从包涵体中纯化重组小鼠Nanog转录因子

利用BL21/pET-32a-Nanog表达菌株诱导表达Nanog融合蛋白,经破碎、高速离心、洗涤,获得Nanog蛋白粗制品,用8 moL/L尿素变性溶解Nanog融合蛋白,离心取上清,进行Histrap HP亲和层析纯化,复性,经SDS-PAGE和Western Blot鉴定得到了纯度为97%以上的重组小鼠Nanog蛋白.建立了一种可行的从包涵体中纯化重组小鼠Nanog蛋白的方法,为Nanog蛋白的活性检测及其基因表达调控机理的功能研究奠定基础.     

哈维氏弧菌溶血素的包涵体纯化、多抗制备及活性验证

为进一步研究哈维氏弧菌溶血素(Vibrio harveyi hemolysin, VHH)的生物学功能,构建了vhh原核表达载体,并利用纯化的重组蛋白制备多克隆抗体,采用DOT-ELISA和Western-blot方法检测抗体的效价及特异性,并通过溶血试验评估抗体对哈维氏弧菌培养物上清溶血活性的影响。结果表明:在构建得到的表达菌株pET28a-vhh-BL21(DE3)中,重组蛋白以包涵体形式大量表达;对该重组蛋白进行纯化并复性后,利用纯化的蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体效价为1∶163 840,可特异性识别VHH蛋白,且稀释倍数小于1000时,可显著抑制哈维氏弧菌培养物上清的溶血活性。本研究结果对VHH单抗的制备、哈维氏弧菌检测手段的完善及哈维氏弧菌的疫苗研发具有一定参考作用。     

鸡包涵体肝炎的病理学研究

介绍了河北省中南部地区１９９４－－１９９５年间,８７个鸡场,３２００万只鸡发生鸡包涵体肝炎的系统病理学研究。结果表明,病鸡发生以肝脏严重变性、坏死,并在肝细胞核内形成核内包涵体的特征性病变。同时,机体免疫器官发生广泛损伤,产蛋鸡生殖器官发迟缓或停滞。     

鸡包涵体肝炎病毒内蒙古毒株的分离与鉴定

本试验利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织，通过SPF鸡胚连续传代和鸡胚肾细胞培养，分离到一株鸡包涵体肝炎病毒HA株．该病毒株的核酸型为DNA、无束膜、对乙醚、氯仿具有抵抗力；且其对酸有抵抗力，对热敏感。电镜观察发现，病毒粒子呈球形，直径约80～100nm。用2、3、4、5、8型的标准阳性血清迸行中和拭验，证明HA株为血清型2型。回归试验表明HA株具有较强的致病性。     

狂犬病神经元包涵体的观察

观察患狂犬病的牧羊犬大脑皮层海马的锥体细胞浆内的包涵体。对一只患狂犬病的牧羊犬进行病理学剖检及抗原检测,并取病犬大脑皮层的海马回部组织制作组织学切片观测包涵体。病理剖检结果表明,尸体无特征变化。取犬唾液和脑组织匀浆液进行抗原检测,结果均呈阳性。根据发病情况、病理学剖检及抗原检测,可诊断为狂犬病。在患狂犬病的牧羊犬大脑皮层海马的锥体细胞浆内有2~5μm的圆形或椭圆形紫红色的包涵体。     

鸡包涵体肝炎病毒内蒙古毒株的分离与鉴定

本试验利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织，通过SPF鸡胚连续传代和鸡胚肾细胞培养，分离到一株鸡包涵体肝炎病毒HA株。该病毒的核酸型为DNA、无束膜、对乙醚、氯仿具有抵抗力；且其对酸有抵抗力，对热敏感。电镜观察发现，病毒粒子呈球形，直径约80－100nm。有2、3、4、5、8型的标准阳性血清进行中和试验，证明HA株为血清型2型。回归试验表明HA株具有较强的致病性。     

包涵体蛋白的复性研究进展

介绍了包涵体的洗涤、变性溶解和传统的复性方法,详细阐述了包涵体蛋白的层析复性方法以及复性过程中的添加剂效果。     

重组蛋白包涵体的研究进展

在介绍包涵体形成原因、特性及利弊的基础上,重点阐述了包涵体的复性前准备、主要复性方法及提高复性效率的有效措施。     

杆状病毒包涵体蛋白基因的进化

在分析了ＨａＳＮＰＶ和ＥｏＳＮＰＶ多角体蛋白基因核苷酸序列的基础上,通过ＭＡＬＩＧＮ程序,比较了目前已发表的２６种杆状病毒包涵体蛋白序列,ＨａＳＮＰＶ与ＨｚＳＮＰＶ亲缘关系十分接近,两ａａ序列同源性达９７．６％,ＥｏＳＮＰＶ与黄极毒蛾核型多角体病毒的同源性为最高,ｎｔ序列的同不原性为８３．０％,ａａ序列达９４．７％与其它２０种鳞翅目ＮＰＶ的同源性也很高,ｎｔ序列同源性为７２．６％－８１．９％,ａ     

