甜荞·苦荞和大野荞的高分子量种子蛋白亚基研究

[目的]探讨甜荞、苦荞和大野荞的高分子量种子蛋白亚基。[方法]利用SDS-PAGE电泳法对18个不同地方居群的大野荞、3个甜荞和3个苦荞收集系的高分子量种子蛋白亚基进行研究。[结果]从这3个物种的24个收集系中,在高分子量区域（20-70 kDa）共发现12个不同的种子蛋白亚基谱带,种间差异大,种内差异小。3个物种在种子蛋白亚基分布上存在一定的相似性,约30%的谱带相同。其中,甜荞发现有9个谱带,含1个独特谱带（SSP33.71）;苦荞有8个谱带,含不同于甜荞的2个独特谱带（SSP39.15和SSP29.35）;大野荞有7个谱带,不仅含有苦荞的独特谱带,而且其谱带分布与苦荞极为相似。[结论]该研究为荞麦品质遗传育种、种间系统关系、高品质种子蛋白亚基基因工程等研究提供指导。     

大野荞种子中的谷草转氨酶同工酶研究

为研究大野荞的遗传变异及其与栽培荞麦的关系,用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,以甜荞(Fagopyrumesculetun)和苦荞(F.tataricum)为对照,对大野荞(F.megaspartanium)不同收集系合计24份栽培和野生荞麦种子的谷草转氨酶同工酶进行了研究。结果表明:谷草转氨酶同工酶酶带共8条。不同物种的酶带数为3～6条,甜荞和苦荞分别有3条和4～5条,其特征谱带分别为GOT-2和GOT-1。而大野荞有3～6条,18个大野荞收集系可分为3类:类I,含甜荞特征谱5GOT-2,不含苦荞特征谱5GOT-1,绝大多数大野荞收集系(W1～W8、W10～W13、W15、W17、W18)是这种类型;类Ⅱ,含苦荞特征谱5GOT-1,但不含甜荞特征谱5GOT-2,仅包含原产湖北和湖南的收集系W9和W14;类Ⅲ为既含苦荞特征谱5GOT-1,也含甜荞特征谱5GOT-2,包含的大野荞收集系为原产湖南的W16。试验所用的3个荞麦种类(甜荞、苦荞、大野荞)几乎都含有谱带GOT-4和GOT-5。结果显示,大野荞遗传多样性相对较丰富。     

甜荞和苦荞品种遗传多样性的RAPD分析

[目的]对甜荞和苦荞品种遗传达室的特性进行了RAPD分析。[方法]以7个随机引物对贵州省1999～2010年荞麦区甜荞和苦荞参试品种及其亲本等合计19个品种进行了RAPD分析。[结果]共获得149条DNA扩增带,其中多态性谱带141条,多态性谱带的平均比率为94.89%。多态性分析及聚类分析表明,供试品种彼此均有一定的差异,其中威宁甜荞品种彼此新缘关系较近缘,而其他甜荞品种间关系较远。遗传变异性程度,以种间差异最大,其次是甜荞种内不同品种间,而苦荞种内不同品种间的遗传变异性最小。[结论]该研究初步建立了19个品种的RAPD指纹图谱。     

甜荞和苦荞品种遗传多样性的RAPD分析

[目的]对甜荞和苦荞品种遗传多样性进行RAPD分析。[方法]以7个随机引物对贵州省1999～2010年荞麦区甜荞和苦荞参试品种及其亲本等合计19个品种进行RAPD分析。[结果]共获得149条DNA扩增带,其中多态性谱带141条,多态性谱带的平均比率为94.89%。多态性分析及聚类分析表明,供试品种彼此均有一定的差异,其中威宁甜荞品种彼此亲缘关系较近,而其他甜荞品种间关系较远。遗传变异性程度以种间差异最大,其次是甜荞种内不同品种间,而苦荞种内不同品种间的遗传变异性最小。[结论]研究初步建立了19个品种的RAPD指纹图谱。     

大仓鼠消化系统中酶的分布研究

用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的方法对大仓鼠(Cricetulus triton)消化系统中的SOD、EST和AMY3种酶的酶谱进行分析。结果表明,大仓鼠消化系统中共分离出SOD1～SOD11、电泳迁移率0.909～0.023的11条谱带;共分离出EST1～EST12、电泳迁移率0.742～0.188的12条谱带;共分离出AMY1～AMY8、电泳迁移率0.564～0.154的8条谱带。大仓鼠消化系统中SOD、EST和AMY 3种酶均有表达,组织内和组织间谱带的表达强度和活性均有差异,并存在明显的组织特异性。     

