吲哚丁酸对牛膝生长及主要药用成分积累的影响

以牛膝幼苗为试材,对其叶面喷施不同浓度的吲哚丁酸(IBA),研究IBA对其生长及主要药用成分齐墩果酸、蜕皮甾酮含量的影响。结果表明:适宜浓度IBA处理能促进牛膝地上部分和根的生长,使根的干重增加,并能显著提高根中主要药用成分齐墩果酸、蜕皮甾酮含量,IBA的最佳浓度为1.0mg/L。但IBA对叶中齐墩果酸含量没有显著影响,使蜕皮甾酮的含量显著降低。     

小菊悬浮细胞培养与植株再生研究

 以小菊‘七月红’品种为试材, 进行了细胞悬浮培养及植株再生诱导的探讨。结果表明, MS+ 1.0 mg·L ^-1 2, 4-D + 0.2 mg·L ^-1 6-BA培养基适合从试管苗茎段有效诱导生长迅速、质地疏松的愈伤组织。获得的愈伤组织在MS + 0.5 mg·L ^{- 1} 2, 4-D + 0.2 mg·L ^{- 1} 6-BA液体培养基中振荡培养, 建立细胞悬浮培养体系。悬浮细胞的生长曲线呈上升的半抛物线型, 细胞生长大致分缓慢生长期(0～2 d) 、对数生长期(2～10 d) 和停滞期(10 d以后) ; 随着悬浮细胞生长, 培养液pH值迅速下降。悬浮细胞固液双层培养表明, 在培养基MS + 0.2 mg·L ^{- 1} KT + 0.2 mg·L ^{- 1} 2, 4-D上植板率最高; 4℃低温2 h处理能促进悬浮细胞生长, 提高植板率; 随着继代次数增加植板率呈下降趋势。培养1个月后, 形成了直径约0.2 cm的愈伤组织, 将其转到MS + 2 mg·L ^-1 6-BA + 0.1 mg·L ^{- 1} NAA培养基后, 继代4次, 分化后出芽; 分化芽在培养基MS + 0.5 mg·L ^-1 NAA上诱导生根, 形成小植株。     

夏堇悬浮细胞培养与植株再生研究

以夏堇品种“小丑”的组培苗幼嫩叶片为试材,进行愈伤组织诱导、细胞悬浮培养及植株再生诱导的研究.结果表明:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D的培养基能够使叶片诱导为生长迅速、质地疏松的愈伤组织.愈伤组织最适宜的悬浮培养条件为:MS+ 1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L 2,4-D液体培养基,20 g/L的起始接种量以及100 r/min的震荡培养.将继代3～4次的细胞悬浮颗粒转到1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的固体再生培养基上培养,3周后可以诱导分化出芽,进而获得完整植株.悬浮培养有利于夏堇愈伤组织的再生,悬浮培养对提高以夏堇作为模式植物进行的相关研究具有重要的应用价值.     

茉莉花愈伤组织诱导及悬浮细胞培养

以茉莉花（Jasminum sambac）花瓣为外植体在不同培养基上诱导出愈伤组织,通过对其类型的筛选从中选择疏松愈伤组织进行悬浮培养后,初步建立悬浮细胞培养系。结果表明,不同激素可诱导出疏松型（CA）、泥状型（CB）和绿色块状型（CC）愈伤组织,其分化方向也不同。用CA型和CB型愈伤组织均能建立悬浮细胞培养系,其中以泥状愈伤组织为起始材料较佳,大约11 d可建立初步的悬浮细胞培养系。     

植物生长调节剂对银杏悬浮细胞生长和黄酮糖苷含量的影响

试验表明：Ｎ_２（ＭＳ＋１ｍｇ ．１~（－１）ＮＡＡ＋２ ｍｇ·１~（－１）ＫＴ）和Ｂ３（ＭＳ＋１ｍｇ ．１~（－１）ＮＡＡ＋２ ｍｇ ．１~（－１）６－ＢＡ）培养基最有利于银杏悬浮细胞干重的积累。 Ｎ_２和 Ｂ_２（ＭＳ＋ １ｍｇ．１~（－１）ＮＡＡ＋ １ｍｇ·１~（－１）６－ＢＡ）培养基有利于黄酮糖苷积累,而ＧＡ_３、２,４－Ｄ、ＺＴ处理均不利于黄酮糖苷积累。     

