拟南芥CWINV1启动子GUS表达载体构建及转基因植株的鉴定

CWINV是编码细胞壁蔗糖转化酶的基因。为深入探讨CWINV基因的表达调控机理,构建了拟南芥CWINV1基因启动子的GUS融合表达载体并转入拟南芥,获得了转基因植株。GUS染色的结果进一步验证了重组表达载体的正确性和实用性。     

大豆GmFTL3和GmFTL5启动子组织特异性表达分析

大豆(Glycine max L.Merr.)GmFTL3和GmFTL5基因具有很高的序列相似性,均参与大豆开花调节,但表达模式并不相同,本研究以启动子为突破口,分析这两个基因之间的表达差异。从大豆品种天隆1号中克隆GmFTL3和GmFTL5的启动子,构建载体p GmFTL3pro::GUS和p GmFTL5pro::GUS,转化拟南芥进行GUS染色分析。结果显示:无论长日条件还是短日条件,苗期和花器官中GmFTL3启动子均不驱动GUS基因的表达,而GmFTL5启动子则驱动GUS基因在拟南芥中表达,且在苗期的不同阶段呈现组织表达特异性。在花器官中,GmFTL5启动子驱动GUS基因主要在花萼、花瓣、花药和花粉粒中表达。实时定量结果显示,在大豆中,GmFTL3和GmFTL5基因均有表达。综上所述,大豆GmFTL3启动子在大豆中有活性但在拟南芥中无活性;GmFTL5启动子在大豆和拟南芥中均有活性,但表达可能存在差异;GmFTL5启动子在花器官中表达可能暗示GmFTL5基因与花器官发育有关。     

大豆GmFTL3和GmFTL5启动子的组织特异性表达分析

大豆（Glycine max (L.) Merr.）GmFTL3和GmFTL5基因具有很高的序列相似性,均参与大豆开花调节,但表达模式并不相同,本研究以启动子为突破口,分析这两个基因之间的表达差异。从大豆品种天隆1号中克隆GmFTL3和GmFTL5的启动子,构建载体pGmFTL3pro::GUS和pGmFTL5pro::GUS,转化拟南芥进行GUS染色分析。结果显示：无论长日条件还是短日条件,苗期和花器官中GmFTL3启动子均不驱动GUS基因在拟南芥中表达,而GmFTL5启动子则驱动GUS基因在拟南芥中表达,且在苗期的不同阶段呈现组织表达特异性。在花器官中,GmFTL5启动子驱动GUS基因主要在花萼、花瓣、花药和花粉粒中表达。实时定量结果显示,在大豆中,GmFTL3和GmFTL5基因均有表达。综上所述,大豆GmFTL3启动子在大豆中有活性但在拟南芥中无活性;GmFTL5启动子在大豆和拟南芥中均有活性,但表达可能存在差异; GmFTL5启动子在花器官中表达可能暗示GmFTL5基因与花器官发育有关。     

两个高产抗病转基因抗虫棉新品种山农棉7号和山农棉8号

1山农棉7号山农棉7号（原名泰丰棉7号）是山东农业大学农学院与山东滨州博洋生物科技有限责任公司以高产、高抗黄萎病的自育非转基因中熟品系880B（山农269×JH26后代系统选育）为母本,转Bt基因抗虫棉KB-5系（GK-12×Ao97010后代系统选育）为父本配置的一代杂交种。     

三个转基因生根棉品系的种植表现

通过3个生根棉品系生育特性研究,与其它两个品系相比,HZ345前期生长势强,生育转化快,早发;结铃性强,成铃分布合理,优质铃比重大,产量高,纤维品质较好,可应用在棉花基质育苗移栽中.     

水稻叶片特异性不表达启动子pOsMTG3的克隆与表达分析

利用水稻基因芯片筛选到1个在水稻孕穗期和抽穗期穗中的相对表达量明显高于苗期、孕穗期和抽穗期叶片中相对表达量的基因Os MTG3,该基因在孕穗期穗中受低温、干旱诱导上调表达,而在抽穗期穗中受低温诱导下调表达。把该基因ATG密码子上游1.8kb左右的DNA片段预测为启动子区,并将其命名为p Os MTG3。用PCR技术克隆该启动子,并以GUS基因作为报告基因,在水稻中分析了该启动子在不同时期不同组织中的表达特性。GUS组织化学染色分析表明:p Os MTG3启动子能启动GUS基因在水稻根、芽、茎、穗中表达,而不能启动GUS基因在叶片中表达,是一个全新的叶片特异性不表达的启动子。     

转基因抗虫棉在南疆棉区的试种情况

新疆是中国最大的优质棉基地,属典型的绿洲农业,沙漠、戈壁滩天然屏障的隔离,有效阻止了棉铃虫的距离迁徙;但90年代以来,棉铃虫的发生日益猖獗.特别是1996年,发生面积高达36万公顷,占全区面积的40%多,严重发生面积超过8万公顷次,占10%,是历年最为严重的一年.新疆棉花生产正遭受棉铃虫的严重威助,使植棉业面临极大的挑战.     

