湿地松组培苗生根的影响因子

以湿地松组培嫩梢为外植体诱导不定根。研究结果表明，基本培养基及其中附加生长素的种类及浓度对不定根的分化有较大影响，改良1／2GD是湿地松嫩梢生根的较优基本培养基，其次为1／2DCR，1／2MS；嫩梢接种在改良1／2GD＋IBA2．0的培养基中培养30d后，其不定根诱导率最高达51．6％。在改良1／2GD＋NAA0．05的培养基中不定根诱导率最高达59．3％，NAA与IBA组合较单独使用具有更佳的生根效果，嫩梢接种1／2GD＋NAA0．05＋IBA1．0上30d后最高生根率达81．3％，但NAA与6-BA或活性炭（AC）组合均不利于湿地松嫩梢的生根。生根小植株转移至无激素的改良1／2GD培养基中，不定根伸长较快。在适宜的温温度条件下，再生植株移栽成活率达85％。     

西洋梨组培苗与杜梨幼苗微芽嫁接技术的研究

利用西洋梨组培苗嫁接在露地杜梨幼砧上，研究了微芽嫁接苗的技术。组培苗一般继代培养 ２５ ｄ左右，生长健壮、顶端有明显新梢的组培苗嫁接易成活。炼苗天数、组培苗所带叶片数以及不同外源激素处理对嫁接成活率均有影响，其成活率最高达９０％。     

草莓组培苗移栽驯化技术与优化条件的探讨

[目的]探讨简易高效的草莓组培快繁技术体系。[方法]以春香和女峰品种的脱毒苗为试验材料,分析了影响草莓组培苗移栽驯化效果的有关因素。[结果]组培苗根系状况、栽培基质种类、消毒剂使用与否、湿度条件等因素对驯化效果的影响都很显著;在选用根长2 cm以上的组培苗,采用草炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1的栽培基质,并配合使用400倍多菌灵消毒处理,移栽后保持相对湿度70%~80%的条件下,草莓组培苗的驯化效果良好,移栽成活率可达100%,且幼苗生长发育状况良好。[结论]找到了草莓组培快繁的移植方法和条件。     

子午岭杜梨播种繁育技术

本文在介绍了杜梨形态特征及生物学特性的基础上,总结了子午岭杜梨播种繁育技术,包括种子采集、种子处理、育苗地的选择、整地做床、播种育苗技术、苗期管理以及病虫害防治等内容,以期为子午岭杜梨播种繁育提供技术参考。     

杜梨播种育苗技术

杜梨在西北地区被广泛的种植,陕西省也是杜梨的主要种植产区。由于本地区沙漠化严重,土壤贫瘠等实质性问题,加之杜梨对当地生态环境的适应性很强,又可起到防风固沙和围封等实用性价值。所以重点对杜梨的育苗技术进行论述。     

植物激素对西藏大花红景天组培苗生根诱导的影响

以西藏大花红景天试管苗幼茎为试材,研究基本培养基、IBA、NAA、IAA对组培苗生根的影响。试验结果表明：基本培养基、IBA、NAA对不定根的分化有较大影响,1/2MS＋IBA0.5mg/L＋NAA0.1mg/L作为组培苗的生根培养基较好,生根率达82.36%。     

黑叶紫薇组培苗生根技术的研究

以黑叶紫薇组培苗为材料研究了不同生长素种类和浓度对其试管内生根的影响,并研究了各种基质对生根苗移栽与试管外生根的影响.结果表明:黑叶紫薇试管内生根较好的生长调节剂配比为IBA0.5 mg/L;生根苗移栽较好的基质配比为珍珠岩:泥炭土=3∶7;试管外生根较好的基质配比为河沙:腐殖土=5∶5.     

