苹果果肉总蛋白提取及双向电泳分析

以苹果果肉为试材,通过比较总蛋白不同提取方法 (TCA-丙酮沉淀法、匀浆法以及改良酚抽提法),建立适于苹果果肉总蛋白提取技术。从所得双向电泳图谱分离效果来看,改良酚抽提法所得蛋白点个数最多、图谱背景清晰,分离效果好,明显优于TCA-丙酮沉淀法和匀浆法。同时,通过对各图谱分离效果的综合比较,认为在现有研究条件下,苹果果肉总蛋白双向电泳分析的理想上样量为250μg。     

苹果叶片总蛋白提取及其双向电泳分析

蛋白质提取方法和电泳条件的建立是蛋白质组学研究中双向电泳分析的关键。通过比较不同提取方法,包括酚/SDS抽提、TCA-丙酮沉淀法、甲醇/醋酸铵沉淀法以及改良HB-酚抽提方法。此外,还优化了样品上样量、等电聚焦程序设置等条件。从所得2-D图谱分离效果来看,改良HB-酚抽提方法所得蛋白点数最多,2-D图谱背景清晰、分离效果好,明显优于其他3种方法。300μg上样量可作为苹果叶片总蛋白2-DE分析的理想的上样量,同时优化了等电聚焦程序,最终得到的2-D图谱分离效果较为理想。该研究的开展也为苹果叶片蛋白质组学后续研究奠定了基础。     

新红星苹果花芽蛋白质提取及双向电泳的改良方法

以新红星苹果花芽为材料,探索适合蛋白质的提取方法及其双向电泳的条件。采用物理和化学2种方法充分裂解植物组织细胞,并用低温操作加入PVP等去除植物大量的酚类物质,最后离心去除不溶性杂质的苹果蛋白质组双向电泳(2-DE)样品制备方法,第1向为ISO-DALT等电聚焦,第2向为垂直平板SDS-PAGE。通过对样品制备、双向电泳参数的选择及染色等方面进行优化,电泳图谱可分辨出蛋白质斑点数在519个以上,蛋白质相对分子质量约为14.0～97.0ku,主要分布为14.0～67.0ku;等电点约为3.5～9.0,主要分布在4.0～7.0。     

苹果叶片叶绿体分离及其蛋白提取、双向电泳方法的优化

【目的】筛选苹果叶片叶绿体及其蛋白的提取方法,建立叶绿体蛋白双向电泳分离技术体系。【方法】以苹果叶片为试材,采用4种Percoll密度梯度离心法提取苹果叶片叶绿体,检测提取叶绿体的完整度、纯度及提取率。采用酚抽提法、改良酚抽提法提取叶绿体蛋白,检测蛋白样品的质量。优化胶条长度、上样量、等电聚焦程序、分离胶浓度等双向电泳条件。【结果】Percoll密度梯度离心法D提取的叶绿体纯度高、提取率高,优于其他3种方法;改良酚抽提法提取的叶绿体蛋白,经2-DE分离所得蛋白点数多、分离效果好,优于酚抽提法。蛋白样品经优化后的双向电泳体系分离,获得了较为理想的2-DE图谱。【结论】Percoll密度梯度离心法D、改良酚提法适于苹果叶片叶绿体及其蛋白的提取。苹果叶片叶绿体蛋白使用优化后的双向电泳体系进行分离,可以获得比较理想的2-DE图谱。     

枇杷叶片和果实总蛋白质提取及双向电泳的优化方法

以枇杷叶片和果实为材料,探索适于枇杷总蛋白质分析的双向电泳方法.比较2种不同蛋白质提取方法对双向电泳结果的影响,并对双向电泳蛋白质上样量、等电聚焦条件等进行了优化,探索出一种适于枇杷叶片和果实总蛋白质分析的高分辨率、高重复性双向电泳方法.采用酚抽法提取枇杷叶片和果实蛋白质,以24 cm、pH 4~7的IPG胶条,按15...     

