抗菌肽在畜牧生产中的应用

抗菌肽是一类新型的抗菌物质,广泛存在于自然界中.本文对其特点及其在饲料添加剂方面的应用作出综述.     

抗菌肽酵母制剂的生产及其作饲料添加剂应用价值的探讨

1 蚕抗菌肽酵母制剂的生产与作饲料添加剂的应用效果 1.1 蚕抗菌肽AD的发酵生产我们以50L发酵罐培养Cecropin AD工程酵母,在优化发酵条件后,用甲醇诱导启动醇氧化酶启动子而成功表达抗菌肽AD基因并分泌杂合抗菌肽AD到菌体外,     

转抗菌肽基因酵母安全评价及在饲料中应用

1945年弗莱明(Fleming)发现青霉素,1952年瓦克斯曼(Waksman)发现链霉素,先后获得诺贝尔奖。抗生素的发现造福人类作出很大贡献。近来,由于滥用抗生素而诱发耐药性病原菌的产生,造成医疗上的困难,又由于抗生素的毒副作用及残留问题,日益引起社会的重视。1998年欧共体禁止抗生素用作畜禽饲料添加剂,     

抗菌肽在肉鸡养殖中的研究应用进展

文章介绍了抗菌肽在肉鸡养殖中的研究应用情况,包括生物学特性、提高生长性能、防治疾病、改善肠道菌群、增强免疫功能方面的研究应用进展,为抗菌肽作为抗生素和促生长类药物替代品在肉鸡养殖中的应用提供参考.     

抗菌肽的研究进展及在饲料添加剂方面的应用

抗菌肽是一类广泛存在于生物界中的生物活性肽,具有抗细菌、真菌和病毒的作用,甚至对癌细胞也有杀伤作用,文章主要从抗菌肽的分类、抗菌肽的理化特性和生物学活性等几个方面介绍抗菌肽的研究进展及其作为饲料添加剂的作用效果和发展前景。     

抗菌肽的作用机制及作为饲料添加剂的应用

抗菌肽是一类广泛存在于生物界中的生物活性肽,具有抗细菌、真菌和病毒的作用,甚至对癌细胞也有杀伤作用,应用在畜禽生产及饲料添加剂中具有重要意义。     

绿色乳猪饲料添加剂——抗菌肽制剂的研究和应用

抗菌肽作为一种抗生素替代品,对猪生长具有一定的促进作用,同时能抑制外来病原微生物对猪的侵染,又能维持猪肠内益生菌生态的平衡,提高猪自身的免疫力,提高猪肉品质。通过生物工程对抗菌肽的改造已经取得部分成果,抗菌肽在动物饲料中也有一定的应用,本文主要阐述了目前利用生物工程技术改进后,抗菌肽的最新研究进展和应用研究情况。     

抗菌肽在动物养殖中的研究进展

抗菌肽是饲料添加剂中最有潜力的替抗产品之一.利用基因工程菌生产抗菌肽产量高、成本低、耗时短,是实现抗菌肽大规模生产的最佳方案.文章综述几种能够生产抗菌肽的表达系统以及抗菌肽在动物养殖中的应用,旨在为抗菌肽发展的方向提供参考.     

哺乳动物抗菌肽及其应用前景的研究

抗菌肽在宿主抵御病原微生物感染中起重要作用，是主动免疫的重要介质，是通过改变细菌细胞膜的通透性而发挥抗菌作用，这不同于抗生素通过阻断大分子生物合成的作用机理，因而致病菌不易对其产生耐药性。本文就几种哺乳动物抗菌肽特性、抗菌机理、基因工程研究及其应用前景和存在问题进行了综述。     

柞蚕抗菌肽基因工程研发与展望

1.前言昆虫抗菌肽(Cecropin)是瑞典科学家Boman H G等首先发现。从果蝇及惜古比天蚕中分离到具有抗菌作用的多肽。从Cecropia的种名中引申而来。国际上已先后分离到数以百计的抗菌肽。1981,黄自然等从中国柞蚕蛹中分离到抗菌肽。为     

蚕抗菌肽AD-酵母制剂对粤黄鸡肠道消化酶和饲料品质的影响

添加蚕抗菌肽AD-酵母制剂(CADYP)500g／t(活性剂量为30u／g料)以研究其对鸡小肠内容物酶活性、饲料能量和氮利用率及饲料中细菌和霉菌繁殖的影响。结果表明：CADYP，对粤黄鸡小肠内容物中淀粉酶和蛋白酶活性和饲料营养价值无不良影响；对饲料中霉菌繁殖无抑制作用，但能有效地抑制饲料中细菌的繁殖。     

家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析

动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。     

抗菌肽Cecropin P1基因表达载体构建与表达

根据大肠杆菌的密码子偏好性,人工设计并合成了3条抗菌肽Cecropin P1基因寡核苷酸片段,通过PCR扩增得到抗菌肽Cecropin P1基因,将此基因克隆到原核表达载体pMAL-p2X中,然后将重组质粒pMAL-p2X-Cecropin P1转化E.coliTB1,经IPTG诱导进行融合表达,以Amylose Resin亲和层析纯化。通过SDS-PAGE分析,融合蛋白MBP-Cecropin P1表达与纯化成功。抗菌肽Cecropin P1基因的成功表达为进一步研究其抗菌活性、抗菌机理及应用研究打下基础。     

