引进加拿大牛冻胚解冻后直接移植的效果

对进口的加拿大牛冷冻胚胎进行解冻后移植效果观察.结果共解冻24枚冻胚,解冻后直接移植给24头受体牛,妊娠19头,移植妊娠率79.2%,其中荷斯坦奶牛冻胚移植21头,妊娠17头,移植妊娠率达81.0%,创造我国牛冷冻胚胎移植成功率的最高记录.     

试管牛冷冻胚胎移植黄牛的试验效果

通过对进口的加拿大荷斯坦牛试管冷冻胚胎进行解冻后移植黄牛的试验观察，结果共解冻60枚试管牛冻胚，经形态学鉴定符合移植标准者共44枚，可移植胚胎比率为73．3％，移植黄牛受体44头，妊娠20头，移植妊娠率为45．5％。天津市首批试管牛犊于2002年9月间相继诞生4头。试验结果表明，利用试管牛胚胎移植技术，借黄牛之腹直接生产纯种奶牛是一项促进奶牛业快速发展的有效技术途径。     

牛胚胎性别鉴定与取样胚胎移植应用技术的研究

本研究应用ＰＣＲ技术扩增牛ＳＲＹ序列进行奶牛胚胎性别鉴定。经１０９枚鲜、冻胚的移植，获鲜胚移值妊娠率５８．６％（３４／５８），常规冷冻胚胎移植妊娠率４４．４％（１２／２７），一步细管冷冻解冻胚胎移值妊娠率１６．７％（４／２４）。犊牛性别验证与ＳＲＹ鉴定结果均相符合。实验中对胚胎发育时期的划分，胚胎质量评定和胚龄的确定，胚龄与受体发情时间在移植中的关系，胚胎的切割取样，取样胚胎的冷冻进行了研究。     

移植奶牛胚胎冷冻后分割成的二分胚生产同卵双生犊牛的实验

对解冻后品质优良的Ａ级囊胚进行分割，并将二分胚移植生产同卵双生犊牛。结果表明：９枚Ａ级囊胚切割成１８枚半胚，胚胎分割成功率１００％。单胚移植受体６头。妊娠２头，妊娠率３３．３％；双半胚移植６头，妊娠２头，妊娠率３３．３％。     

甘肃省进口肉牛冷冻胚胎移植的研究

1999年5月至2000年12月在甘肃省武威市、平凉市、信县、灵台县开展了进口肉牛冷冻胚胎移植工作。经过对386头当地黄牛母牛及杂交母牛进行了诱导同期发情，结果获得84．9％的同期发情率和77．1％的黄体合格率。对于黄体合格的253头母牛进行了进口肉牛冷冻胚胎移植，获移植妊娠率50．9％，其中45头受体牛由甘肃省家畜繁育中心技术人员移植，获得51．1％的移植妊娠率。对同一批次经产牛与青年牛移植妊娠结果、常规法与一步法解冻胚胎移植妊娠结果进行了对比分析，结果显示，经产牛移植妊娠率（37．5％）显著低于青年牛（56．6％）常规胚胎解冻法与一步细管解冻法解冻胚胎，移植妊娠率差异显著（41．6％，69．5％，P＜0．05），后者较高。     

应用牛冷冻胚胎对秦川系受体牛移植的效果

应用进口加拿大牛冷冻胚胎解冻后对秦川系受体牛进行移植，共解冻6个品种的胚胎175枚，解冻后直接移植给161头受体牛，妊娠83头，移植妊娠率51.6%。其中灵台点移植32头，妊娠20头，移植妊娠率达62.5%。     

奶牛冷冻胚胎分割和分割后半胚冷冻技术

用简易分割方法,分割奶牛冷冻胚胎16枚,获得半胚32枚,分割成功率为100％(16/16),可移植半胚29枚,移植于16头受体牛,到第3个情期未返情者经直肠检查有6头妊娠,妊娠率为37.5％(6/16)。其中,在分割前或者分割后经恢复培养0.5～2h再移植的10头受体牛,5头妊娠;而未经恢复培养,分割后直接移植的6头受体牛中,只有1头妊娠。移植后3个月,直肠检查确定2头流产。已有1头受体黄牛生出1头奶牛牛犊(母)和1头受体奶牛产1头奶牛牛犊。其余的2头妊娠受体牛将于9月份产犊。此外,用简易分割法分割奶牛胚胎5枚,得到半胚10枚,裸半胚直接冷冻,解冻后回收可移植半胚5枚,移植于4头受体牛,无一头妊娠。结果表明,冷冻胚胎的分割半胚优于分割后冷冻半胚移植效果;冷冻胚胎分割前或者分割后恢复培养移植优于未经恢复培养而直接移植;简易分割法可应用于冷冻胚胎的分割。     

