注射用大黄素脂质体的制备及质量评价

建立大黄素脂质体包封率的测定方法,制备包封率高的注射用大黄素脂质体,并对其进行质量评价。采用离心沉淀-微孔滤膜挤压法分离游离大黄素和大黄素脂质体,高效液相色谱法测定大黄素脂质体的包封率;采用薄膜分散-冷冻干燥法制备注射用大黄素脂质体,以包封率为评价指标,建立制备工艺;考察注射用大黄素脂质体的包封率、表面形态、平均粒径、zeta电位及贮存稳定性。结果表明:在磷脂、胆固醇、大黄素的质量比为70∶2∶3,水为水化液,预冻温度-10℃,蔗糖为冻干保护剂,蔗糖与水质量比为1∶10,5%葡萄糖注射液为再水化液的条件下,制得的注射用大黄素脂质体包封率在80%以上,形态呈规则球形,平均粒径(206.3±17.5) nm,zeta电位(-31.6±0.8) mV,4℃密封环境下可贮存3个月以上。     

阿霉素脂质体制备工艺优化及节拍式给药细胞探讨

目的:优化阿霉素脂质体处方和制备工艺,利用节拍式低剂量给药化疗方式探讨阿霉素脂质体对HO-8910 人卵巢癌细胞的体外杀伤作用.方法:采用硫酸铵梯度法制备脂质体,正交设计优选制备处方;葡聚糖凝胶柱层析 法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;考察其体外释放度.以常规给药24h和节拍式低剂量给药144h的 形式分别考察阿霉素脂质体、阿霉素体外细胞的毒性作用.结果:所得优化处方为:磷脂与胆固醇的质量比为 3∶1,硫酸铵浓度为155mmol/L,药物与磷脂的质量比为1∶10,孵育温度为60℃.以优化处方制得的脂质体平 均包封率达92.86%;脂质体具有一定的缓释作用.脂质体的细胞毒性实验结果显示,游离阿霉素与阿霉素脂质体 IC50值24h分别为0.62μg/mL和0.46μg/mL,144h分别为0.06μg/mL和0.01μg/mL.结论:优化得到的阿霉 素脂质体处方工艺简便,包封率高;无论是游离的阿霉素或是阿霉素脂质体,运用节拍式低剂量给药的方式在H0- 8910细胞中抑制率都明显优于MTD化疗方式给药,其中脂质体药物节拍式低剂量给药方式对H0-8910细胞的抑 制率明显优于游离药物.     

伊维菌素脂质体的制备工艺

为优化制备伊维菌素脂质体处方和工艺,选用薄膜分散—超声法制备伊维菌素脂质体,研究制膜旋转蒸发转速、有机溶剂以及洗膜震速等对伊维菌素脂质体包封率和稳定性的影响.确定出最佳制备试验条件:乙醚为有机溶剂,制膜旋转蒸发转速150r/min,洗膜震速50~100r/min.以正交试验法优选出制备伊维菌素脂质体的最佳工艺处方:磷脂与胆固醇的质量比为1∶0.1;伊维菌素与总脂质量比1∶10;PBS液的pH值7.0;水相体积比4∶3.按最佳试验条件和工艺处方制备的脂质体,最高包封率达到(84±1.6)%,工艺稳定,镜下观察脂质体形态圆整,粒径小而均匀,无游离结晶物.     

3种淡水鱼血浆中游离磷脂的有效性测定(英文)

[目的]检测鲤鱼、鲫鱼和鲶鱼3种淡水鱼血浆中游离磷脂的有无,为探索3种淡水鱼凝血现象的生理机制奠定基础。[方法]采用加热兔脑磷脂凝血有效性试验检测加热磷脂的活性。以兔的PPP为基质血浆,用加热的鲤、鲫和鲶CFP为被检测血浆,混合后分别测定凝血时间,并测定其血浆中是否存在参与凝血的游离磷脂。将鲤、鲫和鲶CFP分别80℃加热20min,冷却至室温,再与兔的不同稀释倍数(血浆∶去离子水:1∶0,1∶1,1∶2,1∶3)的PPP混合,然后各混合血浆再加入0.05mol/LCaCl2(2∶1),测混合血浆凝固时间。以3种未加加热鱼的CFP和兔的PPP混合血浆复钙时间作为对照。[结果]各试验动物血浆加热磷脂的APTT平均值与对照间差异不显著(P0.05),说明磷脂在80℃加热20min后,其凝血功能并未发生变化。家兔PPP、加热后的鱼CFP-兔PPP混合血浆、正常鱼CFP-兔PPP混合血浆3个试验组的平均凝固时间,加热鱼CFP-兔PPP混合血浆凝固最慢,正常鱼CFP-兔PPP混合血浆凝固最快,家兔PPP凝固时间居中,不同稀释倍数的血浆复钙时间差异极显著(P0.01)。[结论]鲤鱼、鲫鱼和鲶鱼的CFP中不含游离的磷脂,它们CFP在无磷脂存在的条件下也可以发生凝固。     

