移植双半胚对牛妊娠率的影响

胚胎分割是20世纪70年代末80年代初发展起来的,人工将胚胎一分为二,获得同卵双生的胚胎显微操作技术。胚胎分割不仅能增加胚胎的数量,生产同卵双生后代,还可以避免牛异性孪生雄性不育,在畜牧业、特别是养牛业的发展中具有广阔的应用前景。20世纪30年代,相关研究证明哺乳动物2细胞胚胎的每个卵裂球都具有发育成正常胚胎胎儿的“全能性”。把分割后的牛半胚进行移植,妊娠率64．3％(9／14)。1989年我国奶牛胚胎分割获得成功,鲜半胚移植妊娠率58．3％(7／12)。据报道移植全胚和半胚的妊娠率无差异。     

提高牛胚胎移植效果的技术措施

胚胎移植已成为养殖场必要的育种手段之一。了解包括供(受)体牛选择、同情发情、超数排卵、胚胎采集、胚胎分割与移植在内的连续不同的技术环节,有助于胚胎移植技术体系的建立与优化。本文综述了提高牛胚胎移植效果技术的原理及方法等,以促进该技术在牛育种中的广泛应用。     

中国荷斯坦牛冷冻胚胎分割移植试验研究

牛胚胎冷冻的成功，使胚胎移植技术不受时间、地域的限制，并且可以做到对受体进行选择，从而可提高移植妊娠率；牛胚胎分割的成功，是增加胚胎数目和生产同卵双犊或多犊、获得更多牛犊的一个有效方法。如果将胚胎冷冻和胚胎分割技术结合起来，那未就可以达到既增加胚胎数目，降低胚胎移植成本，又利于胚胎移植技术在生产中推广应用的双重目的，为此开展此项研究。将用１０％甘油为冷冻剂，８枚７日龄中国荷斯坦奶牛的冷冻胚胎，在３５℃水浴解冻，用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液脱除抗冻剂，７枚可用胚胎用简单方法分割成１４枚半胚，将裸半胚成对移植于与胚胎日龄同步的７头受体牛。结果３头妊娠，移植妊娠率为４２．９％（３／７），共产５头牛犊，其中２头产同卵双犊，半胚产犊率为３５．７％（５／１４），按整胚计算产犊率为７１．４％（５／７），较同期未分割的冷冻胚胎的产犊率３７．８％（１７／４５）提高３３．６个百分点。     

PCR技术在胚胎性别鉴定中的应用

家畜早期胚胎性别鉴定对畜牧业生产具有重要的现实意义。本文扼要介绍了胚胎分割技术和采用PCR技术鉴别牛、羊等家畜胚胎性别的操作程序,对影响该技术雌雄判定率的因素进行了综合分析。对这种方法的研究现状、各种技术细节的主要优缺点和发展前景进行了系统介绍。     

小白鼠胚胎简易分割技术的研究

<正> 哺乳类的胚胎分割实验在国内外都有人做过,最先取得成功的是有关小鼠的实验。但是,由于影响成功的因素比较复杂,几十年来,哺乳类的胚胎分割仍处于实验阶段。Nagashima(1981,1984)对16细胞和8细胞的小鼠桑椹胚分割,得到了一卵双生的双胞胎,又对兔的胚胎分割实验也得到了同样的结果。羊和牛的一卵双生及牛的一卵三生也已成功(Willadsen,1979,1980,1981)。马和猪的胚胎分割同样得到了双胞胎(W R Allen et al.,1984)等等。胚胎分割方法较多,但基本归于两类,一类是去透明带后再分割,包括机械地去透明带和酶消化去透明带(张涌等,1987)。虽然以上这些胚胎分割方法各有优点,但均较复杂,需要的辅助工具也较多,较难掌握,不易推广。本实验只用分割针,或碎玻片所做的显微小刀,或手工直接分割,方法简单,平均每分割一个胚胎只需2分钟。     

牛胎胚移植近况

牛胚胎移植方案主要包括:供体的选择,超排、冲胚、检胚、供受体同期发情、移植、胚胎冷冻、胚胎分割和体外受精。胚胎性别鉴定,同卵双胎的获得、胚胎核移植和嵌合体的获得等是胚胎移植技术应用的发展。 供体牛的选择 技术上考虑,发情周期正常的母牛或育成母牛对超排都应作出预前的估测。实践证明,育成母牛及老龄母牛一般超排效果较差。合适的供体母牛应是4—9岁,生殖机能正常、健康发情规律且孕期正常(H.G.R wagner)。     