一品红组培苗试管外生根技术研究

对一品红组培苗试管外生根过程中炼苗、生根药剂种类及使用浓度、扦插基质等因素的研究结果表明：一品红无根组培苗扦插前先将培养瓶置18～25kLx光照条件炼苗12～24d,可使组培苗茎干及叶柄发红、幼茎组织充实,提高了抗性,是组培苗扦插成功的关键;在ABT2号生根粉100mg/kg浓度溶液中处理3h,生根效果最好,扦插40d时,平均根数6条,平均根长2.9cm;在3种基质中,以珍珠岩最好,扦插成活率达83.80%。     

甘薯组织培养中不定根的高频诱导和优化

在甘薯组织培养中获得了不定根的高频诱导，诱导率达95.2%。用正交试验法对影响不定根分化的各种因子进行了研究和优化。结果表明，甘薯不定根诱导和分化的最佳培养基为MS 1.0mg/lANN；不定根生长的最适培养基为MS 0.1mg/lNAA；茎段是甘薯不定根诱导及生长的最适外植堆栈 ；外植体类型对不定根分化的影响最大，其次是NAA，而BA影响最弱。     

花叶玉簪组培苗快速生根技术

以花叶玉簪(Hosta plantaginea)为材料,采用不同基质对其组培苗进行快速生根,统计组培苗的生根数与根长,结果表明,最适合花叶玉簪快速生根的培养基配方是1/2MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭1.0 g/L+基质4 g/L+糖30 g/L,可为大面积生产花叶玉簪提供依据。     

影响野生杜梨种胚离体培养的因素

研究了离体培养条件下不同浓度激素、活性炭、低温及其处理方式和种皮等因素对打破杜梨种胚休眠促进萌发的影响.结果表明,1/2MS培养基上附加GA3和6-BA可以有效地促进去皮杜梨种胚的萌发,以6-BA的促进萌发作用优于GA3,其中分别以7.5 mg/L 6-BA和15.0 mg/L GA3促进萌发和成苗效果较好,但根系发育以附加GA3的培养基为好,易发生侧根.低温和去种皮处理均有利于种胚的萌发,且表现接种后低温预培养方式优于低温处理后再接种培养.活性炭有利于侧根的发生,以0.1%水平促进萌发成苗作用较好;IAA具有很好的促进生根的作用,平均生根率可达89.54%,且以IAA为2 mg/L时侧根条数较多.     

牡丹试管苗与扦插苗生根过程中相关酶活性的变化

【目的】研究牡丹品种‘凤丹白’无根试管苗和扦插苗生根过程中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和吲哚乙酸氧化酶(IAAO)活性的变化,探讨酶活性变化与牡丹生根的关系。【方法】以牡丹品种‘凤丹白’无根试管苗和扦插苗为材料,测定生根过程中POD、PPO和IAAO酶活性变化。【结果】在生根过程中,牡丹试管苗POD活性呈"下降-上升-下降-上升"趋势,PPO和IAAO活性均呈"上升-下降-上升"趋势。而扦插苗POD和PPO活性均呈"上升-下降-上升"趋势,IAAO活性呈"下降-上升-下降-上升"趋势。试管苗POD活性在第3天降到最低值,第1个峰值出现时间较扦插苗推迟1d;PPO活性第1个峰值较扦插苗提前2d,低值推迟1d;IAAO活性第1个峰值和低值出现时间均较扦插苗提前2d。【结论】与试管苗相比,牡丹扦插苗生根过程中POD、PPO及IAAO酶活性的极值出现时间均推迟,这可能与扦插苗生根时间较晚有关。     

精原干细胞体外分离培养的研究进展

为探索提高精原干细胞分离和体外培养效率的技术方法,以建立长期稳定的动物精原干细胞培养体系,对动物精原干细胞的分离纯化和体外培养的研究进展进行综述。以"Spermatogonial stem cell,Isolation,Culture,Enrichment,in vitro"和"精原干细胞、分离、培养和体外扩增"为检索词,查阅精原干细胞相关文献,并进行归纳整理。精原干细胞分离主要有机械分离法和酶消化法,纯化精原干细胞的方法有差速贴壁法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、流式细胞法等,目前大动物精原干细胞的富集常使用酶消化法、差速贴壁法和Percoll梯度离心法相结合。精原干细胞体外培养需模拟体内生境,通常在基础培养基中添加血清、饲养层细胞和各类生长因子等,培养条件会影响精原干细胞培养的效果。小鼠精原干细胞已建立较完善的培养体系,而人和多数大动物还缺乏完善的精原干细胞体外培养体系。     

嗜酸乳杆菌体外黏附山羊子宫内膜上皮细胞条件的优化

[目的]优化嗜酸乳杆菌对永生化山羊子宫内膜上皮细胞体外黏附的条件.[方法]通过革兰氏染色法,研究山羊子宫内膜上皮细胞的生长状态,嗜酸乳杆菌菌液浓度、菌体生长状态和pH值以及孵育时间对菌体黏附性能的影响.[结果]当山羊子宫内膜上皮细胞培养48 h,嗜酸乳杆菌菌液浓度为1.0×109mL-1,pH值为4.0,孵育时间120...     