沙棘SOD脂质体制备及性质

[目的]优化沙棘SOD脂质体的制备条件。[方法]以野生沙棘为原料,在单因素条件影响下,通过控制变量,逐一改变类脂、SOD、缓冲液等作用因素,研究了其对沙棘SOD脂质体制备的影响。[结果]在脂胆质量比为2∶1,类脂浓度15 mg/ml,SOD浓度为0.4mg/ml,缓冲液pH为7.5和浓度为0.15 mol/L的条件下,制备的沙棘SOD脂质体的活性包封率最高,包封率达40%。[结论]不同的脂胆比、SOD浓度、缓冲液pH、存放时间对沙棘SOD脂质体的制备效果显著不同,而存放温度对SOD脂质体活性包封率影响作用不大。     

磷脂酰胆碱反应体系的建立

采用2-油酸-1-棕榈酸磷脂酰胆碱为表面活性剂、低级醇为助表面活性剂、异辛烷为油相、蒸馏水为水相,以伪三元相图微乳面积大小为指标,考察磷脂酰胆碱微乳体系.结果表明,磷脂/正丙醇/异辛烷/水W/O徽乳体系、磷脂/正丁醇/异辛烷/水W/O微乳体系以及磷脂/正丙醇/异辛烷/水O/W微乳体系均为稳定的磷脂酰胆碱微乳体系.3种微乳体系和脂质体分别与鸭肉肌内磷脂酶振荡反应10h后,采用TLC联用Quantity One软件鉴定反应产物中的脂肪酸,以脂肪酸斑点分析的Trace Qty值为指标,最终确定磷脂酰胆碱反应体系.因此,以脂质体作为反应体系所产生的脂肪酸最多,即脂质体为磷脂酰胆碱最佳反应体系.为进一步研究磷脂酰胆碱的酶解机制和磷脂酶的分离纯化提供技术方法.     

高效液相色谱法分析黄瓜子叶极性脂

通过HPLC的二次操作,可将黄瓜子叶极性脂快速、经济地分离成各脂成分,并进一步分离成各分子种。通过第1次操作,黄瓜子叶极性脂被分离成各脂组分:单半乳糖二甘油脂(MGDG),双半乳糖二甘油酯(DGDG),磷脂酰乙醇胺(PE),磷脂酰胆碱(PC),磷脂酰甘油(PG),磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酸(PA)等;第2次经HPLC系统后,各脂组分被分离成C18∶3/C18∶3、C18∶2/C18∶3、C18∶2/C18∶2、C16∶0/C18∶3、C16∶0/C18∶2等分子种。     

乳脂肪球膜磷脂-免疫球蛋白G脂质体的制备

以乳脂肪球膜磷脂为膜材,采用高压均质法制备免疫球蛋白G脂质体, 研究了不同磷脂浓度、不同均质压力和不同均质次数对脂质体的包埋率和平均粒径的影响。结果表明,磷脂浓度越大,脂质体包埋率越高、粒径越大; 均质压力和均质次数对脂质体的包埋率和平均粒径有不同程度的影响,脂质体粒径在100～200 nm之间,包埋率可达52%。用差示扫描量热法检测脂质体各组成物质的相变过程,电镜观察脂质体为球状或近似球状的小囊泡,显示成功制备出一种以乳中成分为膜材的可食用性脂质体。     

流感疫苗类脂质体制备及稳定性研究

用薄膜分散法制备流感疫苗类脂质体混悬液,采用正交设计法优化制备工艺,其最佳制备条件为脂质与疫苗体积比1.5∶1、脂质液浓度1∶60、温度40℃、水合介质30 mL。结果表明:以优选的最佳工艺制备的类脂质体包封率高于65%、颗粒大小均匀、形态呈球形和椭圆形,且重现性较好;(25±2)℃储存7 d基本稳定。说明正交设计法优化制备的类脂质体包封率较高、常温下稳定性好,有望减轻冷链运输的压力。     