橄榄蛏蚌不同组织乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶的电泳分析

为了解橄榄蛏蚌的生化遗传特性,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳,研究了橄榄蛏蚌闭壳肌、斧足、鳃、肠道、外套膜中乳酸脱氢酶（LDH）和苹果酸脱氢酶（MDH）同工酶的电泳酶谱和活性。结果表明,橄榄蛏蚌5种组织乳酸脱氢酶共检测到5条酶带,5种同工酶在闭壳肌中均有表达,在肠道和鳃中只检测到2种,在外套膜中检测到1条酶带;苹果酸脱氢酶检测到4条酶带,其中闭壳肌含有4条谱带,鳃、斧足和盲肠具有3条谱带,而外套膜具有2条染色很浅的微弱带。可见2种同工酶的分布均具有组织特异性。     

桔梗种质资源过氧化物同工酶分析

32份栽培桔梗种质过氧化物同工酶谱共显示17条不同的酶带,共呈现16个酶谱类型,其中,12个为对应种质的特征酶谱。每份种质有5～9条酶带,不同种质酶谱及活性存在一定的差异,其中,A1、B1、B2、B3等4条酶带为共有带,具有种的特异性;7条（A2、A3、A4、C2、C4、C5、D3）酶带为特异性酶带,其中白花桔梗有2条特征酶带（A2、C2）。为桔梗种质资源的收集、保存、遗传育种提供了一种新技术和方法。     

云南野生和逸生苜蓿资源多酚氧化酶和超氧化物歧化酶同工酶研究

 采用聚丙烯酰胺凝胶不连续垂直板电泳系统,对30份云南野生和逸生苜蓿材料多酚氧化酶（PPO）和超氧化物歧化酶（SOD）进行了检测。结果表明：供试材料PPO检测分离出10条酶带,SOD 为6条酶带,二者多态位点百分数均为100%。对酶谱进行谱形分析表明,除1,3,4号3份二倍体材料外,其他材料均具有多条相同的共有谱带,但也存在明显差异;采用类平均法(UPGMA)进行聚类分析,表明30份供试材料亲缘关系的远近与地理分布呈一定的相关性。试验结果可以作为研究云南苜蓿资源遗传关系的基础。     

大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)酯酶同工酶的测定

对棉花黄萎病菌不同致病力及致病类型菌系，不同寄主上的大力轮枝菌（Verticilliumdahliae）共14个菌系的酯酶，进行了聚丙烯酰胺凝胶平板电泳。结果表明棉花黄萎病不同致病类型菌系有其独特的酯酶同工酶谱。E6酶带的有无与致病力类型有关，E3酶带活性与病菌致病力有关，E3酶带活性与棉花发病病指关联度为0．85。不同寄主大丽轮枝菌酯酶同工酶总酶带数在7～12条之间，主酶带数在2～4条之间，按E3酶带活性强、中、弱划分为3个类型。E3酶带活性与病菌致病力有关，其活性大小与棉花、番茄、茄子病指的关联度均为0．774以上。说明酯酶同工酶技术可和于鉴定大丽轮枝菌同一种内不同致病类型致病力菌系。     

黄颡鱼雌、雄个体血清蛋白、酯酶同工酶及血红蛋白的电泳分析

采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直板(PAGE)电泳,对黄颡鱼雌、雄个体血清蛋白、酯酶同工酶(EST同工酶)及血红蛋白(Hb)进行了分析。结果表明：黄颡鱼雌、雄个体的血清蛋白存在明显差异,表现在B1区雄性个体比雌性个体多1条MI带,B2区雌性个体比雄性个体多1条MA带,少2条MⅡ带,B3区雄性个体比雌性个体多1条MA带。另外在B2区雌、雄个体间MA带和MI带排列次序也有差异。血清EST雌、雄个体也有明显的差异,雄性黄颡鱼血清EST的酶谱出现了3条酶带无中强带,而雌性黄颡鱼EST的酶谱出现了7条酶带,有4条中强带。雌、雄个体胁只能分离出1条谱带,并且雌、雄之间基本没有差异。     