桃果实蛋白质双向电泳影响因素的研究

以‘大久保’桃（^{Prunus persica} L.'Okubao'）果实为试材,通过比较不同上样量、不同上样缓冲液、不同平衡缓冲液、不同染色方式等条件下的双向电泳图谱,探讨以上各因素对桃果实双向电泳图谱效果的影响。结果表明考马斯亮蓝染色后的电泳图谱虽然蛋白质点的数量少于银染色后的图谱,但背景较为清晰,适用于蛋白质组分析。采用固相pH梯度17 cm胶条,100 μg蛋白质上样量,样品干粉溶于375 μL含有硫脲、磺基三甲基胺乙内脂3~10的上样缓冲液中,等电聚焦后用含有磷酸三丁酯的平衡缓冲液还原,进行SDS-PAGE,银染色得出的双向电泳图有蛋白点1 209个,纹理较少,适用于桃果实蛋白质组学分析且兼容于下游技术的蛋白质质谱鉴定。     

中国苹果属植物果实表皮微形态特征及其系统评价

采用数码显微系统对中国苹果属21种植物腊叶标本和新鲜成熟果实的表皮细胞微形态特征进行了观察,探讨了苹果属植物果实表皮微形态特征及其系统演化关系。结果表明:21种苹果属植物果实表皮细胞大小、细胞间隙、相邻细胞之间共有细胞壁上纹孔数量、纹孔宽度都有不同程度的差异,细胞的排列模式有放射状纹饰、轮状纹饰、局部轮状纹饰和有轮状迹象等4种。根据修正后的Langenfeld系统,将果实表皮细胞微形态特征及其细胞排列模式特征进行对比分析,认为苹果属植物果实表皮细胞微形态特征的系统演化趋势是细胞由小到大,细胞间隙由窄到宽,纹孔数量由少到多,纹孔宽度由窄到宽,表皮细胞排列模式的系统演化趋势是放射状纹饰→轮状纹饰→局部轮状纹饰→有轮状迹象。支持苹果属分为4个组,4组植物对应的系统演化趋势为多胜海棠组→花楸苹果组→山荆子组→苹果组。证明果实表皮微形态特征对苹果属植物分类及系统评价能够提供有价值的信息。     

苹果果实人工增色方法

由于采收过早、气候影响及结果部位遮光等原因,往往导致苹果果实着色不佳,影响外观品质,降低经济效益。现介绍几种人工使果实增色的方法。一、激素增色法1．在正常采收前10－30天,喷施750－1000倍乙烯利溶液,在乙烯利溶液中加入（40－60）×10（－6）的萘乙酸（或萘乙酸钠盐）,可防止落果,同时喷药后的果实全红和半红果明显增多,且含糖量增加。喷施乙烯利时应注意：处理树必须健壮,同时使果面充分着药。2．在果实膨大期和果实着色期两次喷布（500－600）×10（－6）的稀土溶液,对苹果着色和增产有明显作用,能使80％－96％的果实…     

提高苹果果实品质的途径

随着苹果总产量的增加和人民消费水平的不断提高。果品质量越来越受到重视,质量差价也越来越明显。但当前部分果区还存在着果个偏小、果形不正、着色不良、果面不光洁、风味较淡、肉质松绵、香气不足等问题,在部分果农中还存在着只片面追求高产而忽视质量的现象。为此,必须转变观念,通过各种措施提高苹果的综合品质,这样才能在口趋激烈的果品竞争中求得生存,才能不断开拓国际市场,增加收益。 1 选择优良品种,适地适栽 当前苹果新品种不断出现,品种更新速度加快,品种差价越来越明显。陕西目前苹果生产     