2株节旋藻的分类鉴定和磷脂脂肪酸特征分析

利用荧光显微镜观察节旋藻CB001和CB002的菌丝形态,同时对其16S rDNA序列以及在液体和固体培养条件下的磷脂脂肪酸特征进行系统分析.显微成像观察表明,CB001和CB002均属于钝顶节旋藻(Arthrospira platensis),具有运动能力;磷脂脂肪酸特征分析结果显示,磷脂脂肪酸16∶0、16∶1 w7c、18∶1w9c、18∶2 w6c、14∶0 anteiso和16∶1 w7c alcohol可能是节旋藻的代表性脂肪酸;18∶1 w5c和16∶3 w6c分别为CB001和CB002的特有磷脂脂肪酸组分;同时,不同培养方式对CB001和CB002磷脂脂肪酸组成模式具有极其显著的影响.     

Erratum

In the report "Malaria parasites adopt host cell superoxide dismutase" by A. S. Fairchild et al. (19 Aug., p. 764), the caption for figure 2 on page 765 was incorrect and should read as follows: "Comparison of host and parasite SOD's (9) by (A) polyacrylamide gel electrophoresis (8) and (B) isoelecteric focusing (7). Gels were stained for SOD activity (10), and bovine erythrocyte SOD (Sigma, type 1) was used as a reference [pI = 4.95 (13)]. Lane 1, rat-derived P. berghei SOD; lane 2, rat erythrocyte SOD (pI = 5.1); lane 3, mouse-derived P. berghei SOD; lane 4, mouse erythrocyte SOD (pl = 5.7); lane 5, bovine erythrocyte SOD." The pI's of mouse and rat erythrocyte SOD's cited in the text should also be corrected to the values given above.     

不同气体成分处理对丰香草莓采后品质、SOD及CAT活性的影响

以采后"丰香"草莓为材料,研究了不同气体成分处理(11%O2+10%CO2,3%O2+5%CO2)及冷藏对照对果实采后品质参数(失重率、腐烂指数、pH值和可溶性固形物含量)、SOD和CAT活性的影响,旨在寻求适宜"丰香"草莓贮藏的气体成分。结果表明:较对照相比,3%O2+5%CO2处理可降低果实的腐烂指数和失重率,维持可溶性固形物含量,抑制SOD活性的升高,增强CAT活性和pH值,11%O2+10%CO2处理亦可降低果实的失重率、腐烂指数,维持可溶性固形物含量,但导致贮藏后期果实SOD活性的升高,同时降低了CAT活性。可见,3%O2+5%CO2处理对"丰香"草莓的保鲜效果较理想。     

豫楸1号4种砧木嫁接苗在干旱胁迫下保护酶系统的变化

用盆栽自然干旱法对豫楸1号4种砧木嫁接苗进行干旱胁迫。在胁迫过程中,测定了超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的变化。结果表明:在干旱胁迫下,豫楸1号4种砧木嫁接苗保护酶活性(SOD、POD、CAT)均随着干旱胁迫增加而呈现先上升后降低的变化趋势,其中POD、CAT的活性变化滞后于SOD。金丝楸砧木嫁接苗的保护酶值比其他嫁接苗大。金丝楸砧木嫁接苗的SOD值与梓树嫁接苗呈0.05水平显著差异,其CAT活性与灰楸嫁接苗、梓树嫁接苗呈0.05水平显著差异。从保护酶活性变化可以看出,SOD、CAT在清除氧离子自由基方面起到关键作用,豫楸1号4种砧木嫁接苗抗旱能力强弱依次为金丝楸嫁接苗>自砧苗>灰楸嫁接苗>梓树嫁接苗。     

不同品种大麦营养生长与营养成分动态变化

以双啤、西南86911、2000／2－6－23个品种为材料,研究不同生长时期大麦叶片中蛋白质、叶绿素、维生素C、SOD酶活性等成分的变化。结果表明：3种大麦品种在幼苗生长期,生长至第15d时,蛋白质、维生素C、叶绿素含量均达到最高。在第15d,西南86911比双啤、2000／2－6－2两个品种的蛋白质和维生素C的含量高,而双啤在前期（10－15d)SOD活性均比西南86911和2000／2－6－2都显著提高;收获大麦幼苗以20d左右为佳。     

