草原红牛剩余采食量相关的GSTM1和SOD3基因多态性分析

为了研究肽硫转移酶mu1(GSTM1)基因与超氧化歧化酶3(SOD3)的基因多态性,探索影响草原红牛剩余采食量性状的候选基因,试验测定了96头草原红牛血液基因组中GSTM1基因的编码区和SOD3基因的5'UTR区,并进行DNA混池、多态性、等位基因数、核苷酸多态位点、氨基酸多态位点分析,以探究GSTM1基因与SOD3基因在草原红牛基因组中的多态性表现。结果表明:草原红牛GSTM1基因编码区中704位存在C-T突变,这种突变是错义突变,氨基酸发生变化由丙氨酸变成缬氨酸,可能会使蛋白质结构发生变化。在SOD3基因的5'UTR区存在两个SNP位点,分别在71位发生G-A突变和117位C-T突变,5'UTR区上基因的突变可能导致基因表达发生变化。在遗传水平上草原红牛剩余采食量性状的差异可能是由多个基因多态性造成的。     

杜泊羊血液蛋白质多态性分析

采用垂直板高pH值不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳对21只杜泊羊的血红蛋白(Hb)、转铁蛋白(Tf)、白蛋白(Alb)、前白蛋白(Pa)和慢α2球蛋白(Sα2)5个基因座的多态性进行了分析。结果表明杜泊羊的Hb、Tf位点存在多态性,Hb位点共检测到HbA和HbB2个等位基因,构成HbAA、HbBB、HbAB3种基因型,其中HbBB和HbB为优势基因型和优势基因;Tf位点共检测到TfDD、TfCC、TfBD、TfCD4种基因型,受TfB、TfC、TfD3个复等位基因控制,其中TfCC、TfDD基因型和TfC、TfD基因为优势基因型和优势基因。试验未在Alb、Pa和Sα2位点检测出多态性,它们均呈现单态。     

三个山羊群体血液蛋白多态性研究

采用垂直平板不连续缓冲系统聚丙烯酰胺凝胶电泳法 ,研究了安哥拉山羊和建昌黑山羊及其高代杂种羊 (F3 ) 9个血液蛋白基因座 (Alb、Pr、Pa、Tf、Hp、Hb、LDH、Akp、Amy)的遗传多态性。结果表明 :安哥拉山羊与F3 血液Alb、Pr、Pa、LDH、Amy呈单态 ,Tf、Hp、Hb、Akp呈多态 ;建昌黑山羊血液Alb、Pr、Pa、Tf、Hp、Hb、LDH、Amy呈单态 ,Akp呈多态。根据所测座位的基因频率计算了群体平均基因杂合度和一致度 ,以及群体间遗传相似系数和遗传距离 ,安哥拉山羊的平均基因杂合度与一致度分别为 0 .1131和 0 .886 9,建昌黑山羊的相应值分别为 0 .0 6 2 1t 0 .9379,F3 则分别为 0 .110 3和0 .8897。安哥拉山羊与F3 的遗传距离小 (0 .0 0 39)、遗传相似系数大 (0 .996 1)。     

中国草原红牛MED4基因第7外显子多态性与肉质性状的相关性研究

为探究中国草原红牛介体复合物亚基4(MED4)基因多态性及其对草原红牛肉质性状的影响,实验以118头20月龄的草原红牛为研究对象,采用PCR测序的方法对草原红牛MED4基因第7外显子的多态性进行研究,利用SPASS 20.0软件分析MED4基因SNP位点与肉质性状的相关性.结果表明:草原红牛MED4基因第7外显子存在A...     

草原红牛IGFBP-5基因外显子多态性及对胴体性状的影响

为揭示草原红牛IGFBP-5基因外显子多态性与胴体性状的相关性,采用PCR-SSCP及PCR-RFLP两种方法分别对58头草原红牛群体该基因外显子多态性进行了检测,并对检测到的突变位点用SPSS软件分析其与胴体性状的相关性.结果表明:IGFBP-5基因第3外显子在191 bp处存在G(A)突变,该基因多态性与宰前活重、胴体重呈显著相关,BB型显著高于AA型(P0.05);对其他性状的影响差异不显著.通过研究IGFBP-5基因外显子的多态性,为草原红牛的选种选育提供实验依据.     