猕猴桃离体生根期间抗氧化系统的变化

以美味猕猴桃品种海沃德组培苗为试材,研究了生根过程中抗氧化系统的变化规律及其相互关系。结果表明,在美味猕猴桃海沃德组培苗生根过程中,超氧化物歧化酶(SOD)活性和抗坏血酸(ASA)含量先增加后下降;过氧化物酶(POD)活性先降低后升高;过氧化氢酶(CAT)活性和谷胱甘肽(GSH)含量先下降后升高,接着又降低。与对照相比,NAA不同程度地提高了抗氧化酶活性和抗氧化剂含量,说明猕猴桃体内较高水平的抗氧化能力对生根具有促进作用。     

茶氨酸溴香酰胺对人宫颈癌细胞体内外生长的抑制作用

将茶氨酸为母体合成的茶氨酸衍生物茶氨酸溴香酰胺(TBrC)与茶氨酸作比较,评估茶氨酸溴香酰胺对人宫颈癌细胞体内外生长的抑制作用与其分子机制。应用MTT等方法检测不同浓度的TBrC对人宫颈癌细胞体外生长的影响,运用蛋白质印迹法检测解析这些人宫颈癌细胞中与凋亡和生长密切相关蛋白的表达和药物可能的作用靶点。此外,通过建立动物肿瘤模型,评价TBrC对荷瘤裸鼠人宫颈癌生长的抑制效果。实验结果显示,TBrC抑制人宫颈癌细胞体内外生长的活性超过其母体化合物茶氨酸多倍,对小鼠生长无明显毒性;TBrC作用的分子机制之一可能与抑制VEGFR1-Bcl-2/Bax信号传导通路相关。研究结果提示,TBrC具有广泛应用于临床治疗和(或)辅助治疗人宫颈癌和其他癌症的潜力。     

壳寡糖对小鼠胚胎体外发育的影响

本研究旨在通过向小鼠体内受精和体外受精原核胚胎的培养基中添加壳寡糖(对照组:0μg·m L-1;试验组:5、10、50、100和200μg·m L-1),研究其对小鼠胚胎着床前发育效率(卵裂率、囊胚率)和囊胚质量(囊胚总细胞数、内细胞团数(ICM)与总细胞数的比率)的影响。结果表明,对于自然受精胚胎,添加10μg·m L-1壳寡糖组的囊胚总细胞数显著高于对照组(P0.05),添加200μg·m L-1壳寡糖组的卵裂率和囊胚率均显著低于对照组(P0.05)。对于体外受精胚胎,添加10μg·m L-1壳寡糖组的囊胚率显著高于对照组(P0.05),添加200μg·m L-1壳寡糖组的囊胚率显著低于对照组(P0.05)。本试验表明,在化学限定培养基中添加适量的壳寡糖有利于改善小鼠胚胎的质量,但高剂量的壳寡糖可能不利于小鼠胚胎的早期发育。     

环磷酰胺诱导的尼罗罗非鱼体内外肝损伤模型的构建

以环磷酰胺(CTX)为诱导物，建立罗非鱼体内外急性肝损伤模型。体外，0、5、10、15、20和25 mmol·L^-1 CTX 分别作用于离体培养的罗非鱼精密肝切片（PCLS）6 h 后，测定切片培养上清中谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）和乳酸脱氢酶（LDH）水平，同时收集肝切片，用噻唑蓝（MTT）法检测肝切片增殖活性，测定切片内总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、过氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）水平。体内，采用胸腔注射法造模，每千克鱼体重分别注射0、10、25、75和100 mg环磷酰胺（下文以mg·kg^-1表示），每隔3 d给药1次，连续3次。末次给药后第4天取血，测定罗非鱼血清中GPT、 GOT 和LDH及肝组织匀浆中T-AOC 、MDA、SOD和GSH水平。结果显示： 20～25 mmol·L^-1 CTX作用体外培养精密肝切片6 h及75～100 mg·kg^-1 CTX胸腔注射罗非鱼后，均可以导致GPT、GOT和 LDH 活力显著升高；T-AOC、SOD活力及GSH含量显著下降，MDA含量显著提高。同时，20 和25 mmol·L^-1 CTX能导致肝切片增殖活性显著下降，分别为空白对照组的67.29%和55.41%，且有剂量依赖性。结果表明：CTX可引起罗非鱼肝损伤；分别采用20 mmol·L^-1 CTX 作用体外培养PCLS 6 h或者采用75～100 mg·kg^-1 CTX胸腔注射罗非鱼，每隔3 d给药1次，连续3次，均可以构建体内外急性肝损伤模型。     

