马铃薯试管苗保存毒源PVA技术的研究

报道了含PVA毒源的马铃薯试管苗保存技术及效果。在无菌条件下切取毒源马铃薯茎尖于盛MS培养基的试管中培养,当毒源马铃薯长至12 cm时单节切段进一步扩繁培养。利用免疫电镜法、电镜负染法筛选出3管纯毒源材料。进一步试验表明:免疫电镜法鉴定证明毒源马铃薯试管苗接种3周后病毒含量明显提高;毒源马铃薯试管苗移至花盆中栽培表现出典型的PVA症;用毒源马铃薯的汁液接种指示植物表现典型PVA状,说明毒源马铃薯试管苗的PVA具有侵染力。用马铃薯试管苗保存PVA毒源,克服了传统保存中的不足,提高了保存效果。     

培育健壮马铃薯试管苗试验

我们在马铃薯茎尖锐毒和试管苗繁殖过程中发现，马铃薯试管苗生长细弱，茎叶嫩黄与带有高效浓度的马铃薯纺锤块茎类病毒及几种主要马铃薯病毒有关。用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法和酶联夹心法检测筛选出无病毒的试管苗作为试材，排除类病毒和病毒侵染的干扰，以提高培养基中营养元素含量作为培育健壮试管苗的措施。试验结果表明，２倍ＭＳ液体培养处理的试管苗生长茁壮，浓绿，加速了干物质累积，使继代培养周期３－４周缩短为２－３周     

马铃薯Y病毒分离鉴定技术的研究

在马铃薯生产上,马铃薯Y病毒引起马铃薯种性退化,导致产量降低,所以必须研究出鉴定马铃薯Y病毒的方法,以便减少病毒对马铃薯的危害。通过接种指示植物,研究出了马铃薯Y病毒的分离方法、试管毒源的保存方法、生物学鉴定马铃薯病毒的方法。     

我国马铃薯主产区病毒病发生情况调查

为了解我国马铃薯病毒病发生情况,在马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、云南等马铃薯田采集了具有典型病毒病症状的样品、疑似样品和随机无症样品,试管苗和原原种为随机样品,共649份。应用DASELISA方法筛查6种马铃薯主要病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA。结果表明:129份样品为阳性,PVY的检出率最高,为9.86%,PVS次之,为6.47%;试管苗PVS检出最多,为32份,原原种PVX检出最多,为10份,大田样品PVY病毒发生比例最高,为54份;有38份样品是由多种病毒复合侵染造成的,大田PVY+PVS复合侵染率最高,为2.93%,PVS+PVY+PLRV次之,为0.98%,试管苗PVS+PVM复合侵染率最高,为4.85%。通过历年的检测结果比较,试管苗中PVS病毒检出率最高,原原种中PVX和PLRV病毒成为危害最为严重的病害,大田样品中PVY检出率一直居高不下。     

马铃薯脱毒种薯生产技术及种薯基地建设的研究报告

利用往复聚丙烯酰胺凝胶电泳法（Ｒ－ＰＡＧＥ）检测筛选出感染ＰＳＴＶ的块茎，采用酶联双抗体夹心法检测主要马铃薯病毒状况，筛选出无毒苗做为原原种生产的基础苗。脱毒试管苗经扩大繁殖后，经常会出现某些病毒浓度增高的情况，因此，每年再进行类病毒和主要马铃薯毒病的检测筛作为下一年应用的基础试管苗。研究出的准确，简易检测类病毒的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术比往复电泳示灵敏度高６４倍，甚至取一段２ｃｍ长，重４０微克     

云南马铃薯病毒种类及脱病毒种苗筛选技术体系

应用电子显微镜(负染色观察、免疫电镜、细胞病理)、血清学(DAS-ELISA、TAS—ELISA)的方法,对采自云南省马铃薯产区的2 000多份马铃薯病毒病样品及试管苗、微型薯样品进行了检测鉴定。检出的病毒种类有马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)、番茄斑萎病毒(TSWV)、类烟草脆裂病毒(TRV like)、类马铃薯帚顶病毒(PMTV like)7种,其中PVX、PVY、PLRV是主要毒源。研究了PVY对合作88、PVX对中甸红产量的影响,随着种薯带毒率增加,产量显著下降。应用电子显微镜、TAS—ELISA技术建立了脱病毒核心种苗的检测筛选技术体系。制备了PVY的TAS—ELISA快速检测试剂盒,应用于生产用种苗、种薯的检测。     

中国马铃薯主要病毒病发生情况调查与分析

马铃薯病毒病是造成马铃薯减产的主要因素,为了解中国马铃薯种薯质量及生产中病毒病发生情况,在马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、河北等地采集具有典型病毒病症状的样品、疑似病毒样品和随机无症样品,包括试管苗样品248个,原原种样品93个,大田种薯样品621个,共计962个。应用DAS-ELISA方法检测6种马铃薯主要病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA。结果表明,219份样品病毒检测结果呈阳性,PVS检出率最高,PVY次之。有10个样品是由多种病毒复合侵染造成。不同级别种薯质量情况为试管苗PVS病毒发生较多,原原种质量较好,大田种薯PVY病毒发生比例最高。     