外源bcl—2基因和脂质体对鸡卵泡颗粒细胞体外分裂和凋亡的影响

选用正在产蛋的罗曼鸡，取其排序第3的卵泡分离层颗粒层细胞，用含血清培养基培养，并用含脂质体每孔0．0，0．6，1．2，2．4，4．8μL和bcl-2基因重组质粒每孔0．2μg转染卵泡颗粒细胞。用流式细胞术等方法分析转基因后的源代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。结果发现，与未转染组相比，转染后的传代细胞分裂速度较快（P＜0．01）、凋亡比率较低，G2／M＋S期细胞极显著高于对照（P＜0．01），且与脂质体浓度有剂量依赖关系。在转染时间为12h、DNA含量为每孔0．2μg的条件下，脂质体最佳转染浓度为每孔1.2μL。这些结果进一步证明，外源bcl-2基因或脂质体具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用。     

水分胁迫下钙对大豆膜脂过氧化保护酶系统的影响

艇控制营养钙量的方法培养大豆幼苗,得到３种钙水平的大豆幼苗作材料,对水分胁迫下（０．５ＭＰａ－ＰＥＧ－６０００）,不同钙水平大豆叶片饱和持水,超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶及其同工酶进行了研究,以期从膜脂过氧化的角度探讨钙在植被物抗旱中的作用。     

盐胁迫对“春茄6号”幼苗叶面积和生理生化指标的影响

茄子是世界四大蔬菜作物,其周年供应主要依靠设施次生盐碱化,这将化栽培技术。然后由于设施栽培常年大量施用化肥和不合理灌溉等因素,导致土壤的严重影响蔬菜的生长发育和设施农业的可持续发展。因此,以以“春茄6号”幼苗为试材,研究0 mol/L、50 mol/L、100 mol/L、150 mol/L不同浓度NaCl盐胁迫对叶面积和抗氧化酶含量的影响,研究分别在第0 d、第3 d、第6 d和第9 d记录叶面积,同时测定了丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)含量。实验结果如下：随着盐胁迫浓度逐渐上升,“春茄6号”幼苗叶面积增长逐渐缓慢,在150 mol/LNaCl处理下“春茄6号”幼苗叶面积生长量最低,叶面积是1.16 cm₂^;NaCl盐胁迫对“春茄6号”幼苗叶片的叶面积MDA、SOD、POD和CAT含量都会产生抑制。不同NaCl浓度对“春茄6号”幼苗的抑制效果为150 mol/L＞100 mol/L＞50 mol/L＞0 mol/L。     

玉米种子成熟过程中超氧化物歧化酶和抗坏血酸氧化酶活性的变化

研究了沈试２９玉米种子成熟过程的歧化酶及其同工酶、抗坏血酸酶活性和膜脂过氧化产物丙二醛含量的变化。结果表明,超氧化物歧化酶由乳熟期到蜡熟期活性降低,至完 熟期和枯熟期,其活性又农渐升高;丙二醛含量的变化则与此相反;怀血酸氧化酶活性在蜡熟期略有升主,至期和枯地又迅速降低。在玉米种子成熟过程中超氧化物歧化酶同工酶谱带没有发生明显变化。没有出现新谱带。     

3种配方处理对吉贝插穗生根及保护酶系统的影响

为揭示植物逆境保护酶系统变化与生根的关系,取吉贝2 a生采穗圃中当年生枝条为插穗,比较3种配方处理插穗生根质量及不同生根阶段中保护酶系统超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性变化规律。结果显示:（1）3种配方处理插穗后,愈伤组织出现时间、第1条根出现时间、生根高峰期较对照分别提早0.80 d、1.30 d及2.60 d以上:（2）较好促根配方对吉贝插穗生根效果也不同,1#处理生根系数高于其它处理,方差分析差异达显著;（3）SOD、POD在生根过程中均呈现"升高一下降"趋势,且均在根源基诱导期达到峰值,活性值与对照差异显著,生根进程中酶活值达极显著;（4）CAT活性呈"升高—下降—升高"趋势,峰值同样出现在根源基诱导期,酶活值与扦插起始期或CK差异显著;（5）逆境下自由基通过SOD活性增加歧化后,H₂O₂产物由POD、CAT增活共同清除,从而降低氧化胁迫。研究表明,1#配方生根质量高于其它配方,且配方处理能够促进逆境下保护酶活性的升高,有效清除自由基积累,并维持一定的动态平衡促进生根。