1株野生灵芝的分离鉴定及生物学特性分析

为开发南京紫金山野生生物资源,对采自紫金山的一株野生菌株ZJ-1进行了分离鉴定。采用形态学观察和ITS序列分析相结合的方法鉴定该野生菌株为灵芝（Ganoderma lucidum）,并对菌株ZJ-1开展了菌丝培养特性研究及驯化栽培试验。结果表明其最适生长温度为28℃～32℃,适宜pH为4.0～5.0,最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为酵母粉;通过人工栽培成功获得了灵芝菌株ZJ-1的子实体。利用扫描电镜发现灵芝菌管内有着规则的网状结构,其上布满卵形孢子。研究结果将为菌株ZJ-1的开发利用提供数据参考。     

林下种植灵芝内生细菌和放线菌的分离鉴定

以林下种植灵芝为试材,采用16S rDNA鉴定方法,研究了不同分离方法对灵芝内生细菌和放线菌多样性的影响,以期能够发现产生活性成分的菌种或者新种,从而推动微生物医药的发展进程。结果表明：从健康的灵芝子实体内分离得到放线菌1门1属的4个菌株(LZ-F1、LZ-F2、LZ-F3、LZ-F4)和细菌2门4属的5个菌株(LZ-B1、LZ-B2、LZ-B3、LZ-B4、LZ-B5)。4株放线菌均属于链霉菌属(Streptomyces),5株细菌分别属于周杆菌属(Peribacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、新根瘤菌属(Neorhizobium)和芽孢杆菌属(Bacillus)。该研究为其它食用菌内生菌的分离提供了技术支撑,也为灵芝活性成分的进一步开发利用提供了较好的参考价值。     

一种药用菌——虎乳灵芝学名的鉴定

虎乳灵芝是一种民间的药用真菌,香港的中医用其菌核来治疗肝癌、慢性肝炎、胃病,但还不知道其正确的学名。分类研究表叫,虎乳灵芝开不是灵芝,而是一种多孔菌,学名是Polyporus rhinocerus Cooke[=Lignosus rhinocerus(Cooke)]Ryv.,隶属于真菌门,担子菌亚门,层菌纲,非褶菌目,多孔菌属或孤苓属。     

灵芝属9个野生菌株的分子鉴定与系统发育关系分析

对江西省9个野生灵芝属菌株以及全国多地收集的31个栽培灵芝菌株进行ITS序列测序和分析,结果 9个野生菌株有灵芝、紫芝、南方灵芝、有柄灵芝、树灵芝等。构建系统发育树,分析9个野生灵芝属菌株与31个栽培灵芝菌株间的系统发育关系,为9个野生灵芝属菌株研究开发提供参考。     

两株西藏白肉灵芝菌株特性初探

对西藏林芝地区的白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)菌株G-122和G-241进行鉴别分析,并对其栽培性状、有效成分含量和提取物功能等方面进行研究。基于形态学特性和ITS分析,2个菌株均鉴定为白肉灵芝。二者菌丝对峙培养产生明显拮抗线,菌丝体生物量差异显著(G-241高于G-122),子实体颜色不同(G-241和G-122分别为红褐色和黄褐色),G-241子实体单菇重高于G-122;有效成分含量差异也较大,G-122粗多糖含量高而G-241总三萜含量高;菌株G-122、G-241醇提物对乳腺癌MT-1细胞IC_(50)值分别为265.2和225.6μg/mL。实验结果表明菌株G-122和G-241为不同菌株。     

树舌灵芝碳氮营养源利用的研究

测定不同碳源、氮源、碳氮比对树舌灵芝营养需求的影响。结果表明：玉米粉最利于菌丝体生长，地瓜淀粉对粗多糖的积累有利，酵母膏对生长和粗多糖积累均有利；最佳碳氮比为20：6。液体发酵培养8d后，发酵液总糖达到最高24．3mg／mL。     