苹果杂交育种果实遗传性状的观察

有性杂交是目前培养优良新品种的基本手段,似所需时间较长,杂种后代广泛分离,在遗传变异的规律方面,有许多问题需探讨和认识。我所从1973～1979年先后三次进行苹果杂交,1980年以来部分品系陆续结果,现将观察到的初步结果整理如下。 一、进入结果期早晚 杂种实生苗进入结果期普遍比原亲本晚2～7年,且与亲本结果早晚有直接关系,尤以母本优势明显。因此,为了提早进入结果期,除采用早果的技术措施外,选择早实亲本,特别是母本,十分重要。 二,果实成熟期 不同成熟期品种杂交,其后代一般倾向于成熟早的亲本,或介于双亲之间,很少有晚于亲本的现象。…     

苹果果皮色泽的遗传研究

结合苹果杂交育种,对苹果果皮色泽(底色和表色)的遗传动态进行系统分析.结果表明:苹果果皮色泽受底色和表色的共同作用,色泽的表现受亲本色泽程度及质量的影响.果皮底色和表色均为主效基因控制.果皮底色受多对基因遗传控制,底色黄色和底色绿色之间可能是不完全显性.果皮表色是带有数量性状遗传特点的质量性状遗传,表色红色对非红色是显性,但色泽程度受若干修饰基因的影响.     

苹果果实中蛋白质磷酸化对淀粉酶的激活

 用红富士苹果进行的研究表明，果实淀粉酶测定介质中加入ATP可显著激活淀粉酶活性，激活的幅度与ATP浓度有关。结合蛋白激酶抑制剂试验，表明苹果果实淀粉酶受到蛋白质磷酸化的激活。关键词：中图分类号：S 661．1     

Molecular Characterization of Some Apple Accessions Using DNA Markers Associated with Fruit Skin and Flesh Colour

Apple (Malus domestica Borkh.) is one of the most widely grown and economically important fruit crops in the world. Skin colour is one of the most important criteria for marketing of apple fruits. Thus, improving fruit colouring is one of the main objectives of apple breeding programs. Even though environmental conditions may affect the colouring of apple, understanding the genetic basis of colouring is important to accelerate the breeding process. In recent years, molecular biology and genetic studies were conducted to explore the molecular basis of colouring in apple. Many genes responsible for the anthocyanin synthesis were identified and their associations with colouring of apple fruit flesh and/or skin were demonstrated. In addition, some DNA markers associated with fruit flesh and skin colour have been developed for screening apple cultivars and hybrids. In this study, 90 apple accessions of international, national, and local decents were selected from the genetic resources collection. Genomic DNA was isolated from leaf tissue of all acession and screened with four different DNA markers associated with fruit flesh and skin colour. Apple accessions in the collection were characterized and their genotypes and genetic potential for fruit colouration were determined by different DNA markers. Additionally, the use of these DNA markers in different apple accessions, well-characterized cultivars and uncharacterized local and national types were investigated.

     

酸柚硼毒害蛋白质双向电泳技术体系的优化

以硼毒害下酸柚实生苗的根和叶为试验材料,对双向电泳技术中的样品制备方法、蛋白上样量、凝胶染色方法等条件进行了优化,建立了适用于柑橘蛋白质组研究的双向电泳技术体系。结果表明,使用改良后的酚抽法提取柑橘总蛋白效果较好,所获蛋白在2-DE图谱上获得的点数较多;当采用pH 4～7 IPG胶条、上样量为1.5 mg时,蛋白点分布广,点数最多;使用胶体考马斯亮蓝染色法,可得到背景清晰、重复性好、蛋白点分辨率较高的双向电泳图谱。该体系为开展柑橘硼胁迫的蛋白质组学研究提供了技术基础。     

葡萄种子蛋白质双向电泳体系的建立

为了进行葡萄种子蛋白质组学的研究,以葡萄种子为试材,通过对比粗蛋白质不同溶解方法、IPG胶条、上样量、等电聚焦参数以及不同SDS-PAGE分离胶浓度对双向电泳效果的影响,建立了适合葡萄种子的双向电泳体系。结果表明:TCA-丙酮提取蛋白质经酚抽提后蛋白质溶解快、杂质少、浓度高,筛选获得17cm pH 5~8的IPG胶条,上样量600μg,第一向的聚焦步骤达到80 000Vh以及11%的SDS-PAGE分离胶的双向电泳参数,蛋白质分离效果好。所建立的双向电泳体系,适用于不同葡萄品种的种子蛋白质分离。     