牛羊胚胎技术研究取得新成果

由中国农业大学动物科技学院主持的“牛羊胚胎工程产业化技术体系的研究与应用”项目,近日通过了由北京市科委主持的成果鉴定。专家认为,“牛羊胚胎工程产业化技术体系的研究与应用”采用OPS法冷冻牛卵母细胞,解冻后的形态正常率达90 %以上;OPS法冷冻保存的波尔山羊胚胎,解冻后的存活率达97% ,移植后产羔率达4 0 % ,属国内首创。应用“胚胎分割针”大规模生产牛羊分割胚2 0 0 0余枚,牛鲜胚、冻胚单半胚移植妊娠率分别为4 8.3% ,4 0 .7%。山羊、绵羊鲜胚分割单半胚移植妊娠率分别为39.9% ,4 9.0 %。牛羊胚胎技术研究取得新成果…     

影响牛胚胎移植受精率因素探讨

本文论述了太原市和全省各地在牛胚胎引进项目期间,对影响牛胚胎移植成功率的受体牛选择、受体牛饲养管理、受体牛发情鉴定、气候条件、胚胎质量、胚胎解冻操作技术、受体牛移植操作技术等七个因素进行了有益的探讨,取得可喜成果。累计移植受体牛235头,移植妊娠112头,移植妊娠受胎率47.7%,移植受体牛产犊成活率达到94%,为我省全面推广奶牛胚胎生物移植工程技术奠定了坚实基础。     

显微分割扩张孵化胚泡获同卵双生山羊羔

通过分割孵化囊胚之前不同发育阶段的胚胎,国外已分别在牛、绵羊、山羊、马、猪等家畜上取得同卵双生试验的成功。但国内至今尚无通过显微分割获得家畜同卵双生后代的实例。作者等于1986年10月至1987年5月进行了山羊胚胎分割和半胚移植试验,1987年4月18日和5月25日,两只受体孕羊各产1对同卵双生山羊羔,在国内首次获得家畜同卵双生后代。     

河南省牛胚胎移植技术研究与应用进展

从牛的超数排卵技术、胚胎冷冻技术、胚胎工厂化生产技术、应用胚胎生物技术建立良种肉牛繁育体系等方面综述了河南省牛胚胎移植技术的研究与应用进展。     

澳洲荷斯坦奶牛MOET技术研究

为了快速扩繁良种澳洲荷斯坦奶牛的核心群,对澳洲荷斯坦奶牛MOET技术进行研究。结果表明,在不同月份超数排卵处理澳洲荷斯坦奶牛获得的总胚胎数和可用胚胎数,均无显著性差异（P〉0.05）;超数排卵处理不同生理阶段的澳洲荷斯坦奶牛,获得的总胚胎数差异不显著（P〉0.05）,但经产母牛获得的可用胚胎数明显多于青年母牛（P〈0.05）;而胚龄与受体母牛发情时间的同期性研究发现,桑椹胚和早期囊胚移植到发情后第7 d的受体母牛、囊胚移植到发情后第8 d的受体母牛、扩展囊胚移植到发情后第9 d的受体母牛,均可获得较高的胚胎移植受胎率和产犊率。     

山羊胚胎移植研究进展

概述了山羊胚胎移植的研究进展,包括同期发情、超数排卵、胚胎分割、体外受精、核移植、胚胎移植、胚胎冷冻及其存在的问题和展望。     

小鼠冻胚分割试验

研究了分割所用溶液、冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响。结果证明:①将解冻囊胚分割后,无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响(P>0.05);②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异(P>0.05);③与分割解冻桑椹胚相比,在蔗糖液中分割解冻囊胚可显著提高冻胚分割效果(P<0.05)。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体,结果有2只妊娠,共获得半胚仔鼠6只,其中2对为同卵双生。     

1例黄牛剖腹产手术的过程与分析

介绍了1例黄牛剖腹产手术的过程,分析了其中的不当之处,并提出意见和建议.     