我国部分马铃薯产区主要病毒病发生情况调查

为探明我国马铃薯产区主要病毒病的发生情况,采用RT-PCR技术对我国9个省、市16个马铃薯种植区的田间马铃薯病毒病发生情况进行了调查.结果表明:马铃薯Y病毒(PVY)检出率最高,达到94％,其次是马铃薯S病毒(PVS)和马铃薯A病毒(PVA),检出率分别为50％、44％.其中PVA在贵州省、PVS在河南省和吉林省的发生尚属首次报道.病毒复合侵染情况普遍,复合侵染率达81.3％.另外,对我国部分地区脱毒试管苗和脱毒种薯的带毒情况进行检测,结果表明:在脱毒试管苗中4种病毒均有检出,其中PVS检出率最高(22.2％),其次为马铃薯卷叶病毒(PLRV)、PVY和PVA,但在脱毒种薯中未检出病毒.我国马铃薯田间病毒病发生普遍,且多为复合感染.     

彩色马铃薯茎尖培养及病毒检测技术

为了探明彩色马铃薯茎尖培养方法,获得彩色马铃薯无毒试管苗,研究了不同质量浓度植物生长调节剂组合的培养基对21份彩色马铃薯后代品系组培苗形成的影响,并用RT-PCR方法对试管苗进行马铃薯主要病毒检测。结果表明,筛选出的组合(MS+NAA0.05mg·L~(-1)+6-BA0.1mg·L~(-1)+GA30.2mg·L~(-1)+泛酸钙0.2mg·L~(-1))可作为闽薯1号茎尖诱导分化的最佳培养基,优化的植物生长调节剂组合在不同的彩色品种茎尖分化和植株形成差异较大,试管苗经RT-PCR检测6种马铃薯病毒(PVX、PVY、PVS、PVA、PVM和PSTVd),获得了11份彩色马铃薯脱毒苗,可用于大田生产用试管苗。     

琼脂浓度对马铃薯试管苗离体低温保存的影响

为研究渗透压在马铃薯种质资源试管苗长期保存中的作用,延长试管苗保存的时间,以早熟品种富金的脱毒试管苗为材料,通过设计5个不同浓度琼脂梯度,对脱毒试管苗保存情况进行试验,以筛选出最佳琼脂浓度。结果表明,富金试管苗在17℃离体低温保存条件下,MS培养基中琼脂浓度为18 g/L时,试管苗保存时间有明显延长效果,最长能保存4~5个月。     

利用巴西牵牛试管苗检测甘薯组培苗病毒技术研究

为改进甘薯组培苗的病毒检测工艺,以甘薯病毒指示植物巴西牵牛(Ipomoea setosa)种子在MS+GA3 2.0 mg/L培养基上萌发苗的茎尖为外殖体,在MS+IBA 0.2 mg/L的培养基上茎尖能够发育成完整的试管植株且能够以单叶节扦插通过腋芽再植株生长方式快速繁殖;在试管中将巴西牵牛试管苗和甘薯试管苗茎段进行试管微嫁接后在MS0培养基上培养,15天后,与带病毒的甘薯试管苗嫁接的巴西牵牛茎段所带的叶片均表现出黄化、花叶等阳性反应。与不带病毒的甘薯试管苗茎段嫁接的巴西牵牛试管苗茎段所带的叶片都正常生长;用甘薯试管苗的无菌研提汁液感染巴西牵牛试管苗茎段切口后在MS0培养基上培养,15天后,被带病毒甘薯试管苗研提汁液感染的巴西牵牛试管苗茎段所带的叶片都表现出黄化、花叶等阳性反应,继续培养叶片枯死。被不带病毒甘薯试管苗研提汁液侵染的巴西牵牛试管苗茎段所带的叶片都能正常生长;以上2种方法可以替代传统的“巴西牵牛种子苗网室嫁接检测法”检测甘薯组培苗是否带有病毒。具有灵敏度高、检测结果不受外界环境影响、检测成本低、培养条件可控、不受季节性限制等优点。     

怀地黄试管苗的快繁体系研究

[目的]建立怀地黄试管苗的快繁体系。[方法]分别进行了NAA、6-BA和KT对茎尖培养以及NAA、6-BA试管苗快速繁殖的试验。[结果]中低浓度的NAA和6-BA可以在一定程度上促进怀地黄试管苗的快速繁殖,而高浓度的NAA和6-BA则会抑制怀地黄试管苗的快速繁殖;优选出的怀地黄试管苗的快速繁殖的最佳培养基为MS+0.002 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA。[结论]试验优选出了怀地黄试管苗的快速繁殖的最佳培养基,为怀地黄的开发利用提供了理论依据。     

多效唑对彩色马蹄莲试管苗生长及微型种球诱导的影响

利用植物组织培养技术研究多效唑对彩色马蹄莲试管苗快繁和试管微型种球的诱导效应,结果表明:MS培养基中加入多效唑处理后对彩色马蹄莲试管苗生长有极显著影响,多效唑处理后试管苗矮化、节间变短、叶变小,苗高是对照的30.9%,茎粗是对照的137%,都达到极显著差异;多效唑处理显著增加叶片叶绿素含量,叶绿素a是对照的141.4%,叶绿素b是对照的122.9%,总叶绿素是对照的136.1%;提高试管苗移栽存活率显著提高.但多效唑的存在使微型种球的诱导受到抑制.     