3种菊酯类农药对南美白对虾同工酶表型的影响

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对注射不同浓度菊酯类农药的南美白对虾Penaeus vannamei3种组织的酯酶同工酶(EST)和苹果酸脱氢酶同工酶(MDH)进行了分析比较。结果表明：经农药胁迫后，虾体内各组织同工酶酶带出现明显的变化，在不同浓度下存在明显的差异，并具有明显的组织特异性。由于不同种农药的作用结合位点不同，使得酶带变化规律也不相同，当虾体被注射农药后，EST酶带变化较复杂，而MDH酶带则较稳定。当虾体受到农药胁迫时，可引起虾体无氧代谢加强，有氧代谢和酯类降解代谢减弱，正常的物质代谢平衡被破坏，因而使供给机体的能量减少，机体的免疫力和抵抗外界环境的能力均明显降低；另外，还有可能诱发虾病的暴发或导致虾的大批量死亡。     

4种鳗鲡同工酶的比较研究

以日本鳗鲡（Anguilla japonica）、澳洲鳗鲡（A．australis）、欧洲鳗鲡（A．anguilla）和美洲鳗鲡（A．rostrata）成体为试验材料,应用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对4种鳗鲡的眼球、肌肉、肝脏、心脏和。肾脏5种组织的8种同工酶（酯酶EST、乳酸脱氢酶LDH、苹果酸脱氢酶MDH、葡萄糖脱氢酶GCDH、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G6PD、醇脱氢酶ADH、超氧化物歧化酶SOD和谷氨酸脱氢酶GDH）进行比较研究。结果表明：GDH在5种组织中均没有表达,7种同工酶（EST、LDH、MDH、GCDH、G6PD、ADH、SOD）在4种鳗鲡均表现出很强的组织特异性。4种鳗鲡的同工酶谱表型非常相似,在同一组织中同工酶的存在位点、表达形态、活性等方面是类似的,但也表现出一定的种间差异性。应用酶谱差异指数D对4种鳗鲡进行聚类分析,结果提示日本鳗鲡和澳洲鳗鲡有较近的亲缘关系、而欧洲鳗鲡和美洲鳗鲡有较近的亲缘关系,这与4种鳗鲡的形态特征和生物学特征相吻合。     

刺参种群同工酶的生化遗传分析

采用同工酶电泳方法,以中国北方沿海天然及养殖刺参Stichopus japonicus Selenka为研究对象,进行了群体生化遗传学研究。对刺参3种组织(肠、体壁、呼吸树)的9种同工酶(MDH、EST、SOD、CAT、ME、ACP、ALP、ADH及LDH)的表达情况和群体的生化遗传结构进行了分析,共记录了8个基因座位,其中7个为多态座位,多态座位比例为87．5％,表现出很高的遗传多样性。CAT、MDH、SOD和EST同工酶是分析刺参种群生化遗传结构的有效遗传标记,其酶谱及其生化遗传分析为刺参群体遗传学研究提供了可靠的基础资料。     

洞庭湖区不同体色鲇不同组织同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳技术(PAGE),对洞庭湖区两种体色(灰色、黄色)鲇的肝脏和肌肉组织中的苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)和乳酸脱氢酶(LDH)等3种同工酶进行研究。结果表明,在MDH同工酶中,两种鲇肝脏各有5条酶带,肌肉均有4条酶带表达;两种体色鲇鱼的同种组织中EST同工酶的酶谱不相同,黄色鲇鱼的EST同工酶检测出8条酶带,而灰色鲇鱼只有4条酶带;EST同工酶在不同组织中也表现出明显的组织特异性。在LDH同工酶中,黄色鲇肝脏有2条酶带,肌肉有1条酶带;而灰色鲇肝脏和肌肉中各有1条酶带。     

文蛤不同群体的同工酶分析

采用聚丙烯酰胺垂直电泳技术（PAGE）对来自山东野生、江苏野生、浙江养殖、广西野生白色壳4个文蛤Meretrix meretrix群体两种组织（消化腺、闭壳肌）的EST、MDH、ME、ADH、SOD、CAT等6种同工酶进行了分析。结果显示：文蛤不同组织之间、不同群体之间、养殖群体和野生群体之间的同工酶酶谱均有较明显的差别;广西白壳群体的多种同工酶酶谱与其它几个群体相比有较大差异,说明该种群与另外3个群体种质差异较大,亲缘关系较远。对山东野生、广西普通壳色和广西白色壳色3个群体的4种同工酶（EST、AMY、MDH、SOD）进行了研究,结果表明：广西普通壳色群体和山东群体的酶谱相似,而与广西白色壳群体差异明显,初步推测广西白色壳群体为文蛤属的其他种类;在文蛤各群体中均找到了特征性酶带,可以作为区别于文蛤不同群体的蛋白标记,用于文蛤种质资源的分析鉴定,并可为选育优良品种文蛤提供遗传依据。     

