燕子掌的组织培养与植株再生

以燕子掌叶片为外植体,在培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA,研究燕子掌组培苗形成过程中6-BA和IBA浓度对各阶段的影响.结果表明:MS+IBA 5 mg/L+6-BA 5mg/L为愈伤组织诱导的最佳培养基,分化不明显,且诱导率为95.56％;MS+-IBA 2 mg/L+6-BA1 mg/L为外植体直接诱导不定芽的最佳培养基,平均可达12芽以上;MS+IBA5 mg/L+6-BA5 mg/L为愈伤组织增殖最佳培养基,增殖倍数为10.9;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ IBA1 mg/L+6-BA5 mg/L,单位面积茅数为32个以上,且芽明显;壮苗的最佳培养基为MS+ IBA2 mg/L,45 d后平均苗长为4.74 cm;诱根的最佳培养基为MS+IBA 0.5 mg/L,诱根率为100％.     

色素万寿菊叶片再生体系的建立及优化

以色素万寿菊叶片为外植体,探讨了不同的植物生长调节剂组合、AgNO3、凝胶剂及不同的继代培养基对叶片器官发生的影响。结果表明：6-BA 3.0 mg · L-1 + IAA 3.0 mg · L-1 + 蔗糖30.0 g · L-1 + 植物凝胶6.0 g · L-1的MS培养基适宜不定芽的分化,不定芽分化率达97.5%,将分化13 d的叶片外植体转接到组织培养瓶中,30 d后56.7%的不定芽可发育成高约5 cm的植株,再生植株在MS培养基上生根率为100%,移栽成活率达100%。     

欧李离体叶片再生体系的建立

【目的】以欧李试管苗叶片为外植体进行不定芽再生研究,以期为核果类果树的品种改良、基因遗传转化和功能验证等生物技术育种奠定一定的基础,【方法】使用不同的基本培养基和激素组合促进其不定芽再生并建立再生体系。【结果】结果表明,欧李幼芽增殖对基本培养基类型较敏感,改良MS培养基优于MS、F14和WPM。在MS(改良)+NAA 0.1 mg.L-1+BA 0.2 mg.L-1培养基上,增殖系数为5.6,增殖效果较好。离体叶片不定芽再生的最适植物生长调节剂组合为MS(改良)+TDZ 4.0 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1,再生率达到63.1%,平均每外植体再生芽数为4.9。暗培养10 d可以提高不定芽再生率。再生不定芽1/2 MS(改良)+IBA3.0 mg.L-1培养基上生根率最高,生根率达93.3%。【结论】在改良MS培养基上TDZ与IBA组合诱导不定芽再生的效果最好。     

现代月季(Rosa hybrida)叶片植株再生体系的建立

 本试验对冰山、金秀娃、火球等24个现代月季(Rosa hybrida)品种再生体系进行了研究，结果表明：部分品种可从叶柄砧处直接再生出小苗；基因型、植物生长调节剂组合、暗培养时间及叶片的幼嫩程度对现代月季叶片的再生影响很大，暗培养和幼叶均有利于再生。24个现代月季品种中l2个品种再生出了不定芽；现代月季品种冰山幼叶暗培养30 d后的再生率可从无暗培养的15．6％提高到45．6％ ；冰山顶生3片叶、中部叶片及基部叶片的再生率分别为46．5％ 、12．9％ 和0。适宜现代月季叶片不定芽再生的培养基为Ms+6一BA 6．0 mg·L +ZT 6．0 mg·L +IBA 0．4 mg·L～；芽伸长培养基为MS+6一BA 2．0mg·L +IBA 0．1 mg·L～；生根培养基为l／2 MS+NAA 0．2 mg·L +0．1％活性炭。     

影响苹果叶片不定芽再生的几个因素

影响苹果叶片不定芽再生的几个因素孙清荣（山东省果树研究所泰安２７１０００）１９８５年Ｈｏｒｓｃｈ等首创叶盘法，采用烟草叶片切块进行基因转移，获得了转基因植株。本文研究了除叶片切块之外的另３种切伤方法及两种不同放置方式对叶片不定芽再生的影响，同时比较了...     