兰州大尾羊血液蛋白(酶)多态性的研究

以126只兰州大尾羊为实验对象,采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对血清酯酶(Es)、淀粉酶(Amy)、乳酸脱氢酶(LDH)、血红蛋白(Hb)、白蛋白(Alb)、后白蛋白(Po)和转铁蛋白(Tf)等7个蛋白位点进行了多态性检测和遗传多态性分析。结果表明,在所检测的7个蛋白位点中,Es、Hb、Po和Tf等4个蛋白位点表现多态性,而Alb、Amy和LDH等3种蛋白(酶)未检测到多态性。其中,Es基因座上共检测到3种基因型,即Es++、Es+-、Es--;Po基因座上表现出2种基因型,即AA、AB;Tf蛋白位点上表现出5种基因型,分别为AC、BB、CC、BC、CD;Hb蛋白位点上表现出3种基因型,分别是AA、AB、BB。群体遗传分析表明,Es、Hb、Po、Tf的杂合度分别为0.4987、0.4574、0.3346、0.5547。Es、Hb、Po、Tf蛋白位点有效等位基因数分别为1.9948、1.8430、1.5029、2.2457。卡方检验表明,在Es、Po、Tf、Hb多态性位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。兰州大尾羊种内平均有效等位基因数、平均杂合度、平均多态信息含量分别为1.8966、0.4614、0.3802。平均杂合度和有效等位基因数呈明显下降趋势。     

草原红牛胰岛素样生长因子结合蛋白6基因外显子2的遗传多态性及遗传效应分析

本试验旨在研究草原红牛不同基因型与屠宰肉用性状的关联性。选用草原红牛作为试验群体,采用PCR-SSCP方法检测胰岛素样生长因子结合蛋白6(insulin-like growth factors binding proteins 6,IGFBP6)基因外显子2的多态性,采用最小二乘法拟合线性模型将突变位点的不同基因型与牛屠宰肉用性状进行关联分析。结果表明,在IGFBP6基因外显子2上发现1个多态性位点A180G,具有3种基因型:AA、AB和BB。SPSS 13.0统计分析结果表明,IGFBP6基因外显子2 AB和BB基因型净肉重极显著高于AA基因型(P<0.01);眼肌面积和骨重显著高于AA基因型(P<0.05),而在宰前活重、胴体重、肾脂重和肋脂重方面3种基因型个体之间差异不显著(P>0.05)。结果显示,IGFBP6基因的多态性与屠宰肉用性状具有一定的关联性,可为今后草原红牛的育种保种工作提供理论依据,并对草原红牛肉用性状的改善提供参考。     

超细型细毛羊生化遗传标记与经济性状相关性研究

采用双垂直板高pH不连续性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统,对中国美利奴高山型超细型细毛羊群体的4个血液蛋白位点多态性进行检测发现:血红蛋白(Hb)、转铁蛋白(Tf)、血清酯酶(Es)存在多态性,血浆白蛋白(Alb)呈单态性。对存在多态性的位点与细毛羊经济性状的相关分析表明:中国美利奴高山型超细型细毛羊群体血红蛋白、血浆酯酶位点的不同表现型与体侧毛长、羊毛伸度、羊毛细度及剪毛量等存在显著相关。部分位点可为中国美利奴高山型超细品系培育的早期选种提供辅助依据。     

甘肃马鹿血液蛋白多态性及其与产茸量关系的研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了66头甘肃马鹿的8个血液蛋白位点的基因频率、基因型频率和群体遗传变异指标,建立了产茸量与多态位点之间的线性相关模型.结果表明:甘肃马鹿各蛋白位点中,Tf、Hb、Alb、Pa、Prt1、Prt2、血清ES分别有3、1、1、2、2、2和3种基因型.未检测到红细胞ES;Tf和Prt2的基因型频率偏离Hardy-Wein-berg平衡;Tf的变异程度最大(杂合度为0.586 3),杂合度的大小顺序为Tf>Prt2>ES>Pa>Prt1>Hb=Alb.群体的平均杂合度为0.350 5;各多态住点中仅有Prt1与产茸量之间存在显著正相关(P<0.05),而且Prt1的AA型产茸量明显高于其他各位点基因型.由此可见,Prt1位点的AA型可用来标记甘肃马鹿的品种特征.     