影响牛胚胎移植妊娠率因素的分析

关于影响牛鲜胚或冻胚移植妊娠率的因素在国内外已有很多的报道,但都是以单项因素研究居多.本试验对影响牛体内胚胎(以冷冻胚胎为主)移植妊娠率的多项因素如胚胎冷冻、解冻、胚龄、黄体质量、受体牛的生理状态等进行分析,以选择最佳的技术方案,为牛胚胎移植产业化服务.     

转基因鲜胚和冻胚对黄牛受胎率的影响

本试验对转基因体细胞克隆胚胎经两种方式(鲜胚体温长途运送和冷冻胚胎复苏)移植到受体牛妊娠和产犊情况进行比较.结果为两组的妊娠率为33.08%和29.32%,出生率为5.70%和5.54%,差异均不显著(P>0.05),说明冻胚解冻后移植与鲜胚长途运输移植的效果无差异,转基因体细胞克隆胚胎低温冻存可应用于实际生产.     

试管水牛技术研究

水牛卵巢卵母细胞经体外成熟培养、体外受精和受精卵在体外培育的胚胎移植给受体母水牛,结果表明：①卵母细胞体外培养成熟率71．6％、受精分裂率52．8％、囊胚率(占授精卵母细胞)27．2％。②双鲜胚移植受胎率36．2％(30．0％～44．8％),双胎率24％;双冻胚移植受胎率20．0％;生产试管水牛24头,全部成活,其中冻胚试管水牛3头;双胞胎3对。③胚胎冷冻方面：采用玻璃化胚胎冷冻技术,冷冻胚胎解冻后存活率64．4%。     

荷斯坦牛生产体内性控胚胎的试验研究

本研究采用荷斯坦牛X-性控冻精和超数排卵技术生产奶牛体内性控胚胎。结果显示,使用阴道栓(Cue-Mate)对31头供体奶牛进行同期发情处理,发情率为100%,且发情时间较集中。31头供体奶牛共回收胚胎321枚,头均回收胚胎10.35枚,其中可用胚胎225枚,头均可用胚胎7.26枚。选择36头黄牛受体进行单胚移植,其中21头移植鲜胚,妊娠10头,妊娠率47.62%;15头移植冻胚,妊娠6头,妊娠率40.00%。     

奶牛胚胎体外保存时间和温度对移植受胎率的影响

试验对胚胎在体外保存时间的长短及温度与移植妊娠率的关系进行统计分析，胚胎收集后分别在0-3h,3-6h和6h后冷冻，解冻后移植受胎率分别为46.07%,43.33%,30.56%,0-3h和3-6h冷冻的胚胎，移植受胎率没有明显差异（P〉0。05），6h后的冻胚与6h以前的冻胚移植受胎率差异显著（P〈0．05）。胚胎分别在室温和37℃保存5h后冷冻，解冻后移植受胎率分别为39．74％、42．24％（P〉0．05）。     

安格斯牛冻胚洲际间引种试验成功

我们从澳大利亚引入安格斯（Ａｎｇｕｓ）牛７日龄冻胚１６枚。这１６枚冷冻胚胎在液氮中保存８９４天后，用３６℃水浴解冻（２５秒钟），全部回收，在室温２７℃条件下，用１０％蔗糖一步脱除抗冻剂（甘油）１０分钟后，移入２００％犊牛血清ＰＢＳ１０分钟，再移入同样浓度的犊牛血清ＰＢＳ中１０分钟。按常规形态鉴定方法，对胚胎评级，１０枚为可用胚胎，解冻后胚胎可用率为６２．５％（１０／１６。将１０枚可用胚胎用非手术法，移入发情周期与胚胎发育期同步的５头受体牛，结果２头妊娠，移位妊娠率为４０％（２／５）。妊娠足月后，２头受体牛各产公犊１头。在我国首次获得成功。     