牛连续超排的方法及其影响因素

对牛连续超排的方法及影响因素进行了分析,总结了5种能够取得良好效果的牛连续超数排卵方法。影响牛连续超排处理反应的主要因素是超数排卵处理的方案,供体状况,体重,季节,营养状况,发情周期,产后时间,药物的批号(质量)、用量和比例以及注射程序等。     

嵌套式PCR扩增SRY基因序列鉴定牛胚胎性别体系的建立

应用源自牛X和Y染色体同源区的1对外引物P1、P2及其各自特异区的2对内引物P3、P4和P5、P6,进行嵌套式PCR反应,对中国荷斯坦公、母牛静脉血样DNA及牛胚胎样DNA进行特异性条带的嵌套式PCR扩增,并对外、内嵌套式引物的PCR反应体系进行了优化,以准确鉴定牛早期胚胎性别.结果表明,在优化了的PCR反应体系下,中国荷斯坦公牛DNA样品得到178bp和262bp的两个条带,而母牛仅得到262bp的1个条带;静脉血样DNA性别鉴定结果与实际性别相符率为100%,表明本试验建立的体系完全可以用于牛早期的胚胎性别鉴定.     

基于均匀设计优化延边黄牛卵母细胞体外成熟及核移植后卵裂体系

[目的]应用均匀设计对延边黄牛卯母细胞体外成熟及核移植后的卵裂体系进行优化。[方法]用抽吸法回收卵母细胞,在不同条件下进行卵母细胞的体外成熟培养,然后对成熟卵母细胞进行核移植、融合、激活以及胚胎的体外培养。采用均匀设计法,选用U10（10^3）均匀设计,比较了不同的卵巢保存温度、成熟培养时间以及卵泡直径大小对牛卵母细胞体外成熟率及卵裂率的影响。[结果]延边黄牛卵母细胞体外成熟的最佳条件为：在卵巢保存温度为26℃或31℃的条件下,选取直径为8．0mm的卯母细胞成熟培养24h;卵母细胞核移植后卵裂的最佳条件为：在卯巢保存温度为26℃的条件下,选取直径为6．0mm或8．0mm的卵母细胞培养24h。[结论]该结果对延边黄牛或其他种黄牛的育种及种群扩繁具有一定的参考意义。     

基于均匀设计优化延边黄牛卵母细胞体外成熟及核移植后卵裂体系

［目的］应用均匀设计对延边黄牛卵母细胞体外成熟及核移植后的卵裂体系进行优化。［方法］用抽吸法回收卵母细胞,在不同条件下进行卵母细胞的体外成熟培养,然后对成熟卵母细胞进行核移植、融合、激活以及胚胎的体外培养。比较了在不同的卵巢保存温度、成熟培养时间以及卵泡直径大小对牛卵母细胞体外成熟率及卵裂率的影响。［结果］延边黄牛卵母细胞体外成熟的最佳条件为在卵巢保存温度为26或31℃的条件下,选取直径为8.0mm的卵母细胞成熟培养24h;卵母细胞核移植后卵裂的最佳条件为在卵巢保存温度为26℃的条件下,选取直径为6.0或8.0mm的卵母细胞培养24h。［结论］该结果对延边黄牛或其他种黄牛的育种及种群扩繁具有一定的参考意义。     

3种超排方案生产奶牛体内性控胚胎效果比较

采用3种不同方案对16头经产奶牛实施超数排卵,然后用X性控冻精进行人工授精。结果显示,3种方案超排头均排卵数分别为10.75、6.00、7.00枚,头均回收胚胎数分别为8.38、4.25、7.00枚,3组均无显著差异(P>0.05);方案Ⅰ超排供体头均获可用胚7.88枚,可用枚率为95.5%,显著高于方案Ⅱ(2.20枚,55.7%)和方案Ⅲ(0.33枚,15.7%)(P<0.05)。方案Ⅱ和方案Ⅲ在头均可用胚数方面无显著差异(P>0.05),但在可用胚率方面,方案Ⅱ显著高于方案Ⅲ(P<0.05)。     

奶牛胚胎移植实用技术的研究

我们于１９９６年至１９９７年进行了奶牛胚胎移植实用技术的研究。三年共移植奶牛胚胎１３７枚,受胎率为３５．７７％,移植Ａ级胚胎的受胎率为７０％,移植Ｂ级胚胎受胎率为４３．０２％,移植Ｃ级胚胎的受胎率为１２．１９％,移植Ａ级胚胎的受胎率比移植Ｂ级胚胎受胎率高２６．９８％;移植Ａ组胚胎的受胎率分别比移植Ｃ级胚胎受胎率有５７．８１％和３０．８３％。