红景天甙体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡研究

【目的】探讨红景天甙(Salidroside)体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡的作用及其可能的机制。【方法】-以体外培养的人肝癌QGY-7703细胞作为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测红景天甙对QGY-7703细胞生长的抑制作用,采用吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光双染、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术,分析红景天甙对QGY-7703细胞凋亡的诱导作用;采用Western blot免疫印迹法探讨红景天甙诱导QGY-7703细胞凋亡的可能机制。【结果】-MTT比色法试验结果表明,0.01,0.1,1,10和100 μg/mL红景天甙对QGY-7703细胞生长均有不同程度的抑制作用,细胞生长抑制率分别为13.2%,21.9%,31.4%,46.8%和60.9%,半数抑制质量浓度(IC₅₀)为18.56 μg/mL;用10 μg/mL 红景天甙处理QGY-7703细胞48 h,AO/EB荧光双染后,可观察到个别QGY7703细胞呈现亮绿色或橘红色,表明细胞发生了凋亡;琼脂糖凝胶电泳结果显示,10 μg/mL红景天甙作用QGY-7703细胞24,48 和72 h均可导致细胞核内DNA产生有序断裂,形成DNA梯形带;流式细胞术试验结果表明,10 μg/mL红景天甙的加入量为100 和200 μL时,QGY-7703细胞凋亡数分别为178和331个,相应的凋亡率分别为1.8%和3.5%,阴性对照组（10 μg/mL红景天甙加入量为0 μL）凋亡细胞数为105个,凋亡率仅为1.1％;Western blot免疫印迹分析结果表明,红景天甙下调了Bcl-2和PCNA蛋白的表达量,而使凋亡活化基因Bax与肿瘤抑制基因p53的蛋白表达量增高。【结论】 红景天甙对体外培养的QGY-7703细胞具有明显的生长抑制作用和诱导凋亡作用,其诱导凋亡作用与Bcl-2家族成员、p53、Bax和PCNA基因调控有关。     

大花蕙兰原球茎增殖、分化与离体保存的研究

以大花蕙兰原球茎为材料,从培养时间、基本培养基、糖浓度、培养方式及切割方式5个方面探讨了原球茎增殖、分化及离体保存的问题。结果表明,2个月内随着培养时间的延长,原球茎增殖与分化越显著,但培养2个月后,原球茎增殖不明显,分化却持续增加;1/2MS基本培养基利于原球茎增殖与分化,而3MS基本培养基利于原球茎保存;糖浓度的高低对原球茎增殖与分化影响显著,20 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎保存,50 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎增殖,而原球茎分化成苗应选用30 g·L~(-1)白糖;在3种培养方式中,固体培养利于原球茎分化,液体振荡培养利于原球茎增殖,液体静置培养利于原球茎离体保存;片状切割法利于原球茎增殖与分化,整体剥离接种法利于原球茎保存。即以2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为激素组合时,以片状切割法接种原球茎于1/2MS+50 g·L~(-1)蔗糖的培养基中并以液体振荡方式培养时利于原球茎增殖;以片状切割法接种原球茎于1/2MS+30 g·L~(-1)白糖的培养基添中并以固体方式培养时利于原球茎分化成试管苗;以整体剥离法接种原球茎于3MS+20 g·L~(-1)蔗糖培养基中并以液体静置方式培养时利于原球茎保存。上述结论为大花蕙兰试管苗快速繁殖与离体保存提供了有效的技术支持。