马铃薯茎尖超低温保存研究

以马铃薯栽培品种甘农薯1号的试管苗为材料,进行了茎尖超低温保存技术的研究,结果表明,预培养3～4 d,用玻璃化溶液PVS2室温下处理20～30 min,直接投入液氮中冷冻保存,然后接种在MS添加2.50 mg/L KT、1.25 mg/L IAA和1.25 mg/L 6-BA的培养基上,经过恢复培养,茎尖成活率可达42.8%.     

不同种植月龄铁皮石斛试管苗生长及活性成分含量比较

[目的]研究不同种植月龄铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimuraet Migo）试管苗生长及成分含量变化动态。[方法]通过测定不同种植月龄铁皮石斛试管苗的茎高、茎粗、平均鲜重和多糖、氨基酸的含量,分析其动态变化状况。[结果]随着栽培时间的延长,铁皮石斛试管苗茎高及生物产量逐渐增加,而茎粗反而变小,其多糖含量先升后降,在第12个月达到高峰,氨基酸总量及主要氨基酸含量都呈直线上升趋势,但各阶段升高幅度不同。[结论]该研究揭示了栽培铁皮石斛试管苗生长及含量变化规律,可为合理利用铁皮石斛试管苗提供参考。     

马铃薯微型脱毒种薯生产研究

[目的]健全和完善高效低成本的马铃薯脱毒种薯的生产繁育体系。[方法]以有根、无根的瓶苗和扦插苗为基础苗,以分析纯试剂营养液和农用普通肥料营养液为雾培营养液,优化雾培法生产马铃薯微型脱毒种薯的体系。[结果]扦插苗的结薯个数和粒重明显优于原始瓶苗。采用20 cm长的无根扦插苗,不仅提高了产量,而且节约了生产成本。两种雾培营养液对薯苗的生长和结薯均无显著影响。配制1 000 L营养液,使用普通农用肥料的生产成本为17.63元,比使用分析纯试剂降低了90.2%。[结论]采用20 cm长的无根扦插苗提高了微型薯的生产效率和单位面积产量,使用农用普通肥料营养液显著降低了生产成本。     

翅果油树茎尖快速繁殖与植株再生研究

以胡颓子科胡颓子属的翅果油树茎尖为试材,对茎尖快速繁殖与植株再生的影响因素进行了研究。结果表明:外植体表面灭菌后使用100 mg.L-1的抗生素溶液处理30 min,未污染率达92%,效果最好;初代培养和增殖培养的最适培养基为MS+BA0.5+NAA0.01;但在增殖培养中,适宜芽苗伸长的培养基为MS+BA0.5+IBA0.4;适宜的生根培养基为1/2MS+IBA1.5;将试管苗移栽在腐叶土∶蛭石=2∶1的基质中,成活率达66%。     

甘薯茎尖脱毒培养技术研究

[目的]探讨利用甘薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法。[方法]以甘薯茎尖分生组织为培养对象,通过蔗糖及外源激素单因素试验研究甘薯茎尖脱毒培养技术。[结果]甘薯茎尖分生组织生长培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+ NAA 0.10 mg/L+蔗糖40 g/L+琼脂6.5 g/L,试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.20 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。在茎尖生长培养基上对25个甘薯品种的茎尖分生组织进行培养,结果表明,8个品种的出苗率为50.0%~79.3%,16个品种的出苗率达80.0%以上,其中,5个品种的出苗率为100.0%。在生根培养基上,试管苗生根率达100%,根多而粗壮,茎叶生长旺盛。试管苗不用炼苗,可直接从培养瓶中移栽至细河沙中,成活率达100%。以巴西牵牛作为指示植物,采用靠接法对试管苗进行脱毒鉴定,脱毒率为79.1%。[结论]该研究为甘薯茎尖脱毒苗生产提供适宜的培养基配方和简便易行的脱毒苗鉴定技术。     

不同移栽基质对莲瓣兰试管苗影响的研究

[目的]研究不同移栽基质配比对莲瓣兰试管苗移栽成活率的影响,为莲瓣兰试管苗移栽提供理论依据。[方法]以莲瓣兰组织培养生根试管苗为试验材料,采用正交试验设计研究不同移栽基质的种类和配比对莲瓣兰试管苗移栽的影响。[结果]影响莲瓣兰试管苗移栽基质效果的各因素作用大小为栗树叶〉红仙土〉碎树皮〉珍珠岩,以栗树叶：红仙土为4：1配比的移栽基质成活率最高,根生长情况最好。[结论]栗树叶：红仙土为4：1配比的移栽基质可以作为莲瓣兰试管苗移栽基质。