二株副鸡嗜血杆菌分离株的生物学特性鉴定

本试验对从广西分离的４株疑似副鸡嗜血杆菌（Ｈ．ｐｇ）（ＧＸ－９５,ＧＸ－９７,ＧＸ－９８－１,ＧＸ－９８－２）进行生物学特性研究。根据生物学特性,ＧＸ－９７和ＧＸ－９８－１被定为Ｈ．ｐｇ,ＧＸ－９５和ＧＸ－９８－２的生化反应特性有明显差异,用标准Ｈ．ｐｇ血清未能定型。交叉血凝抑制（ＨＩ）试验显示,各菌株之间的交叉ＨＩ效价达１６０,但各菌株与其本身的抗血清ＨＩ效价达１２８０,显示出很强的菌株特异性。抗菌素敏感试验也显示ＧＸ－９７、ＧＸ－９８－１和参考菌株的药敏谱更加相似。     

副鸡嗜血杆菌在疫苗生产中生长特性的研究

通过测定培养期内副鸡嗜血杆菌C-Hpg-8的种子液活菌数和制苗菌液的活菌数及总菌数，分别绘制了种子液和制苗菌液的生长曲线，计算出C-Hpg-8种子液的世代时间为37.7min.在本试验条件下，C-Hpg-8种子液培养时间不应超过8h，制苗菌液的培养时间应控制在9-11h为宜。     

副鸡嗜血杆菌PCR试验及应用

在Ｈｐｇ核酸探针试验基础上设计ＰＣＲ引物和ＰＣＲ试验方法。检测４１株Ｈｐｇ和２６株非Ｈｐｇ证明ＰＣＲ试验特异性好，敏感性比Ｈｐｇ核酸探针高１０００～１０，０００倍。用ＰＣＲ检验直接临床棉拭子样品，与Ｈｐｇ细菌分离结果完全一致。ＰＣＲ试验简便敏感快速，有可能作为一种新方法用于临床Ｈｐｇ诊断。     

鸡副嗜血杆菌病的诊治

2002年12月初,承德市某校办养鸡场2 400余只产蛋鸡和3 000余只6周龄的雏鸡,相继发生一种以流泪、流鼻涕及面部水肿为主要特征的传染病,造成鸡只死亡和产蛋率下降.     

副鸡嗜血杆菌分离鉴定血清学定型研究

通过流行病学调查，发展我省有鸡传染性鼻炎流行，采集试验样品３０５份，分离得副鸡嗜血杆菌１０２株，分离率３３．４％。根据Ｐａｇｅ的凝集试验分型方案，对１０２株副鸡嗜血杆菌分别与Ａ，Ｂ，Ｃ三种标准血清定型，有６４株菌定为Ａ型占６２．７％，其余３８株为Ｃ型占３７．３％。从流行地区的型别分布来看，有６个地区是Ａ型和Ｃ型均有流行占３７．５％，Ａ型或Ｃ型单独流行的地区各有５个，各占３１．２５％。研究结果对研制     

副鸡嗜血杆菌的初步分离与鉴定

从某鸡场发病鸡中分离出一株细菌，经过病原的分离培养、生化鉴定试验、动物回归试验等实验室方法，初步鉴定为副鸡嗜血杆菌。通过药敏试验筛选敏感药物，对该病的防治起到了积极的效果。     

副鸡嗜血杆菌的分离鉴定及防治

河南省中牟县某养殖户饲养7000只海兰褐商品蛋鸡，在开产前按常规进行了鸡新城疫等疫苗的免疫，但未接种过鸡传染性鼻炎菌苗。2003年7月5日，即240日龄时，个别鸡开始零星发病，8d内蔓延至全群，有80％的鸡出现症状，并零星死亡。产蛋率下降至’70％，其技术人员对发病鸡群曾用链霉素、红霉素等药物内服，但效果不明显。病鸡精神萎顿、垂头缩颈、食欲明显降低。病鸡鼻流浆液性分泌物，有的鸡甩头、打喷嚏；眼结膜发炎、眼睑肿胀，有的流泪；一侧或两侧面部肿胀。     

副鸡嗜血杆菌B型分离株免疫原性的比较和疫苗株的筛选

利用分离自我国不同地区的3株B型副鸡嗜血杆菌菌株及0222标准株分别制作油乳剂灭活疫苗免疫无鸡传染性鼻炎病史的鸡群，通过攻毒保护试验和HI抗体测定，分析比较了其免疫原性，以筛选适用于制备疫苗的菌株。结果表明：不同地区的分离株在致病性和免疫原性上存在-定的差异，TJ-1株疫苗免疫鸡对TJ-1和DL-1株的保护作用可达90％和91．7％，对BJ-1株的保护率为63．6％，具有相对较好的保护作用，目前可以作为疫苗株使用。在各免疫组试验鸡中，0222株和BJ-1株免疫鸡群的血清抗体水平较高，但这可能与血凝抑制试验所采用的抗原是由0222株制备的及BJ-1株在抗原性上可能更接近于0222株有关。DL-1和TJ-1株疫苗免疫鸡的抗体水平都很低，但其免疫保护却要强于0222和BJ-1株疫苗免疫鸡。由此说明B型株因菌株之间免疫原性的差异使得HI抗原的选择难度增加。     

连翘提取物对副鸡嗜血杆菌生长曲线的影响

为研究连翘提取物的抑菌活性,以不同血清型副鸡嗜血杆菌为试验菌株,比较和分析不同浓度连翘提取物下细菌生长曲线的变化.结果发现:32 mg/mL的提取物对摇床培养的A、B型菌生长具有较强的抑制作用;16 mg/mL的提取物对摇床培养的C型菌生长具有明显的抑制作用.由此表明,连翘提取物对不同血清型副鸡嗜血杆菌具有明显的选择性抑菌作用.     