水稻种子特异性谷蛋白GluB1启动子在水稻愈伤组织中驱动外源基因表达

【目的】水稻谷蛋白启动子GluB1(GluB1promoter,pGluB1)常用于外源基因在种子中特异性高效表达的研究,也是研究种子储藏蛋白基因表达调控机制的模型。前人研究表明,pGluB1只在水稻胚乳中表达,而在根、茎、叶片、叶鞘、颖壳等组织中均无表达活性。研究的目的是为了克服种子特异表达启动子筛选周期长的缺点。【方法】将由pGluB1驱动的霍乱毒素B亚单位和重组胰岛素原组成的融合基因(a fusion gene of the cholera toxin B subunit and human proinsulin, CTBIN)表达载体pCAMBIA1302-pGluB1sig-CTBIN-NOS经农杆菌介导法转化水稻成熟胚愈伤组织。通过RT-PCR和蛋白质印迹杂交试验检测融合基因CTBIN在水稻愈伤组织中的转录和翻译表达。【结果】获得的7个转基因愈伤克隆中,有6个克隆的融合基因CTBIN在转录水平上表达。选取其中4个克隆进一步进行蛋白质印迹杂交试验检测证实融合基因CTBIN均在翻译水平上表达,而且从分子量大小推断融合蛋白包含的谷蛋白GluB1的N-端信号肽序列(24个氨基酸残基)在所测的愈伤组织细胞中均被成功切除。【结论】水稻种子特异性启动子pGluB1在愈伤组织中具有驱动外源基因表达活性,种子蛋白体亚细胞定位信号肽序列可在愈伤组织细胞中被切除。这为在愈伤组织细胞中快速检测种子特异表达启动子活性和探索愈伤组织中蛋白质的亚细胞分拣机制奠定了基础。     

转基因棉的田间性状表现

转基因棉是通过生物技术将Bt基因(苏云金杆菌基因)转入棉株内,使其具有抗虫性。其作用机制是Bt基因编码的蛋白质具有抗虫作用,而对人畜和昆虫天敌无毒。美国孟山都公司1988年使棉株初次具此饰变基因。1989年进行抗虫品系试验,初见成效。该公司准备于1990年夏将此品系实现商品化。兹将多次试验结果概术如下:     

转基因棉棉田杂草的防治

即将来临的 2 1世纪 ,棉农可以选择多种方法防治棉田杂草。对转基因抗除草剂棉可通过地表喷洒除草剂来防治杂草 ,种植一个棉花品种可以选择多种适宜的除草剂。抗溴苯腈棉 :施用几次溴苯腈4EC,可以从遗传上改变抗溴苯腈棉对出苗后地表施用的溴苯腈的抗性。一般推荐在播种前或出苗前施用除草剂 ,如 DNA可控制全生育期的杂草 ;出苗前施用伏草隆或嘧草硫醚防治早期的杂草。出苗后杂草同时长出 ,抗溴苯腈 47棉可施用溴苯腈来防治苍耳、牵牛花和天鹅绒草。其它杂草可用嘧草硫醚或 MSMA的混合物防治 ,嘧草硫醚和溴本腈混合后对苋属植物的防治效…     

转基因植株的分子检测方法概述

从个体或组织水平、DNA水平、RNA水平和蛋白质水平概述了检测转基因植株的各种方法及应用情况,并作了简要评价.     