草原红牛ACSL3基因CDS区克隆、生物信息学分析及组织表达研究

试验旨在克隆草原红牛长链酰基辅酶A合成酶3(long-chain acyl-CoA synthetase 3,ACSL3)基因编码区并对其进行生物信息学分析,同时在mRNA和蛋白质水平上分析ACSL3基因在草原红牛不同组织中的表达差异。利用RT-PCR技术和TA克隆的方法获得草原红牛ACSL3基因CDS序列;利用在线软件对ACSL3基因进行生物信息学分析,分析ACSL3基因与其他物种的同源性并构建系统进化树,分析ACSL3基因编码蛋白质的基本理化性质、潜在磷酸化位点、O-糖基化位点、N-糖基化位点、信号肽、二硫键、跨膜区结构、亚细胞定位及该基因编码蛋白的二级结构、三级结构;通过实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测ACSL3基因在草原红牛各组织间的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,试验成功克隆了草原红牛ACSL3基因CDS区,全长2 163 bp,编码720个氨基酸,蛋白分子质量为80.28 ku,理论等电点为8.74,属于亲水性蛋白。通过NCBI中BLAST比对发现,草原红牛与牛、绵羊、猪、人、大鼠、小鼠、鸡的ACSL3基因核苷酸序列同源性分别为99%、97%、93%、91%、88%、88%和78%;系统进化树结果表明,草原红牛与牛、绵羊的亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。该蛋白序列有7个二硫键,66个磷酸化位点,9个O-糖基化位点,3个N-糖基化位点,不存在信号肽,但存在1个跨膜区。二级结构和三级结构分析结果表明,ACSL3蛋白通过无规则卷曲连接,蛋白质结构以α-螺旋和β-转角为主,为混合型蛋白。mRNA和蛋白表达量检测结果显示,ACSL3基因在肾脏和肌肉组织中表达量较高,显著高于其他组织(P<0.05);在胃、肝脏和心脏中中度表达,显著高于脾脏、肺脏、肠和脂肪(P<0.05);在脾脏、肺脏、肠和脂肪中相对低表达,说明草原红牛ACSL3基因可能与体内脂肪沉积和脂质代谢等调控功能有关。本试验结果为进一步研究ACSL3基因在草原红牛中脂质代谢及脂肪沉积等方面的调控作用提供了基础材料。     

秦川牛血液蛋白多态性与繁殖性状关系的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定了秦川牛（148头）血红蛋白（Hb）、运铁蛋白（Tf）、后运铁蛋白（PTf）、血清白蛋白（Alb）和后白蛋白（Pa）的遗传多样性。分析了各多态座位不同基因型与秦川牛若干繁殖性状的关系。结果表明：HbAA型母牛的初情期年龄（AFS），初产年龄（AFC）极显著早于HbAB型母牛（P〈0．01）。TfAA型母牛的初情期和初产年龄显著早于TfDD型母牛（P〈0．05）。PTf SS型母牛的初情期显著早于PTf FS型母牛和PTf FF型母牛（P〈0．05）。Alb AA型母牛的初情期显著早于Alb AC型母牛（P〈0．05）。Tf A基因对D基因的替代平均效应值初情期提前1．68d，初产年龄提前19．89d。AlbA基因对B基因的替代平均效应值初情期提前8．06d。     

新疆天山马鹿血液蛋白多态的研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了40头新疆天山马鹿的血清白蛋白(Alb),前白蛋白(Pro),转铁蛋白(Tf),前转铁蛋白(Prt),血红蛋白(Hb)5个蛋白座位的基因型频率、基因频率和群体遗传变异指标,以便为天山马鹿选种选配繁育工作提供理论依据。结果表明,Alb座位呈单态为AA型,其余各蛋白座位均呈多态。Pro有1种基因型AB,受A、B 2个等位基因控制;Hb有2种基因型AB、BB,受A、B 2个等位基因所控制;Prt有5种基因型AA、AB、BB、AC、BC,受A、B、C 3个等位基因控制;Tf有4种基因型AB、BB、AC、BC,受A、B、C 3个等位基因控制。群体遗传变异分析结果表明,Prt、Tf、Alb、Pro、Hb的杂合度分别为0.667,0.610,0,0.513,0.431。基因多态信息含量分别为0.575,0.528,0,0.375,0.332。平均杂合度为0.4442,平均多态信息含量为0.362,表明天山马鹿的遗传多样性丰富,具有较大的遗传潜力。     