抗菌肽Cecropin D基因在毕赤酵母中的表达与抗菌活性分析

为使抗菌肽Cecropin D在巴斯德毕赤酵母中高效表达,本研究根据Cecropin D全基因序列和毕赤酵母的偏嗜性设计合成4条寡聚西核苷酸,SOEing-PCR技术法合成Cecropin D基因序列,并克隆至酵母表达载体pGAPZαA中,构建重组表达质粒,将其线性化后电击转化毕赤酵母菌株SMD1168,经高浓度博莱霉素筛选,获得高拷贝转化子,菌液PCR鉴定表明Cecropin D基因已整合到酵母基因组中.在GAP强启动子调控下,重组Cecropin D高效分泌表达,产物耐高温耐酸碱,并对部分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑菌效果,对E.coliDH5 α和S.aureus Cowan I株的MIC值分别为2.17 μg/mL和4.55 μg/mL.     

几种多肽类抗生素添加剂在饲料中的应用研究

杆菌肽、维吉尼亚霉素等四种多肽类抗生素因具有促进畜禽生长、在畜禽体内残留量较小、不易产生耐药性等特点,被批准为可以在饲料中长时间添加使用的饲料药物添加剂。本文就多肽类抗生素在畜禽生产中的应用研究在《饲料药物添加剂使用规范》中的用法用量作一综述,为正确合理使用该类药物,保障畜产品质量提供参考。     

天蚕素类抗菌肽抗菌性能测定及其性质研究

利用天蚕素类抗菌肽产品(有效成分为10%)检测其抗菌性能及各项抗菌性质,为今后将其应用于饲料工业打下基础。结果表明:该产品对于大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为11mm、10mL、14.5mm,三者最小抑菌浓度(MIC)分别为4500ug/mL、3500μg/mL、3500μg/mL,此外,该产品耐热性和耐酸性效果较佳,在100℃水浴15min后或pH值为1.0仍表现出对金黄色葡萄球菌的抗性。据此试验,推荐其在试验动物日粮中添加量为3500μg/mL。     

猪蛔虫抗菌肽Cecropin P2 基因的真核表达及表达产物的抗菌活性研究

为获得猪蛔虫抗菌肽Cecropin P2基因并研究其抗菌功能,根据CecropinP2成熟肽的编码基因,人工合成3条寡聚核苷酸片段,经PCR获取Cecropin P2基因序列,成功构建了重组表达质粒pPIC9 K-Cecropin P2-His6并转化毕赤酵母GS115感受态细胞。转化子经MD、MM以及G418筛选,1%甲醇诱导表达,利用Tris tricine-SDS-PAGE对表达产物进行检测。体外抑菌试验表明,获得的重组蛋白对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抑菌活性。本试验为抗菌肽的应用和新抗菌肽类药物的开发提供了必要的试验基础。     

抗菌肽基因导入桑树获得抗病转基因植株

用携带抗菌肽基因的农杆菌处理桑子叶,在含有羧苄青霉素（Cb）400～500mg／L和卡那霉素（Km）20mg／L的MS培养基上,有32.4％的子叶产生了不定芽;66.5％的不定芽在含有Cb300mg／L和Km30～40mg／L的培养基中,正常生长成2～3cm高的新稍;新梢在含Cb50mg／L和Km10mg／L的生根培养基中有72．6％形成完整根系。3次转化共获得12个株系55株KmR植株。不同株系桑苗叶片DNA点杂交分析显示,7个株系有阳性杂交信号。KmR株系桑苗的抗病性测定显示,5个株系共14株桑苗对青枯病具有较强抗性.     

现代生物技术与动物育种

本文概述了动物育种技术及其发展、现代生物技术的产生与现状,转基因动物技术、胚胎工程技术、动物克隆技术和各种分子生物技术及其对动物中育种技术的影响,并讨论了２１世纪动物育种的趋势和展望。     

转Cecropin B抗菌肽基因柑橘对溃疡病的离体抗性评价

本文对转Cecropin B抗菌肽基因的锦橙植株进行了表达检测以及柑橘溃疡病病原菌的接菌实验。分别用喷雾法和针刺法进行离体接菌实验,用Real-time PCR和Southern blot进一步检测分析了在转基因植株中Cecropin B基因的表达、整合情况。结果显示与喷雾法相比,针刺接种处理的离体叶片开始显症时间短,且发病率高,便于统计分析。针刺接种6天后,大部分转基因株系发病率与非转基因植株无显著差异,其中,PR8、PR11、AAT8 和AAT14株系的发病率分别为67%、63%、68%和54%,显著低于非转基因植株。Real-time PCR表达分析结果表明,转基因株系中Cecropin B基因表达量明显高于对照株系。Southern blot结果显示PR8和AAT14株系中转基因为单拷贝, PR11和AAT8株系中转基因分别为两个拷贝和三个拷贝。实验结果表明转Cecropin B抗菌肽基因提高了对柑橘溃疡病的抗性。