新疆卡拉库尔羊Fas基因重组蛋白包涵体的纯化及抗原性分析

目的:为了探明Fas基因重组蛋白是否保留天然蛋白的抗原性,为下一步大量制备基础诊断、预防、控制、治疗试剂奠定基础.本实验将Fas基因与原核表达载体pET-28a成功构建了重组融合表达质粒pET-28a-Fas然后转化至E.coliBL21(DE3)感受态当中,找到最佳表达条件,初步纯化了重组融合蛋白,通过对家兔免疫后的血清进行琼扩实验与蛋白质印迹实验分析其抗原性.结果表明,纯化后的包涵体有明显的条带,经测定融合蛋白分子量为39.7 KDa.结论:说明纯化效果好,优化融合蛋白表达量占菌体总蛋白的15.6％,并且证明Fas具有免疫原性和反应原性.     

现代园林设计的要点分析

园林设计是一项非常复杂的工作,根据园林设计的理论知识与园林设计的实践经验,对现代园林设计的要点进行了详尽的分析和探讨,以期对园林设计的理论发展与实践进步有所裨益。     

如何应对温室火灾带来的灾难——三个温室种植者谈如何在温室火灾之后恢复生产

在温室种植者的脑海中,火灾并不是一个他们愿意考虑的问题,但当火灾在没有任何准备的情况下一旦发生,则后果是毁灭性的。温室的火灾在任何时刻都可能发生,其潜在的破坏力会伤及温室骨架和各种设备,对温室内作物的破坏是十分巨大的,不仅会使你损失大量的金钱,还会造成不同时期内商业机会的丧失。以下就是三位曾经遭受温室火灾危害的种植企业在经历了这些危难后所收获的经验和教训,他们分别是:位于美国北卡罗来纳Huntersville的Metrolina温室、位于美国马萨诸塞州普利茅斯的Len Busch玫瑰温室和位于美国弗吉尼亚州Rapidan的Battle?eld农场…     

论土壤保墒技术的要点分析

通过长期的农业实践表明土壤保墒技术对于作物生长非常关键,不但为作物生长提供了充足的水分,也改善了土壤环境.由此可见,我们要想保证作物稳产高产,做好土壤保墒工作是非常必要的.主要探讨了土壤保墒的全过程,并对土壤保墒技术的要点进行了重点分析.     

关于保温复合墙体的结构处理方法

本文对复合墙体的构造特点和受力特征进行了分析,为保证维护墙体的稳定性和防止墙体的开裂提出了相应的构造措施,对复合墙体和基础的结构计算进行了分析,供设计和施工人员参考。     

基因工程菌表达效率对细菌总蛋白和包涵体中目的蛋白含量的影响

测定了猪生长激素基因工程菌不同表达效率时细菌总蛋白的含量以及包涵体中重组猪生长激素占包涵体总蛋白的比值。结果表明:随着表达效率的提高,细菌总蛋白含量缓慢增加,最后稳定在一定水平上;当表达效率增加,包涵体中重组猪生长激素占包涵体中总蛋白的百分数也增加,两者上升趋势基本一致。     

莠去津的环糊精包合物对稗草幼苗除草效果的影响

以稗草为指示材料,用水培法研究了三嗪类除草剂莠去津的环糊精包合物对稗草幼苗除草活性的影响.试验结果表明:用不同浓度的β-环糊精(β-CD)包合物浸种处理后,能抑制稗草根系发育,达到提高除草效果和缓释的作用.当莠去津与β-CD包合物浓度均为6.5 mg·mL-1时,抑制效果达到最好,对稗草主根长、根鲜重、芽长和芽鲜重的抑...     

论杨树栽植技术要点研究

杨树作为江淮地区目前栽植的主要树种之一,有着较好的经济和生态效益,发展前景较为广阔。每年的春、秋季是植树造林的大好时机,但部分农民由于植树时间把握不准、管理不当,经常出现"年年植树年年黄,到了秋天进灶塘"的现象,给林业生产带来了一定的损失。结合笔者多年实践工作经验,在杨树栽植过程中提出注意以下几点,可确保杨树存活率在95%以上,与大家共同探讨。     

征地过程中的各方利益主体博弈分析

土地征收引发的社会风险及矛盾日益凸显,给社会的稳定和谐带来一定威胁.通过对中央政府、地方政府及农民之间的博弈分析,明确了征地过程中各方利益主体的行为选择及动机,并得出违规征地的处罚力度及征地补偿费是影响各利益主体行为选择关键的结论.     

论农村社会管理体系中“四个主体”的作用

农村社会管理主体有四个,即基层党组织、基层政府、农村社会组织和农民。由于各主体作用异化,未能形成合力,致使农村社会管理长期存在缺陷;实现农村社会管理目标,必须整合"四个主体",使之形成合力,充分发挥他们主体作用。