猪圆环病毒2型对免疫抑制的效果观察

为探讨猪圆环病毒2型感染对猪群免疫抑制的作用,采用血清学方法对3个猪场猪圆环病毒2型净化前后的猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫免疫抗体进行检测和比对。结果:猪圆环病毒2型净化前猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫免疫抗体均未达标;但在猪圆环病毒2型净化后3种疫病的免疫抗体均达标。结论:猪圆环病毒2型是猪场免疫抑制的重要病原,搞好猪场圆环病毒2型净化对确保养猪业的健康发展意义重大。     

一起仔猪四重病毒感染的诊治

为了解贵州省都匀市某规模化猪场发病情况,利用RT-PCR和PCR法对送检的病料进行猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病病毒进行快速检测。根据临床症状、病理变化及实验室检测结果,综合诊断该猪场存在猪流行性腹泻病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的混合感染。     

规模猪场猪圆环病毒病的诊断与临床控制

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型（PcV-2）引起的猪传染性病毒性疾病,它是继猪繁殖呼吸综合征之后的又一免疫抑制性疾病。近年来,猪圆环病毒感染所引起的疾病已成为规模化养猪场的主要疫病,其危害程度相当严重,给规模化养猪业生产造成了巨大的经济损失。本文就现阶段规模猪场猪圆环病毒病的诊断与临床控制作一阐述。     

规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染的控制

2022年2月1日，陕西省某规模化母猪场产房仔猪断尾去势液检测猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸阳性，该批仔猪于2022年2月23日断奶至下游育肥猪场，猪群断奶后3 d出现咳嗽、少食、发热等临床症状，根据临床症状、剖检大体病理变化、兽医实验室检测结果诊断为猪繁殖与呼吸综合征病毒和圆环病毒2型混合感染。为迅速控制猪群病情，对该猪场免疫程序及保健方案进行调整，并对猪群进行为期18周的猪繁殖与呼吸综合征和圆环病毒2型病毒血症期和抗体水平的持续跟踪发现，紧急防控方案实施后2周大群趋于稳定，猪繁殖与呼吸综合征疫苗二免后10周猪群的病毒血症消失，圆环病毒2型疫苗二免后猪群的病毒血症虽未消失，但阳性率有所下降，猪繁殖与呼吸综合征的抗体水平在猪群二免后8周趋于稳定，猪群受圆环病毒2型疫苗毒株及野毒的双重刺激，抗体衰减规律较为复杂，从持续的跟踪检测分析发现圆环病毒2型疫苗二免后6周抗体水平有所下降，8周后抗体水平上升并持续至该批猪出栏。     

猪圆环病毒和猪瘟病毒对猪免疫功能的影响

目前猪病毒性免疫抑制病是规模化猪场最常见的疾病之一,严重影响猪群的健康,已经给世界养猪业造成了巨大的经济损失。引起猪免疫抑制的病原复杂多变,不同的猪场病因可能完全不同,从而给疾病的诊断与防治带来了很大的困难。多年的研究表明,该病因可能包括猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流感病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型     

猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、链球菌混合感染的实验室诊断

为确诊贵州省某猪场发病原因,对送检病料进行细菌分离鉴定和病毒核酸检测。结果:猪繁殖与呼吸综合征病毒实时定量荧光RT-PCR核酸检测为阳性;猪圆环病毒2型PCR扩增出大小为325 bp目的基因条带;细菌分离与生化鉴定显示存在链球菌感染,且药敏试验结果表明分离菌对硫酸安普霉素、延胡索酸泰妙菌素高度敏感。实验结果诊断为猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、链球菌混合感染。     

云南地区部分猪场猪呼吸道疾病综合征致病病毒感染的流行病学调查

为了解云南地区猪场猪呼吸道疾病的流行病学,从而为有效防制该疾病提供科学依据,利用ELISA和RT-PCR方法检测了春、夏、秋、冬四季,云南地区不同区域规模养殖场1 164份血清和全血样品中的猪瘟抗原、猪繁殖与呼吸综合征抗原、猪伪狂犬gE抗体、猪圆环病毒2型特异抗体。结果显示:猪瘟抗原阳性率为11.34%,猪圆环病毒2型抗体阳性率为50.86%,猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为35.40%,猪繁殖与呼吸综合征抗原阳性率为44.51%。表明云南地区规模化猪场存在猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病野毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,不同季节和猪群年龄阶段感染情况有一定差异性。     