塞北兔血液蛋白多态性研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法对塞北兔血液中的红细胞酯酶（Es-1,ES-3)、血红蛋白（Hb）、红细胞碳酸酐酶（CA）、血清转铁蛋白（Tf）、前转铁蛋白（Prt）、后白蛋白（Po）、白蛋白（Alb）和血清碱性磷酸酶（AKP）共9个蛋白位点的遗传多态性进行了检测。结果表明，在塞北兔群体中，Hb、Alb和Tf呈单态，Es-1、Es-3、Prt、Po、AKP和CA呈多态。根据多态蛋白位点的基因频率计算遗传距离，并用类平均聚类法进行聚类分析。结果表明，塞北兔与比利时兔遗传相似系数最大，遗传距离最近，与加利福尼亚兔遗传相似系数最小，遗传距离最远。     

利草F_1与草原红牛肉用性能比较试验研究

为了进一步研究利木赞杂交草原红牛的肉用性能,选择断奶后小公牛利草F139头、草原红牛79头,在同样的饲养管理条件下,持续育肥至18月龄时屠宰。结果表明,利草F1出栏体重和育肥期日增重极显著地高于草原红牛（P〈0.01）;体躯高度、体斜长、坐骨端宽、胸围、管围、腿围均极显著地大于草原红牛（P〈0.01）,整体结构趋向于偏肉体型;胴体重、屠宰率、净肉率等主要产肉指标极显著地高于草原红牛（P〈0.01）;利草F1肉中的粗脂肪含量较草原红牛有一定的下降,而粗蛋白质的含量有所上升;利草F1的油酸含量比草原红牛下降2.43个百分点;不饱和脂肪酸、与鲜味有关的氨基酸和必需氨基酸总量,利草F1与草原红牛没有明显的变化。     

草原红牛导入利木赞血后产肉性能研究

本试验随机选择相同饲养管理条件下,体重接近、身体健康的7月龄公牛33头,按血缘关系分为三组,草原红牛、含1／2及1／4利木赞血分别为10头、13头和10头。试牛进行为期326 d的育肥试验和屠宰试验,测定分析了体重、日增重、屠宰率、净肉率及背最长肌肉样中粗蛋白、粗脂肪、脂肪酸和氨基酸等多种营养成分。结果草原红牛导入利木赞血后育肥牛出栏体重、日增重、屠宰率和净肉率均有显著提高;肉中粗脂肪含量随着外血量的增加呈逐渐下降趋势,粗蛋白含量变化趋势则相反;肉中脂肪酸和氨基酸的组成与含量无明显变化。表明草原红牛导入利木赞血后可以提高草原红牛的产肉性能且对草原红牛肉的风味和营养价值不产生不利影响。     

5个地方山羊品种血液蛋白多态性及分类的研究

为进一步开发和利用山羊，采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对我国5个地方山羊品种的8个血液蛋白位点进行了多态性检测，结果发现Hb、Alb、Tf、Po、Am等5个位点为多态位点，Cp、Es、Sα2等3个位点为单态位点。通过遗传距离的聚类分析将5个山羊品种分成3类：湘东黑山羊和武雪山羊为一类；内蒙古白绒山羊和辽宁盖县白绒山羊为一类；马头山羊单列为一类。此外，对血清蛋白的染色方法进行了改良。     

草原红牛FABP7基因克隆、生物信息学及组织表达差异分析

本研究旨在克隆草原红牛脂肪酸结合蛋白7基因(FABP7)的CDS区序列并对其进行生物信息学分析,同时检测其在牛各个组织中的mRNA表达水平。利用RT-PCR技术克隆草原红牛FABP7基因CDS区序列,并使用多种生物软件和在线工具进行生物信息学分析,通过qPCR技术检测FABP7基因在各组织间mRNA的表达水平。结果表明:草原红牛FABP7基因CDS区全长399 bp,编码132个氨基酸,蛋白分子量为14.96 ku,理论等电点为5.38,属于亲水性蛋白;通过NCBI-BLAST对比发现,草原红牛与普通牛、羊、猪、人、鼠、鸡的核苷酸序列同源性分别为99%、98%、94%、92%、85%、85%,系统进化树结果发现,草原红牛与普通牛亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远;FABP7蛋白序列有1个二硫键,14个磷酸化位点,1个N-糖基化位点,不存在信号肽和跨膜区;在蛋白的二级结构和三级结构中发现,FABP7蛋白主要存在2个α-螺旋结构和10条β-折叠,为混合型蛋白。FABP7基因在小肠组织表达量最高,在心脏、脂肪和胃中中度表达。