.AAP-1 showed good antibacterial activity against E.coli,with a MIC of 7.8 μg/mL.AAP-1 had a concentration-dependent bactericidal effect on E.coli,and within 60 min the bactericidal effect gradually increased.AAP-1 could cause the nucleic acid leakage of E.coli,and resulted in a reduction in the total amount of intracellular DNA of E.coli with concentration-dependent.AAP-1 could also cause cell membrane destruction,significantly reduce intracellular electron density,resulted in cytoplasmic dissolution of E.coli,and so on.In summary,this study suggested that a novel antimicrobial peptide AAP-1 could be chemically synthesized with a purity of up to 98% and showed its good bactericidal effect on E.coli.This study could provide preliminary data for the in-depth study of the bactericidal mechanism of AAP-1 against E.coli and laid a theoretical foundation for the clinical application of AAP-1.     

Bioinformatics Analysis of Antimicrobial Peptide P3 from Bovine Hemoglobin and Its Analogs

To provide basic information for researching the biological function of antimicrobial peptide P3 from bovine hemoglobin and its analogs (JH-0, JH-1, JH-2 and JH-3), tools on line were utilized to analyze some bioinformatic features of these five peptides. The results showed that the isoelectric point of these five peptides were all more than 8.00. All of these five peptides had positive charge, no transmembrane domain, no signal peptide sequence, no glycosylation sites,were hydrophobins and located at extracellular. The secondary structure of peptide P3 and JH-2 had α-helix and β-sheet, JH-3 was all α-helix, while JH-0 and JH-1 were coil. Peptide P3, JH-2 and JH-3 had a glycosylation site at the thirteenth site of amino acid (Thr, T), respectively. Based on these results, we conjectured that antimicrobial peptide P3 and its analogs could kill bacteria through the interaction with cell wall or cell membrane.     

牛血红蛋白源抗菌肽P3及其类似肽的生物信息学分析

为研究牛血红蛋白源抗菌肽P3及其类似肽（JH-0、JH-1、JH-2、JH-3）的生物学功能,本研究利用在线软件分析了抗菌肽P3及其类似肽的生物信息学特性,发现这5个抗菌肽均带正电荷,等电点均大于8.00,均为疏水蛋白,定位于细胞外,不含有跨膜区、信号肽序列和糖基化位点,P3和JH-2的二级结构为α-螺旋+β-折叠,JH-3为100%的α-螺旋,JH-0和JH-1为无规则卷曲结构,P3、JH-2和JH-3在第13位氨基酸即苏氨酸（Thr,T）有一个糖基化位点。根据分析结果推测抗菌肽P3及其类似肽可作用于细胞壁或细胞膜,从而使菌体死亡。     

抗菌肽对仔猪生长性能及降低腹泻率的影响

为了研究抗菌肽制剂对仔猪生产性能和健康水平的影响,本试验选取316头仔猪作为研究对象,分为对照组和试验组,试验组教槽料中添加抗菌肽制剂1 kg/t,保育料中添加抗菌肽制剂500 g/t。试验结果：试验组仔猪的末重比对照组高1.71 kg,日增重比对照组高0.07 kg,料肉比比对照组降低0.10,腹泻头数明显低于对照组,少43头,腹泻率明显低于对照组,低23.7%,并且两组之间差异显著（P〈0.05）。结果表明：抗菌肽制剂作为饲料添加剂,,为可以改善仔猪的生产性能,明显的降低仔猪的腹泻头数和腹泻率。