黑莓试管苗叶片植株的再生

以黑莓带芽茎段试管苗叶片为外植体,诱导形成不定芽并进一步形成再生植株。在MS+TDZ2.0mg/L的培养基中叶片不定芽最高分化频率达93.7%(6.52不定芽/外植体),在不定芽伸长培养基BA0.5mg/L上,分化完全的不定芽能够长大伸长,当其高度达到4cm时,切下转接于IBA为0.3mg/L培养基上诱导生根,生根率100%。     

‘苹果梨’离体叶片再生体系的建立

【目的】为了给梨转基因研究提供稳定、高效的离体再生体系,【方法】以‘苹果梨’为试材,NN69作为基本培养基,研究了植物生长调节剂种类、暗培养时间及外植体类型等因素对其再生体系建立的影响,筛选出较适合‘苹果梨’不定芽分化的培养条件。【结果】结果表明,较适合‘苹果梨’分化的外植体为继代4次以上(含4次)的组培苗叶片,适宜分化的培养基为NN69+1.5 mg.L-1TDZ+0.4 mg.L-1NAA,结合20 d的暗培养,再生频率达到71.00%,平均再生芽数为2.21。【结论】影响‘苹果梨’离体叶片再生的最关键因素是外植体的继代次数。     

桃叶片再生不定芽的研究

以桃栽培品种曙光、金童5号和甜桃王试管苗叶片为外植体,研究了基本培养基、植物生长调节剂种类及质量浓度组合、基因型和试管苗继代次数等因素对叶片再生的影响。结果表明,适宜暗培养的培养基为LP+1.5mg·L-1TDZ+0.15mg·L-1NAA;光培养基为LP+0.5mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.3mg·L-1NAA和LP+0.6mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.4mg·L-12,4-D;金童5号和曙光具有较强的再生能力,再生率分别为21.8%和14.5%;曙光和金童5号试管苗继代第1～11次叶片的再生能力与继代前3次愈伤组织相比形成率较高;曙光再生苗在培养基1/2MS+0.5mg·L-1NAA上生根率为100%,平均生根条数为7.9。     

库尔勒香梨叶片不定芽再生诱导的研究

以库尔勒香梨幼叶为外植体,研究基本培养基种类、外源激素浓度、AgNO3浓度及接种叶片的放置方向对叶片不定芽再生的影响。结果表明:培养基的种类是影响叶片能否获得再生不定梢成功的关键,NN69培养基是香梨叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+TDZ 1.0mg/L+IBA 0.3mg/L为最佳;附加0.5mg/L AgNO3有利于叶片再生;以叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基更利于不定芽的再生;结合21d暗培养香梨叶片再生频率最高可达到64.3%,再生芽数最高为2.59。     

甜瓜再生体系的建立

以葫芦科的甜瓜为试验对象,探讨不同基因型、不同激素浓度配比及抗生素胁迫对其不定芽萌发的影响,以期建立甜瓜再生培养体系,为甜瓜遗传转化奠定基础.结果表明,甜瓜在初代培养时,不定芽发生的培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA,甜瓜再生率最高,达到92.5％;甜瓜在继代培养中,0.3 mg·L-16-BA的处理最适宜不定...     

甜叶菊叶片高频再生体系的建立

以“守田3号”甜叶菊叶片为外植体,研究了消毒时间、外源激素等因素对外植体成活率、不定芽的诱导、不定芽继代培养和生根的影响.结果表明:用0.1％的升汞处理3 min为最佳消毒方法,最佳的不定芽诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA-1.0 mg/L IAA+300 mg/L水解酪蛋白,平均诱导率为80％;最佳不定芽继代培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3 +4.0 mg/L KT;最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IAA,生根率为100％,所获得的再生苗生长健壮且移栽后成活率高,最终建立了甜叶菊最佳的再生体系.     

甜叶菊叶片外植体再生体系的建立

以甜叶菊品种"中山二号"为试材,首先选用叶片、茎段和茎节3种外植体,在添加3种植物激素萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid,NAA)、苄氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine,BAP)和激动素(kinetin,KT)不同浓度组合的MS(murashige and skoog)培养基上培养,明确其对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。以叶片作为外植体,使用激素噻苯隆(Nphenyl-N′~(1),2,3-thidiazol-5-yl-urea,TDZ)替换NAA(BAP和KT浓度范围不变),在不同浓度组合的MS培养基上进行愈伤组织、不定芽和丛生芽诱导,以期建立一套快速、有效的甜叶菊再生体系。结果表明:在培养基中TDZ浓度达到3.0mg·L~(1)、BAP 1.0mg·L~(1)和KT0.5mg·L~(1)时,诱导的愈伤组织分化的不定芽最多,且随后形成了大量的丛生芽。丛生芽继代到无添加激素的1/2MS培养基上,能够继续生长,分化成茎叶和根,形成完整植株。该再生体系生产周期短、繁殖系数高,可用于生产上大规模快速繁殖和基因转化研究。     

枣离体叶片高效再生植株的研究

 以‘黄骅冬枣’组培苗叶片为试材, 研究了叶片幼嫩程度、叶片来源、组培苗状态以及植物生长调节剂等对离体叶片诱导不定芽再生的影响, 并获得了完整的再生植株。结果表明, 以未生根组培苗中上部叶片再生效果较好; TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于BA; 离体叶片在MS + TDZ 1.0 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中诱导培养28 d后, 转入MS + IBA 0.1 mg·L ^{- 1} + GA₃ 0.05 mg·L ^{- 1}培养基中二次培养, 叶片再生效果最好, 再生率可达92.45%。将叶片再生植株转入MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} + KT0.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中继代增殖培养, 增殖系数达3.64。以1 /2MS + IAA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基诱导生根, 生根率87.1%。生根苗大田移栽成活率达到57%。     