单抗阻断ELISA检测副鸡嗜血杆菌血清型特异性抗体的研究

本研究在副鸡嗜血杆菌Ａ、Ｃ型特异性单克隆抗体的基础上成功地建立了能区分Ａ、Ｃ血清型抗体的阻断ＥＬＩＳ诊断方法,并应用此法对９种常见病原体阳性血清及多份免疫鸡。     

Dot-ELISA检测副鸡嗜血杆菌血清抗体的研究

本研究建立了检测副鸡嗜血杆菌特异性抗体的Ｄot－ＥＬＩＳＡ方法,结果证明,本方法不与８种常见病原体产生交叉反应,对人工感染和临床病鸡的检出率为８０％,抗原预点膜在４℃可保存５周以上,采用抗原预点膜进行检测可使整 个过程在９０分钟内完成,因此本方法是一种具有较高敏感性和特异性,并且更加快速和简便的鸡传染性鼻炎诊断方法。     

B型副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

从辽宁某公司鸡场疑似鸡传染性鼻炎的病鸡眶下窦分离到一株副鸡嗜血杆菌，用Page程序和Kume程序对其进行血清型鉴定，确认为B型副鸡嗜血杆菌，这是首次在我国分离到B型副鸡嗜血杆菌。     

一株A型副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

从山东省某蛋鸡场发病鸡群中分离到一株细菌,经培养特性观察、生化试验、V因子生长试验、致病性试验和PCR试验,证实分离菌为一株致病性副鸡嗜血杆菌,血清型鉴定该菌为A型。药物敏感性试验表明分离菌对头孢噻肟、头孢曲松、丁胺卡那霉素高度敏感,对硫酸新霉素、强力霉素中度敏感,对磺胺间甲氧嘧啶钠、环丙沙星、庆大霉素耐药。     

Dot—ELISA检测副鸡嗜血杆菌血清型特异性抗原的研究

本研究在副鸡嗜血杆菌型特异性单克隆抗体的基础上建立了检测该菌 Ａ、 Ｃ 型特异性抗原的 Ｄｏｔ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法,结果表明本方法在检测副鸡嗜血杆菌型特异性抗原时未呈现与其它 ８ 种常见病原体的交叉反应,新鲜肉汤的最低检出量为 Ａ 型 １３×１０６ Ｃ Ｆ Ｕ／ｍ ｌ和 Ｃ 型 ８×１０６ Ｃ Ｆ Ｕ／ｍ ｌ,抗原的最低检出量均为 ２５μｇ／ｍ ｌ,对 ２０ 份抗原、肉汤和卵黄样品的检测结果与其已知结果相符。这就证明本方法具有较好的敏感性和特异性,是一种能直接检测分离株血清型的良好方法。     

Characterisation of isolates of Haemophilus paragallinarum from Indonesia

OBJECTIVE: To characterise 18 isolates of Haemophilus paragallinarum isolated from chickens in Indonesia. PROCEDURE: The isolates were identified to species level by traditional phenotypic methods. Six of the isolates were also identified by a species-specific polymerase chain reaction. Fourteen of the isolates were examined for resistance to a panel of seven antimicrobial agents using a disc diffusion method. All 18 isolates were serotyped according to the Page scheme using reference antisera in a haemagglutination inhibition test. RESULTS: Four of the 18 isolates were obtained from indigenous (kampung) chickens, with the remainder being from typical intensive poultry production systems. The 18 isolates were obtained from 11 outbreaks that showed the typical clinical signs of infectious coryza and 11 of the isolates were obtained from chickens that had been vaccinated with infectious coryza vaccines. All 18 isolates were confirmed as H paragallinarum by biochemical testing and six isolates were also identified as H paragallinarum by the polymerase chain reaction test. Eleven isolates were resistant to erythromycin and streptomycin, 10 to neomycin, eight to oxytetracycline, five isolates to doxycycline, three to sulphamethoxazoltrimethoprim but only one to ampicillin. Seven isolates were Page serovar A, four were Page serovar B and seven were Page serovar C. CONCLUSION: The presence of all three Page serovars (A, B and C) has been confirmed for the first time in Indonesian chickens. As the majority of the infectious coryza vaccines in use in Indonesia contain only serovar A and C, the presence of serovar B in chickens indicates that the protection by these bivalent vaccines would be reduced. The use of trivalent infectious coryza vaccines that contain serovars A, B and C is recommended for use in Indonesia.     

培养副鸡嗜血杆菌用干粉培养基的优化研究

优化副鸡嗜血杆菌干粉培养基配方。通过单因素平行对比配方中碳源、血清、辅酶等营养物质,确定各个因素对副鸡嗜血杆菌生长的影响。研究筛选出了适宜副鸡嗜血杆菌生长的干粉培养基配方：鸡肉蛋白胨、酪胨、多价胨、酵母粉、葡萄糖等,再添加7.5%鸡血清和10 mg/L辅酶Ⅰ,于37℃、5%CO₂恒温培养箱中160 r/min振荡培养14～16 h。优化后的配方更适于培养副鸡嗜血杆菌,为副鸡嗜血杆菌疫苗大规模生产提供了参考依据。