灵芝子实体胆甾醇的分离与鉴定

用乙醇提取硅胶柱色谱首次从灵芝子实体中分离得到灵芝胆甾醇，采用现代波谱学方法进行结构鉴定，发现该胆甾醇为24甲基-胆甾-5，22-二烯-3β醇。     

基于ITS序列分析鉴定灵芝属菌种

针对11个本所保藏灵芝属菌株及9个灵芝属野生菌株的ITS序列,应用特异引物进行PCR扩增,对其产物进行测序,并从GenBank上下载2条赤芝(Ganoderma luncidum)、1条黑紫灵芝(Ganoderma japonicum)和1条无柄紫灵芝(Ganoderma mastoporum)的ITS序列,以猴头菇(Hericium erinaceum)为外类群,用NJ(Neighbor-Joining)法构建系统发育树,结果表明,20个灵芝属菌株聚为4个簇,其中赤芝组和树舌亚属的菌株各自聚为1组,其组内同源性均达99.7%以上,紫灵芝组的菌株分成2组:无柄紫灵芝和黑紫灵芝。系统发育分析也表明仅根据形态学特征难以将灵芝属菌株进行有效的分类,利用分子生物学的技术手段对灵芝菌株进行分类是一种更有效的方法,ITS序列分析在近缘种的分类鉴定上很有价值。     

一种红毛丹灵芝根腐病病原鉴定及生物学特性

2021年,在海南省保亭县植物园红毛丹Nephelium lappaceum L.活树上发现一种灵芝根腐病,为明确该病害的病原菌种类,采用常规组织分离法,从其担子果分离菌株,选取具有代表性的优势菌株HMDGF001,对其进行致病性测定,形态学特征鉴定,rDNA-ITS、SSU和LSU序列分析,构建系统发育树,并测定其生物学特性。结果表明,引起红毛丹灵芝根腐病的病原菌为热带灵芝Ganoderma tropicum(Jungh.)Bres.,该病原菌菌丝生长最适温度30℃,最适pH值6,黑暗条件有利菌丝生长,且在PDA培养基上生长较好。     

金地灵芝液体发酵产胞外多糖的营养条件优化

以金地灵芝为试材,探究了碳源、氮源及无机盐对其液态发酵产胞外多糖量的影响,通过单因素试验并运用Design Expert软件设计响应面试验优化发酵培养基的组分,以得到金地灵芝液态发酵产灵芝多糖的最优培养基配方。结果表明:优化后的最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为蛋白胨,最佳辅助无机盐为MgSO_4·7H_2O,最优培养基配方为3.98%玉米粉,0.68%蛋白胨,0.21%MgSO_4·7H_2O,0.05%K_2HPO_4,0.05%KH_2PO_4,0.001%维生素B_1。优化后胞外多糖得率提高了30.14%。     

无苦灵芝子实体多糖的研究

本研究从灵芝子实体多糖提取前工艺开始,利用95％的乙醇溶液浸泡回流提取灵芝子实体两次,绝大部分苦味成分从灵芝子实体中分流出来。醇提后的灵芝子实体再按常规水提并浓缩多糖溶液。灵芝子实体多糖在浓缩的同时,苦味也被浓缩,因而。多糖浓缩液还需进一步脱苦。研究表明,在含1g生药/1mL的灵芝子体实多糖浓缩液中,添加0.8％的β-环状糊精(β-CD)和1.2％的羧甲基纤维素钠(CMC-Na),既能稳定灵芝子实体多糖浓缩液,又能把苦味降到最低程度,为灵芝子实体多糖保健产品的深度开发提供了优良的原料。     

灵芝多糖降血糖作用的研究

目的：研究灵芝多糖对四氧嘧啶致高血糖小鼠、去甲肾上腺素致高血糖小鼠及正常小鼠血糖水平的影响。方法：制备四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型及去甲肾上腺素致高血糖小鼠模型,给药2周后取血测定血糖水平。结果：灵芝多糖能明显降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠及去甲肾上腺索所致高血糖小鼠的血糖水平,其中高剂量组与模型对照组相比均有显著意义（P〈0．05）,而对正常小鼠血糖水平影响较小,低、中、高剂量组与正常对照组相比均无显著意义（P〉0．05）。结论：灵芝多糖对四氧嘧啶致高血糖小鼠及去甲肾上腺素致高血糖小鼠具有明显降血糖作用,而对正常小鼠血糖水平影响较小。     

"仙芝1号"赤芝新品种鉴定

通过对选育出的赤芝(Ganoderma lucidum)品种-"仙芝1号"采用拮抗试验、分子生物学实验进行遗传分析,结果表明"仙芝1号"同"仙源5号"及韩芝有明显拮抗效应,其ERIC-PCR扩增图谱与其它品种差异明显,因此选育出的"仙芝1号"是不同于其他灵芝品种的赤芝新品种.     