绵羊冷冻胚胎移植试验

绵羊冷冻胚胎有枚浆冻前Ａ级胚胎解冻后,胚胎等级有所下降,可用胚率为７７．９％,Ａ、Ｂ级胚移植妊娠率分别为３３．３％（１８／５４）和１６．７％（１／６）,差异不显著（Ｐ〉０．０５）;桑椹胚、早期囊胚、中期囊胚、扩张囊胚移植妊娠率分别为２０．８％（５／２５）、４２．９％（６／１４）、３５．７％（５／１４）５ ３７．５％（３／８）,囊胚期胚胎移植妊娠率较高,但差异不显著（Ｐ〉０．０５）     

非繁殖季节胚胎因素对绵羊胚胎移植影响的研究

在非繁殖季节（6月份）利用进口绵羊胚胎，手术法移植。通过胚胎类型、冷冻胚胎解冻后停留时间以及胚胎发育阶段对绵羊胚胎移植效果的分析。得出以下结论：①鲜胚移植妊娠率和产羔率显著高于冻胚：鲜胚为61.11％（11/18）和50.00％（9/18），冻胚为48.11％（153/318）和46.86％（149/318）；②随冷冻胚胎解冻后停留时间的延长胚胎移植效果有升高的趋势；③从桑椹胚到囊胚时期胚胎发育阶段对胚胎移植效果没有明显影响。     

胚胎移植受体黄牛的试验研究

试验期内共选择受体黄牛５９头，冻胚移植３３头，选择移植率达５５．５％，妊娠１１头，移植受胎率达３３．３％，分娩９头，妊娠产犊率达８１．８％，经过选牛实足和资料整理，从中得出几项有价值的数据。     

奶牛新鲜和冷冻胚胎分割移植试验

用简单方法,分割7～8日龄新鲜牛胚胎(1分为2),裸半胚成对移植给66头受体,90天妊检,移植妊娠率为56.1％(37/66)。除6头流产和尚有5头待产外,已有26头受体产犊35头,其中有9对同卵双胎,双胎率为34.6％(9/26),半胚产犊率为29.2％(35/120)。对影响成对半胚移植妊娠率和半胚产犊率的诸多因素如胚胎质量,胚胎在体外停留时间、胚胎发育阶段、受体牛品种、黄体状况等进行了较系统的研究。同时对冷冻胚胎进行了分割试验,移植妊娠率为45.5％(5/11),已产3头犊牛。对快速冷冻和常规冷冻胚胎分割后的移植妊娠率进行了比较,分别为25.0％(1/4)和57.4％(4/7)。     

移植奶牛胚胎冷冻解冻后分割成的 二分胚生产同卵双生犊牛的实验

对解冻后品质优良的A级囊胚进行分割,并将二分胚移植生产同卵双生犊牛。结果表明,9枚A级囊胚切割成18枚半胚,胚胎分割成功率100%（9/9）。单胚移植受体6头,妊娠2头,妊娠率33.3%;双半胚移植6头,妊娠2头,妊娠率33.3%。     

奶牛冷冻胚胎直接移植法的应用试验

直接移植法大大简化了冷冻胚胎的移植步骤，使胚胎移植的大规模推广应用成为可能。本试验采用１．６１Ｍ的乙二醇代替甘油作冷冻保护剂，共冷冻保存Ａ、Ｂ级奶牛胚胎２７６枚。解冻，在１０分钟内直接装枪移植给受体奶牛。其移植青年牛４２，１８０天后确认妊娠２４头，受胎率为５７．１４％；移植成母牛８５，１８０天后确认妊娠３７头，受胎率为４３．５３％。两者合计，共植受体奶牛１２７头，确认受胎６１头，受胎率为４８．０３     

安格斯牛胚胎移植的试验研究

以沈阳市奉东优良畜禽繁育基地饲养的纯种安格斯牛为供体,以基地和东陵区农户饲养的杂种牛为受体,进行胚胎移植,共获得169枚胚胎,其中可移植胚胎95枚,平均每头（次）获得可用胚胎数5．9枚。将13枚鲜胚和16枚冻胚移植给同期发情的受体牛,结果为鲜胚的产犊率为38．5％（5／13）,冻胚为43．8%（7／16）;将61枚冻胚移植给自然发情的受体牛时,产犊率为42．6％（26／61）;冻胚的总产犊率为42．9％（33／77）。