乌苏里拟鲿(Pseudobagrus ussuriensis)同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对黑龙江水系乌苏里拟鲿(Pseudobagrus ussuriensis)心、肝、肾、眼、肌肉和性腺共6种组织进行了9种同工酶(ADH、EST、G6PDH、GDH、IDH、LDH、MDH、POD、SOD)的分析。结果表明,乌苏里拟鲿EST、GDH、IDH、POD同工酶谱中存在不同程度的组织特异性,EST表现出明显的性别差异性。共记录19个基因位点,多态位点百分数P=21.05%,种群遗传偏离指数d=-1,该乌苏里拟鲿种群内部杂合子缺失较严重,偏离Hardy-Weinberg平衡,遗传多样性较低。     

花斑副沙鳅七种同工酶的组织特异性表达

采用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳方法,对花斑副沙鳅(Parabotia fasciata Dabry)的鰓、心、肝胰脏、肠、肾、肌肉、眼、脑8种组织中的过氧化氢酶(CAT)、酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和醇脱氢酶(ADH)进行了分析。结果表明,花斑副沙鳅的7种同工酶表达具有明显的组织特异性,8种组织中检测出3种CAT同工酶、8种EST同工酶、4种LDH同工酶、8种MDH同工酶、10种POD同工酶、10种SOD同工酶、10种ADH同工酶表达。其中,CAT-3、EST-7仅在肝胰脏表达,LDH-4、SOD-9、ADH-3仅在肾表达。     

岩原鲤三种同工酶的组织特异性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳,对岩原鲤(Procypris rabaudi)6种组织(眼、脑、心、肝、肾、肌肉)的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)3种同工酶进行了初步研究,并对其位点及酶谱表型进行了分析.结果表明,岩原鲤3种同工酶系统具有不同程度的组织特异性.LDH检测到由3个基因位点编码,Ldh-C位点仅在肝脏组织中表达:s-MDH在6种组织中均有表达,其中在肝脏和肾脏中的活性表达较强,m-MDH在脑、心脏、肾脏和肌肉4种组织中均有表达;EST检测到由5个基因位点编码,其同工酶酶谱复杂,Est-2为6种组织的共有谱带,在肝脏中的活性表达较强.     

长白松自然群体同功酶遗传多样性的研究

本文以酶水平,研究了两个自然群体的遗传多样性。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,检测了长白松雌配子体的谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GDT),苹果酸脱氢酶(MDT),酸性磷酸酶(ACP),谷氨酸脱氢酶(GDH)和葡萄糖脱氢酶(GLUDH)的同功酶型。根据多态基因位点标准,笔者发现检测基因位点的63％是多态的。8个基因位点所有样品的杂合性的平均值是0.3157。每个基因位点的平均等位基因数是2.19。两个自然群体间的同功酶多样性分化,对8个基因位点的基因多样性测量表明,群体间基因多样性的分化明显效果是9％,总的基因多样性的91％在群体内。两个群体间的遗传距离是0.0619。     

高黄酮荞麦资源的遗传多样性评价

利用SSR分子标记方法,对筛选出的51份高黄酮荞麦资源进行遗传多样性研究,试验结果表明,选用的50对SSR引物中,22对引物多态性丰富,共扩增出253个条带,检测到174个等位变异,总遗传变幅为0.56~1.00,27份苦荞和24份甜荞能够各自被聚为两大类。聚类结果显示,27份苦荞资源的遗传多样性并不受地理分布的影响,普遍亲缘关系较近;而24份甜荞的遗产差异则较大,表现出较为丰富的遗传多样性。用SPSS 19.0软件绘制荞麦的黄酮质量分数聚类图,与遗传聚类结果综合比较分析,发现27份苦荞资源的黄酮含量受其亲缘关系影响较大,与其遗传多样性的联系较强,而甜荞的并不明显。另外,亦从51份荞麦种质中,筛选出4份基因型相对独立且黄酮更高的苦荞品种,可作为高黄酮优质荞麦选育的基础。