提高银杏悬浮培养细胞内酯合成的研究

 对12个不同品种的银杏树幼叶及其诱导的愈伤组织进行银杏内酯含量测定, 发现不同基因型的银杏内酯含量存在较大差异: 圆铃和金坠两个品种含量最高, 分别达0. 43%和0. 41%; 七星果品种含量最低, 为0. 13%; 金坠品种幼叶愈伤组织中银杏内酯含量最高, 为0. 0334%; 有3 个品种的幼叶愈伤组织未检测到银杏内酯。选取银杏内酯含量高、生长旺盛的愈伤组织在B5 液体培养基中进行了细胞悬浮培养,研究多种生长因子对细胞生长和银杏内酯合成的影响。结果表明, 在150 mL 培养瓶中装50 mL 培养液, 接种量为30~ 40 g/ L, 培养液初始pH 为5. 8, 3 000~ 4 000 lx 的强光照, 以30 g / L 蔗糖和15 g/ L 葡萄糖为碳源最有利于细胞生长和银杏内酯的合成。用高效液相色谱检测结果显示, 银杏圆铃品种的悬浮培养细胞中银杏内酯B 最高含量可达细胞干样质量的0. 0758%。     

梨花药愈伤组织诱导和悬浮培养体系的建立及应用

【目的】建立梨悬浮细胞体系,并利用悬浮细胞体系获得高质量悬浮细胞,进行遗传转化和原生质体的分离。【方法】以新梨7号花药为试材,诱导获得梨花药愈伤组织,研究了细胞悬浮系建立和影响悬浮细胞增殖的主要因子。【结果】花药在1/2 MS+1.0 mg·L^-12,4-D+0.4 mg·L^-1NAA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂(pH值为5.8～6.0)培养基上诱导的愈伤组织,经4～5次继代得到了黄白色、颗粒状,状态相对较好的愈伤组织;将愈伤组织接种于液体培养基中,于28℃,200 r·min^-1的黑暗条件下悬浮振荡培养,经4～5次悬浮继代培养建立了悬浮细胞系,适宜的启动和增殖培养基为：MS+1.5 mg·L^-12,4-D+1.0 mg·L^-16-BA+30 g·L^-1蔗糖,细胞生长曲线呈“S”型,活细胞率达81.98%,近圆细胞率达83.66%,可作为遗传转化的受体,转化率为20.00%。也可直接用于原生质体的分...     

金银花细胞悬浮培养体系的建立研究

以金银花脱毒苗为试材,研究了外植体、培养基对金银花疏松愈伤组织的诱导以及悬浮培养液中激素种类及其浓度和初始接种量对金银花悬浮细胞生长的影响。结果表明:幼叶最易诱导愈伤组织;细胞悬浮培养最佳培养液为:MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;最佳初始接种量为60g/L。     

红姜花胚性细胞悬浮体系的建立和原生质体培养

以红姜花(Hedychium coccineum)未成熟花丝和花药为试材,研究了红姜花胚性愈伤组织的诱导、细胞悬浮体系的建立以及原生质体的培养。结果表明:在MS+4mg/L 2,4-D+4mg/L NAA+1mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂上经过120d培养诱导出了愈伤组织,愈伤组织在增殖培养基上经过继代筛选获得浅黄色、松散易碎的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织通过3个月的悬浮培养,得到均质稳定的胚性细胞悬浮系。以胚性悬浮细胞(ECS)为起始材料分离原生质体,酶解试验表明,在原生质体分离过程中,用于原生质体分离的酶液需要保持一定的渗透压以保护原生质体不被破坏。当甘露醇的浓度为0.14mol/L时,原生质体产量最高,达到2.25×105个/mL PCV ECS(packed cell volume,PCV)。在看护培养系统中,原生质体经过7d的培养,细胞第一次分裂,经过14d培养,细胞分裂频率达到12.3%,28d时,细胞团形成频率达到4.2%。所形成的细胞团具有典型的胚性细胞特征。     