一例猪圆环病毒2型和大肠杆菌、溶血葡萄球菌混合感染的诊断

山东德州某猪场发生猪高热、呼吸系统疾病甚至死亡的疫情。采集病料提取病变组织总DNA或RNA进行猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒的PCR或RT-PCR检测。PCR扩增出353 bp的猪圆环病毒2型特异性条带。同时进行细菌分离培养、生化鉴定等试验,诊断为猪圆环病毒2型和大肠杆菌、溶血葡萄球菌混合感染。     

规模化猪场圆环病毒病的防控

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的猪病毒性疾病,是继猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病,PRRS)之后又一免疫抑制性疾病。目前,我国猪群的PCV2感染十分普遍,在养猪生产的各个阶段都存在感染,特别是哺乳仔猪和仔培猪、母猪的感染率很高。近年来由PCV2感染所引发的疾病已成为我国规模化猪场的主要疫病,其危害十分严重,给我国养猪生产造成了巨大的经济损失。笔者就规模化猪场圆环病毒病的危害及控制措施作一阐述。     

一例猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的诊断

本试验采用多重PCR方法,对来检于贵州省清镇市某猪场送检病料进行猪病毒性疫病的病原快速检测,诊断结果表明该例患病猪为猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 3种病毒的混合感染。     

Prevalence of infection with porcine circovirus-2 (PCV-2) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) in an integrated swine production system experiencing postweaning multisystemic wasting syndrome

The objective of this study was to evaluate the prevalence of infection with porcine circovirus-2 (PCV-2) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) through a longitudinal study in an integrated swine production system (7 farms) experiencing postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). Risk factors for PCV-2 infection and for PCV-2 and PRRSV coinfection were also evaluated. Fifteen sows from each herd and 4 non-cross-fostered piglets from each sow were randomly selected at farrowing and ear-tagged at birth. Serum samples were analyzed for antibodies to PCV-2 and for detection of the PCV-2 and PRRSV genomes. Statistical analyses involved 2 approaches. The 1st approach characterized the dynamics of PCV-2 infection and their relationship with PRRSV infection. The 2nd approach analyzed the probability of being infected by PCV-2 or by both PCV-2 and PRRSV through a generalized linear mixed model incorporating sow and farm characteristics. At the 1st sampling time (1 wk of age), there was a significant relationship between sow PCV-2 infection and piglet PCV-2 infection (P < 0.0001). The risk of PCV-2 and PRRSV coinfection was 1.85 times greater in piglets from a sow with low titers of PCV-2 antibodies than in piglets from sows with medium to high titers (P = 0.03) and was 2.54, 2.40, and 2.02 times greater, respectively, in piglets from primiparous sows, PCV-2-infected sows, and farms in an area of high pig density than in piglets from sows of higher parity (P = 0.004), noninfected sows (P = 0.04), and farms in a low-density area (P = 0.09).     

华南地区猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒检测分析

为了解华南地区猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的最新流行情况,采集了华南地区11个规模猪场各饲养阶段猪血清807份,用套式PCR(nPCR)检测猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2);采集了若干猪场2010年1月至2011年8月期间有咳嗽、喘气、消瘦及疑似PDNS等临床症状的猪血清312份,以及无临床症状猪血清104份,以nPCR检测PCV-2,以一步法反转录PCR(RT-PCR)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒。结果发现,所调查的11个规模猪场中只有5个检出PCV-1,所有猪场均检出PCV-2。PCV-2阳性率为30.61%,而PCV-1阳性率仅为4.21%;经产母猪和7周龄以上保育猪PCV阳性率最高;有临床症状的猪血清PCV-2阳性率为58.65%,PRRSV阳性率为37.82%,PCV-2阳性猪群中有39.89%的猪同时感染PRRSV;有症状猪群7月～9月的PCV-2感染率最高,而1月～3月最低;无临床症状猪血清PCV-2阳性率为27.9%,PRRSV阳性率为0.96%,PCV-2与PRRSV无混合感染。证明PCV尤其是PCV-2在华南地区仍广泛传播并流行,而且PCV-2与PRRSV混合感染致病情况较多。PCV-2的感染率与季节有一定的相关性,种猪带毒情况严重。     