薰衣草叶片高频再生体系的建立

 以薰衣草叶片为外植体进行了离体再生研究。结果表明: 叶片愈伤组织诱导最佳的培养基是MS + 2,4-D 0.1 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L, 诱导率高达100%; 液体悬浮—固体培养芽分化率达92.5% , 芽数/愈伤组织达6.6; 正交试验筛选出芽增殖最佳培养基为MS +NAA 2.0 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L + IAA 1.0 mg/L, 其增殖系数高达8.7; 在芽增殖培养基上可直接生根, 生根率达100%。     

‘丰香’草莓叶片高效再生体系的建立

 以草莓主栽品种丰香( Fragaria ×ananassa Duch ‘Toyonoka’) 叶片为外植体, 研究了影响组织培养的多个因素, 建立了高效再生体系。结果表明: MS + TDZ 1.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.4 mg·L ^{- 1}培养基最适于不定芽分化。不同滤光膜(绿膜、红膜、蓝膜、黄膜) 对草莓不定芽的分化具显著效应, 绿膜和红膜对芽的分化有明显促进作用, 不定芽再生率达95%以上, 平均每个外植体再生芽数在25个以上; 而蓝膜和黄膜则不利于芽的分化。不同滤光膜光谱差异主要集中在300～700 nm, 红、绿膜在该波段光强较弱,而黄、蓝膜和荧光灯较强。暗处理4周比1、2、3周更有利于提高叶片的不定芽再生率, 此后转到光下培养, 获得的不定芽再生率可达100%。     

斑点大吴风草叶片再生体系的建立

现以斑点大吴风草为试材,系统研究了灭菌方式、激素等因子对叶片再生的影响,建立了斑点大吴风草不定芽的高频再生体系。结果表明:建立斑点大吴风草无菌培养物的较好方法是0.1%HgCl2加吐温-80处理叶片10 min;适宜的不定芽诱导培养基MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L;最佳的不定芽增殖培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;其增殖系数可达到6.05;其芽长至2~3 cm时,最佳的生根培养基是1/2MS+NAA 0.05 mg/L,生根率达到100%,最终得到完整的植株。该再生体系可作为基因转化的受体系统。     

非洲菊再生体系的建立

以非洲菊幼嫩花托为外植体,以MS为基础培养基,研究了添加6-BA和NAA的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽发生和丛生芽生根的影响。结果表明:花托的大小影响到愈伤组织的诱导和褐化,0.8cm的花托愈伤组织的诱导率高且褐化率低;愈伤组织诱导和芽分化的适宜培养基为MS+6-BA 10mg/L+NAA 0.2mg/L,丛生芽增值的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,生根培养基为1/2MS+IAA 0.2mg/L。     

甜瓜再生体系的建立

以‘鑫福999’甜瓜5 d龄无菌苗的子叶、下胚轴、真叶为外植体,研究了添加6-BA、IAA和2,4-D的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽的发生和丛生芽生根的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最适外植体为子叶,由子叶诱导的愈伤组织生长速度最快、品质最好、数量最多,最适愈伤组织的诱导培养基为MS+IAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L。最适宜诱导丛生芽的外植体为子叶,最适丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0 mg/L,最适生根培养基为MS培养基。     

萱草再生体系技术建立的研究

以萱草的根茎为材料,进行愈伤组织诱导和分化,试管苗的生根、移栽和移植的研究,建立萱草再生体系技术。结果证明:MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L+2,4-D0.1mg/L是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS+NH_4H_2PO_450mg/L+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L是愈伤组织增殖继代培养的理想培养基;MS+AgNO_30.5mg/L+GA_30.5mg/L+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;1/2MS+NAA0.1mg/L+IAA0.2mg/L是不定芽生根培养的理想培养基。在河沙中试管苗易移栽成活;移植到花坛中的试管苗根系发达、生长旺盛。     

颠茄植株再生体系的建立

以颠茄种子萌发的无菌苗为试材,采用组织培养方法,以MS为基本培养基,研究IAA、NAA、6-BA、KT对愈伤组织诱导及分化的影响,探索适宜颠茄愈伤组织诱导和分化的培养基。结果表明:在MS+KT 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L和MS+KT 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基上,愈伤诱导率较高达100%,KT、6-BA添加生长素配比诱导愈伤组织效果不佳。KT单独诱导的愈伤组织宜在20d后转接,KT和6-BA配合使用诱导出的愈伤组织宜在40d后转接。生根适宜培养基为1/2MS+NAA 0.2~0.4mg/L。该研究建立了颠茄的植株再生体系,为颠茄的组织培养提供了技术体系。