灵芝多糖提取及性质分析

从赤灵芝子实体原粉中分离提纯得到2种均一多糖GLP1-1和GLP2-2,并应用HPLCS、ephadexG-100凝胶层析I、R、UV等方法对分离得到的2种多糖进行纯度鉴别、组分测定及结构分析。结果表明:多糖GLP1-1是由木糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、鼠李糖组成,UV光谱和IR光谱显示GLP1-1和GLP2-2均有多糖的特征吸收,并且具有β-吡喃多糖糖基的特征吸收峰;推断GLP1-1和GLP2-2为β-吡喃杂多糖。     

超声波法提取灵芝多糖的研究

通过单因素考察及正交实验优化了用超声波法提取灵芝多糖的实验条件 ,并与酸提取方法进行了比较。结果显示在灵芝干粉中加入 6 2 5倍体积的水 ,在pH2 0的条件下用超声波提取 4 5min得到的灵芝多糖的量最多。与酸提取法相比 ,超声波法的粗提物提取率稍高(分别为 11 0 5 %和 13 85 % ,P >0 0 5 ) ;但提出物中的糖含量明显增加 (分别为 2 2 4 1%和 34 6 0 % ,P <0 0 1) ,大分子杂质明显减少 (分别为 1 4 5 %和 0 6 8% ,P <0 0 1)。     

灵芝硒多糖的制备及其分离纯化

灵芝（Ganoderma lucidum）菌丝体通过生物转化作用富集无机硒，分别经水、碱水浸提，醇析，去蛋白，脱色后，得到灵芝硒多糖粗提物。再经DEAE—Cellulose柱层析分离纯化后，收集得到的各组分在高效液相色谱上进行进一步纯化，从而得到了10个不同的硒多糖组分。以K562细胞进行的抗癌试验结果显示，SeGLP-2B-1，SeGLP-2B-2和SeGLP-2B-3三种纯化硒多糖均有抗癌活性，其中SeGLP-2B-1对K562细胞的抑制率最高，达61．58％。     

灵芝菌糠提取液对灵芝菌丝体生长的化感效应

以灵芝为试材,为探究灵芝菌糠提取液对灵芝菌丝体生长的影响,分别制备菌糠的水提取液和醇提取液,并将2种提取液分别配置成40%、60%、80%和100%4种体积百分比浓度后加入等量的马铃薯综合培养基中培养灵芝菌丝体,记录菌丝萌发天数、菌落直径与菌丝干重,并计算其化感效应值(RI)。结果表明:菌糠不同体积浓度的水提取液均对灵芝菌丝体有抑制作用,当浓度为60%时,菌落直径与对照比最短,菌丝干重最小,其化感效应值最大,分别为-0.156和-0.289;不同体积百分比浓度的菌糠醇提取液则对菌丝的生长均起促进作用,当浓度达到60%时,菌落直径与对照相比最大,菌丝干重最大,其化感效应值最大,分别为0.311和0.483。综合比较,菌糠水提取液能抑制灵芝菌丝体的生长,但抑制作用不强;菌糠醇提取液能促进灵芝菌丝的生长,且化感作用效果比水提取更强。     

灵芝盆景的栽培与制作

从灵芝品种及栽培模式的选择、专用菌种的制作、菌种培养条件及栽培方式、盆景塑型及装饰手段等介绍了灵芝盆景的栽培学原理及灵芝盆景的制作方法,以期为灵芝盆景的培育与制作提供指导。     

不同灵芝菌丝体中三萜与多糖含量的比较

根据十九种不同来源的灵芝菌株的生长速度及长势，从中选出了菌丝体阶段生长性能良好的10个菌株进行液体培养，并测定了菌丝中三萜和多糖的含量。结果表明，不同灵芝菌株在三萜和多糖含量上存在着一定的差异，其中多糖含量以汉城2号，日本灵芝，南韩灵芝为高；三萜含量却以韩国灵芝、灵芝0772、灵芝0771为高，并且二者的含量不存在必然的联系，这为灵芝优良品种的筛选提供了理论依据。