Linked outbreaks and control of porcine reproductive and respiratory syndrome and postweaning multisystemic wasting syndrome in a pig farm in Poland

In a newly established farrow-to-finish farm (porcine reproductive and respiratory virus [PRRSV]-free, porcine circovirus type 2 [PCV-2]-infected), reproductive failure was seen seven months after population. The conception rate dropped from 89 to 51 per cent, and the abortion rate increased from 0.5 to 11 per cent. The following month, characteristic lesions of postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) and elevated mortality were observed in weaned pigs. Laboratory examinations confirmed reproductive failure due to PRRSV and PMWS associated with apparent activation of the PCV-2 circulating in the farm. The herd was closed for replacement and a number of measures to improve hygiene, environmental conditions and feeding were applied. The abortion rate returned to preoutbreak levels four months after the beginning of the PRRS outbreak and the conception rate returned to normal four months later. Slower improvement was observed regarding the PMWS outbreak, with PMWS-related losses disappearing nine months after the detection of PMWS. Analysis of seroconversion profiles to PCV-2 and PRRSV during the outbreak and after its control indicated that while PRRSV was eliminated from sows and weaners by the control measures, the time of PCV-2 infection was unchanged and occurred at seven weeks of age during the PMWS outbreak as well as after its elimination. However, the elimination of PMWS from the herd coincided with increased levels of maternally derived antibodies to PCV-2 in one- to five-week-old pigs and faster serological responses to infection with PCV-2.     

猪瘟、猪圆环病毒病和猪繁殖与呼吸综合征寡核苷酸芯片诊断方法的建立与初步应用

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪圆环病毒Ⅱ型（PCV-2）是引发猪繁殖障碍的主要病原,建立其基因芯片快速检测体系,对开发猪繁殖障碍快速检测试剂盒具有重要意义。根据GenBank中已发表的PRRSV、CSFV和PCV-2的病毒基因组序列,设计合成特异性引物和特异性较强的60mer的寡核苷酸探针,并将探针按所设计阵列固定于表面经氨基化修饰的玻片上,制备出寡核苷酸芯片。通过引物标记及特异性验证,建立了带标记引物的多重PCR检测体系,从而产生大量可与寡核苷酸探针特异性互补的带标记的DNA片段。将标有荧光染料的扩增产物与芯片上寡核苷酸探针杂交,扫描、分析芯片上荧光信号。结果表明,芯片上各样本对应探针位点呈现阳性荧光信号,而阴性对照和空白对照则基本不能检测到荧光信号。分别用基因芯片检测方法和PCR/RT-PCR检测60份临床病料,两者符合率高达92%,表明该检测技术能够用于临床病料的检测及快速诊断PRRSV、CSFV和PCV-2。     

广西猪繁殖与呼吸综合征病毒感染状况调查

采用RT-PCR技术,对2004年1月至2005年4月期间,广西13个市104个疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场,无菌采取231头病、死猪的组织病料(肺脏、淋巴结、脾脏)进行了病毒检测。同时,对鉴定为PRRSV阳性的组织病料和猪场进行了猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,以确定猪群中PRRSV与PCV2、CSFV和PRV混合感染情况。结果从12个市的115份组织病料中检出PRRSV,病料的平均阳性率为49.78%(115/231),猪场的平均阳性率为61.54%(64/104),不同地市有一定的差异。PRRSV与PCV2、CSFV和/或PRV二重或多重混和感染的组织病料总数为53份,猪场总数为39个,混合感染的组织病料和猪场的总阳性率分别为22.94%(53/231)和37.50%(39/104)。混合感染的组织病料占PRRSV阳性组织病料的46.09%(53/115),混合感染的猪场占PRRSV阳性猪场的60.94%(39/64)。其中以PCV2和PRRSV混合感染的组织病料和猪场数最多。由此可见,PRRSV感染在广西猪场已普遍存在,与其他病毒混合感染现象逐渐趋向复杂化。     