黄河流域机采棉植株性状的筛选

为筛选适合黄河流域棉区机采的品种,对16份棉花材料的果枝始节高度、株高、产量构成因素、纤维品质指标进行系统调查、分析与研究。结果表明:适合进一步培育机采品种的材料为590032、中棉所49。     

大麦醇溶蛋白启动子HorD的克隆及其种子特异性表达分析

种子特异性启动子的克隆和功能分析不仅有助于阐明作物种子发育和胚乳特异性基因的表达调控机制,也是进行作物品质改良和种子生物反应器在内的植物基因工程改造的基础。本研究从大麦品种Golden pormise中克隆到大麦胚乳特异性启动子HorD,生物信息学分析表明,其具备启动子的基本元件,如A-box、TATA-box、CAAT-box等,此外还含有胚乳特异性表达所需要的元件Prolamin-box。为验证HorD启动子的表达特性,以pU1300载体为骨架,将HorD启动子和新型冠状病毒（SARA-CoV-2）刺突蛋白基因LPS通过双酶切连接的方式构建表达载体phorD-LPS,并利用农杆菌介导的遗传转化试验验证其种子表达特性。结果表明,HorD启动子能驱动LPS基因在转基因大麦各组织中表达,但在根、茎、叶及颖壳中表达量较低,在种子中表达量较高。这说明HorD启动子可以驱动外源目的基因在大麦种子中特异高效表达。     

一个花生早期胚特异性表达基因AhDGAT3启动子的克隆及功能分析

为获得在早期胚中特异性表达启动子,本研究通过基因组步移技术对AhDGAT3（GenBank: AY875644.1）的启动子进行克隆。研究结果表明,获得了AhDGAT3 起始密码子ATG上游 5´侧翼序列2181 bp,应用PLACE和plantCARE在线分析显示,AhDGAT3启动子除了含有核心调控元件TATA-box和CAAT-box之外,还有多个非生物胁迫作用元件,如茉莉酸响应元件、防御和干旱胁迫响应元件TC-rich repeats、光响应元件、干旱诱导的MYB结合位点、光响应MYB结合位点等之外,还包含种子表达相关顺式作用元件及分裂组织表达相关元件。构建重组载体pBI121-PAhDGAT3,转化拟南芥,GUS染色结果显示,该启动子能驱动下游GUS基因,仅在发育早期的心型胚期至鱼雷型胚期较短时间内的胚中特异性表达。     

湖南省转基因棉的研究进展与展望

介绍了湖南省转基因棉的研究进展、现状 ,并针对本省所存在的问题 ,提出了加速湖南省转基因杂交棉发展的几点建议 ,以进一步增强湖南棉花育种与种子产业化的核心竞争力     

常规棉和转基因棉对根结线虫的易感性比较

根结线虫是棉花带中对陆地棉普遍为害的重要病害。对近年发放的转基因商品棉抗烟芽夜蛾或草苷膦 ,或同时抗烟芽夜蛾和草苷膦进行试验比较 ,对田间受天然根结线虫侵染和温室用这种线虫侵染的品种进行了评估。结果表明 ,转基因棉佩字棉 1 560 BG对根结线虫的易感性较它的亲本佩字棉1 560明显增加。尽管是对有限的几个品种进行了研究 ,但这些数据表明转基因棉品种与它们的亲本对根结线虫的易感受性不同 ,这就意味着在选择种植转基因棉时不仅要注重它对目标害虫的抗性 ,同时也要重视对其它害虫的抗性常规棉和转基因棉对根结线虫的易感性比较@牛…     

美研究证实转基因棉的优越性

美国科学家日前发表的研究成果显示，转基因棉花与普通棉花相比，能在减少杀虫剂用量的情况下达到更高的产量，或者在相同杀虫剂用量的情况下达到更高的产量。此外，转基因棉花对生态系统也没有不良影响。     

我国转基因棉的研究现状及展望

本文从棉花基因工程（基因的分离与改造、基因转移技术和转基因棉的检测）和基因工程与常规育种相结合二个方面综述了转基因棉的研究现状，在此基础上提出了转基因棉研究和推广应用的对策。     

转基因棉的抗性与性状表现

迄今为止 ,在鳞翅目害虫为主的棉区的种植效果很好 ,由 Cry IA基因产生的毒蛋白尤其对烟蚜夜蛾的抗性很好 ,同时对棉铃虫的抗性也很好 ,但对刺吸式害虫的抗性无效 ,因此 ,转Bt棉并非在任何国家和所有棉区都可有效种植。目前 ,种植 Bt棉以抗虫性为主 ,育种家尚未顾及到对这些品种的产量的改进。主要是因为( 1 )产量是一个由多基因控制的数量遗传性状 ,不易获得。 ( 2 )构成产量的重要因素 ,如铃数和铃重受环境因素的影响较大。( 3)对提高产量的遗传障碍因素尚未摸清。 ( 4 )开花多 ,但最终座果少。这些都说明提高产量大有潜力可挖。目前 ,…