甘蓝柱头蛋白质双向电泳体系的建立

蛋白质提取方法和电泳条件是蛋白质组学研究中双向电泳的关键。为建立适合甘蓝柱头总蛋白质的双向电泳体系,本试验以甘蓝柱头为材料,采用改良TCA/丙酮沉淀法提取柱头总蛋白质,通过对IPG胶条、上样量、聚焦程序、SDS-PAGE胶浓度等的优化,建立了甘蓝柱头总蛋白质双向电泳体系,即选用长17 cm、pH 3～10 NL的IPG胶条,上样量150 μg,按照聚焦程序Ⅰ进行等电聚焦,第二向SDS-PAGE胶浓度选用12%,得到了分辨率高、重复性好的双向电泳图片。     

番茄子叶总蛋白双向电泳体系的建立

通过对IPG胶条梯度、上样方式、上样量、聚焦条件等4方面条件的优化,建立了番茄子叶总蛋白双向电泳体系,即采用TCA丙酮沉淀法提取番茄子叶总蛋白,选用24 cm pH3-7NL的IPG胶条,采用水化上样,上样量300 μg,按聚焦程序Ⅰ或Ⅱ聚焦后进行双向电泳分离和银染染色。若采用制备胶,以获取高含量蛋白点,则将上样量提高至1.5 mg,按聚焦程序Ⅲ进行聚焦后进行双向分离,并采用胶体考马斯亮蓝染色。采用该优化的体系可以获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。     

套袋对苹果果实品质影响的研究进展

综述了套袋对苹果外观和内在品质的影响及其内在机理的研究进展,指出了套袋存在的问题及研究方向。     

The King Fruit versus Lateral Fruit Thinning Effects on Yield and Fruit Quality in Apple

ABSTRACT

This research was conducted to determine the king versus lateral fruit thinning effects on yield and fruit quality of ‘Elstar’, ‘Granny Smith’, ‘Starkrimson Delicious’, ‘Ultra Red’, ‘Topred’, and ‘Jonagold’ apple (Malus domestica Borkh.) cultivars grafted on MM106 rootstock in 2002-2003. Removal of the king fruit (KFR) treatment partially increased the yield in ‘Jonagold’, ‘Elstar’, and ‘Granny Smith’ cultivars while the effects were different by years in “Starkrimson Delicious”. Leaving of the king fruit (KFL) treatment gave better results in the ‘Topred’ cultivar, and similar effects were obtained from both treatments in ‘Ultra Red’ cultivar. Non-significant differences were obtained from both treatments with respect to fruit weight in the ‘Topred’, ‘Starkrimson Delicious’, ‘Jonagold’ and ‘Granny Smith’ cultivars. Leaving of the king fruit treatment increased the fruit weight significantly in ‘Elstar’ and ‘Ultra Red’ cultivars in 2002. The values of fruit flesh firmness (lb), total soluble solids content (%), pH, titratable acidity (%), total and invert sugar quantity (g/100 g^?1) were not found to be significantly different between the treatments with a few exceptions. The ‘KFR’ treatment that removed the dominant effect of the king fruit can be recommended for the ‘Elstar’ and ‘Jonagold’ cultivars because this treatment increased the yield and did not decreased the fruit weight significantly in these cultivars except for ‘Elstar’ in 2002. On the other hand ‘KFL’ treatment can be recommended for the ‘Granny Smith’, Topred’ and ‘Ultra Red’ cultivars. Although this treatment decreased the yield of ‘Granny Smith’ it increased the mean fruit weight 45.6-62.7 g in the two experiment years. ‘Starkrimson Delicious’ did not show clear response to the treatments.