安徽省猪呼吸道疾病五种病原的分离与鉴定

猪呼吸系统疾病目前是困扰我国养猪业主要疾病之一。为了弄清安徽省猪呼吸道疾病主要致病微生物,本研究利用细菌学鉴定技术、RT-PCR技术对2010年-2011年安徽省皖南、皖中、皖北地区采集的180份呼吸障碍性病(死)猪病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型、链球菌、巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌等5种病原进行了分离鉴定。结果显示,猪繁殖与呼吸综合征病毒感染率高达68%,圆环病毒2型感染率高达83.3%;猪繁殖与呼吸综合征病毒与圆环病毒2型混合感染率达27.8%,猪链球菌感染率为22.8%。结果提示,猪繁殖与呼吸综合征病毒缺失株、圆环病毒2型、链球菌的普遍感染是近年安徽省猪呼吸道疾病的重要致病病原,研究结果为安徽省今后猪群呼吸道疫病防控策略的制定提供了参考依据。     

Identification of porcine circovirus in tissues of pigs with porcine dermatitis and nephropathy syndrome

Thirty-three pigs affected by porcine dermatitis and nephropathy syndrome, 30 from Spain and three from the USA, were investigated in order to detect porcine circovirus (PCV) in their tissues. A standard in situ hybridisation technique using a specific DNA 317-bp probe based on a well-conserved sequence of PCV (which recognises both PCV-1 and PCV-2) was applied to formalin-fixed, paraffin-embedded tissues. Twenty-eight of the 30 Spanish pigs and all three American pigs had PCV in at least one tissue. Viral nucleic acid was detected mainly in lymphoid organs, and especially the lymph nodes. The viral genome was also found, in order of decreasing quantity, in Peyer's patches, tonsil, lung, spleen, kidney, liver, and skin. Viral nucleic acid was located mainly within the cytoplasm of monocyte/macrophage lineage cells, including follicular dendritic cells, macrophages, histiocytes and Kupffer cells. No viral nucleic acid was found in damaged glomeruli or arteriolar walls. In frozen samples available from three Spanish pigs, the virus was identified as type 2 by using the polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism. Most of the pigs from which serum was available were seropositive against porcine respiratory and reproductive syndrome virus (PRRSV), and PRRSV antigen was detected in the lung of two of the Spanish pigs. These results suggested that PCV is present in tissues of almost all pigs affected by PDNS, and PCV has to be considered as a possible agent involved in the pathogenesis of the syndrome.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和牛病毒性腹泻病毒双重RT-PCR检测方法的建立

根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'端非编码区基因序列,设计合成了1对特异性引物,参考本实验室针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白设计的引物,经过PCR反应条件的优化,建立了BVDV和PRRSV双重RT-PCR的检测方法。对于PRRSV和BVDV的cDNA最低检测量分别为3.8×10-4 ng和7×10-4 ng,对于猪瘟病毒(CFSV)、脑心肌炎病毒(EMCV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的PCR扩增结果均为阴性;用该方法对江苏省不同地区采集的75份仔猪的肺脏、脾脏和淋巴结等病料进行了检测,结果PRRSV有55份阳性,BVDV有14份阳性,PRRSV和BVDV混合感染的有12份,与PRRSV和BVDV单一RT-PCR的检测结果符合率分别为89.3%和92%。证明建立的双重RT-PCR检测方法可用于临床样品中BVDV和PRRSV的检测。     

SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2和PRV交叉感染的检测

采用RT-PCR方法对37份疑似猪流感病毒(SIV)感染病料进行了病原学检测。同时,还运用PCR和RT-PCR方法对SIV阳性病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病毒(PRV)目的基因片段的扩增。结果,扩增出了SIV特异目的基因片段,且4份病料都为混合感染,感染状况分别为SIV/PRRSV/PRV,SIV/CSFV/PRRSV三重感染,SIV/PCV-2和SIV/PRRSV二重感染。     

山东种公猪精液携带主要病原的检测

采用PCR技术,对2007年-2009年山东部分地区的38个猪场和人工授精站的生产公猪精液样品727份进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪细小病毒(PPV)5种主要病原的检测。结果检出CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2和PPV的阳性数和阳性率分别为18份(2.48%)、27份(3.71%)、7份(0.96%)、33份(4.54%)、9份(1.24%),有7份样品为2种以上病原混合感染,其中以PRRSV+PCV-2混合感染最多。结果表明精液传播病毒仍是当前母猪繁殖障碍的重要原因之一,应重点加强对种公猪的疫病净化和公猪精液管理,从源头控制传染源。