岷江百合悬浮细胞系的建立及植株再生

 以岷江百合（Lilium regale Wils.）颗粒细小、结构松散的乳白色愈伤组织为起始材料,接种在MS（NH4NO3含量减半）+ 2.0 mg · L-1 picloram + 30 g · L-1蔗糖液体培养基上,在25 ℃黑暗条件下振荡（100 r · min-1）培养10 ~ 20 d,建立分散性好、均匀、生长迅速的悬浮细胞系。在悬浮细胞系培养过程中研究了不同参数对其生长的影响,结果表明：在40 mL培养液中接种量为0.5 g（鲜样质量）,18 d继代1次,继代时保留1/3体积的旧培养液有利于其细胞增殖。将悬浮细胞转移到1/2MS + 30 g · L-1蔗糖的再生培养基上成功获得再生植株。     

皂质芦荟细胞悬浮培养初探

试验初步研究了皂质芦荟细胞悬浮培养过程.比较了不同基本培养基、接种量对悬浮培养过程中细胞生长量的影响.采用正交设计方法,对影响皂质芦荟悬浮细胞生长的因素进行了优化研究.初步探讨了皂质芦荟在细胞生长周期里生理生化特性.结果表明:B5 培养基有利于细胞的增殖;每50 mL培养液中加入2 g愈伤组织的接种量为宜;筛选出最适激素组合为2,4-D 3.0mg/L KT0.5mg/L,葡萄糖25 g/LpH值5.8;皂质芦荟悬浮培养的生长周期为25 d,细胞增值率曲线呈S型;在悬浮细胞生长前期,pH值明显下降,在细胞对数生长期,pH值略有升高,并趋于平缓;总酚含量、POD、SOD均出现2个峰值,但出现时间不同,其变化趋势与细胞生长趋势呈正相关,PPO活性与细胞生长趋势呈负相关.     

苹果体细胞悬浮培养及植株再生研究

以苹果试管苗叶片的再生不定芽嫩叶为试材,对苹果体细胞悬浮系的建立及植株再生的影响因素进行了研究.结果表明:在MS+NAA 0.5 mg/L+BA 2.0 mg/L培养基上可诱导获得高活力的愈伤组织.将该愈伤组织转入MS+2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.0 mg/L液体培养基中培养,采用无菌筛网分离获得含单个细胞和少于8～10个细胞的小细胞团进行继代培养,建立体悬浮细胞培养系.将悬浮细胞转到MS+2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.0 mg/L的固体增殖培养基上暗培养25 d后,可形成微型愈伤组织,将该愈伤组织转到MS+BA 5.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L的植株再生培养基上暗培养30 d后转入光下,光照培养30 d后53％的愈伤组织可再生植株.该研究建立的苹果体细胞悬浮培养技术,不仅可用于细胞融合及遗传转化过程中杂种细胞和转化细胞的分离及植株再生研究,而且对于利用组织培养技术筛选变异株系也具有重要意义.     

金银花疏松愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

以"巨花一号"金银花为试材,研究了外植体、培养基对金银花疏松愈伤组织的诱导以及初始接种量和蔗糖浓度对金银花悬浮细胞生长的影响。结果表明:幼叶最易诱导愈伤组织,其诱导及增殖的最适培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+KT 0.5mg/L;细胞悬浮培养中愈伤组织最适初始接种量为60g/L,培养基中蔗糖浓度为35g/L时细胞生长最好。     

怀地黄愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

研究了植物生长调节剂和接种方式对怀地黄叶片愈伤组织诱导的影响和细胞悬浮培养体系的建立。结果表明:将叶片正接在MS+2,4-D 1mg/L+6-BA 0.4mg/L培养基上,愈伤组织生长良好,诱导率达100%;在该培养基上多次继代,可形成3种类型的愈伤组织,其中Ⅰ型愈伤组织淡黄色、颗粒透亮、分散性好且疏松易脆,适合进行细胞悬浮培养;在MS+2,4-D 3mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基中,悬浮培养细胞生长曲线呈"S"型,培养15d时细胞干重达最大值,为4.94g/L。