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为了寻求水稻中快速定量检测呋虫胺的方法,稻田土壤、糙米、稻壳及植株样品采用改良的QuEChERS法处理,稻壳和植株样品采用PSA和C18吸附剂净化,LC-MS/MS检测,外标法定量,建立改良QuEChERS/LC-MS/MS联用分析检测水稻田中的呋虫胺.结果表明:在0.015～0.4 mg/kg添加水平范围内,稻田土壤、糙米、稻壳以及植株中的平均回收率分别为92.32％～97.45％,93.90％～101.0％,84.30％～99.20％和77.50％～79.00％;相对标准偏差(RSD,n=5)分别为3.52％～4.32％,1.20％～2.60％,0.60％～3.30％和1.20％～2.00％.此方法的最低检测限(LOD)为1.75×10-12 g,最低定量限(LOQ)为5.84×10-12 g.该方法前处理简便,快速,灵敏度高,重现性好,符合农药检测分析的技术要求.     

皱盖假芝乙醇提取物的LC-MS/MS分析及其体外抗肿瘤活性

[目的]假芝(Amauroderma rugosum)又名血芝,我国野生假芝资源丰富,了解野生假芝提取物的主要成分及其体外抗肿瘤活性,为真菌源抗肿瘤药物筛选提供理论依据.[方法]采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析皱盖假芝乙醇提取物成分,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检...     

沙蚕不同酶解产物抗氧化效果研究

海洋生物蛋白资源是海洋生物资源的重要组成部分,对其进行高值化加工利用是海洋生物技术研究的重要内容,酶解是提高海洋蛋白功能性的有效方式,但酶种类不同,其作用位点不同,可能对酶解产物的活性有一定影响。为了探究了沙蚕不同酶解产物的抗氧化性,采用6种蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶）酶解沙蚕,测定了不同酶解时间下的水解度、分子量分布、3种自由基（DPPH、O-2·、·OH）的清除率等反映抗氧化水平的指标。结果表明：胰蛋白酶小分子肽得率最高,为70.47%;胃蛋白酶次之,为68.12%。酶解液浓度为5 mg·mL-1时,胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解4 h时,DPPH清除率效果较好,分别为90.87%和90.52%。胃蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果最佳,为89.78%;木瓜蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果次之,为57.99%。碱性蛋白酶酶解4 h和胃蛋白酶酶解2 h时,·OH清除率效果较好,分别为85.07%和83.37%。胰蛋白酶和胃蛋白酶对提高酶解液水解度和小肽生成作用明显,胃蛋白酶的酶解产物对3种自由基清除率较好,更适用于制备沙蚕抗氧化肽。     

皱盖假芝乙醇提取物LC-MS/ MS分析及体外抗肿瘤活性

【目的】假芝（Amauroderma rugosum）又名血芝,我国野生假芝资源丰富,了解野生假芝提取物的主要成分及其体外抗肿瘤活性,为真菌源抗肿瘤药物筛选提供理论依据。【方法】采用液质连用（LC-MS/ MS）分析假芝醇提取物成分,3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测假芝不同溶剂萃取物对人结肠癌细胞HCT-116和人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。【结果】皱盖假芝初生菌丝经PDA分离,长势良好,可栽培特性强;液-质联用色谱检测表明,皱盖假芝子实体的乙醇提取物在正离子模式下有11个主要化合物,在负离子模式下有19个化合物。假芝提取物能有效抑制HepG2和HCT-116的增殖,其中石油醚提取物对HepG2半抑制浓度IC50为69.85 μg/mL,正丁醇提取物对HCT-116半抑制浓度IC50为136.2 μg/mL。【结论】皱盖假芝乙醇提取物中主要成分为脂肪酸。假芝不同溶剂萃取物对人结肠癌细胞HCT-116和人肝癌细胞HepG2增殖具有抑制作用。     

奶牛胎盘还原性多肽不同蛋白酶酶解方法建立与优化

为高效制备奶牛胎盘还原性多肽,试验选择自然分娩脱落健康中国荷斯坦奶牛新鲜胎盘,冰浴条件下12000 r·min-1匀浆化,分别采用木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解,以奶牛胎盘组织匀浆为底物,基于Box-Behenken中心响应法,在底物浓度10％、30％、50％,酶底比1％、3％、5％,酶解时间3、5、7 h条件下制备胎盘多肽...     

LC-MS/MS方法检测家兔组织中的灰黄霉素

本研究建立了家兔组织中灰黄霉素的高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。将灰黄霉素标准液按一定量加入到肝、肾、肌肉、皮肤及脑组织的匀浆中,以盐酸普萘洛尔为内标,采用二氯甲烷萃取法进行提取,用LC-MS/MS法进行灰黄霉素的组织浓度测定。结果表明,家兔肌肉、肾及肝中灰黄霉素含量的检测线性范围为1.08～249 ng/mL,皮肤、脑组织中灰黄霉素含量的检测线性范围为1.08～51.87 ng/mL;肌肉、肝、肾、皮肤和脑组织中灰黄霉素的定量检测下限为1.08 ng/mL。本研究建立的LC-MS/MS可用于家兔组织中灰黄霉素的检测。     

滞育期九香虫卵巢组织蛋白的LC-MS/MS鉴定

九香虫的越冬滞育是影响其大规模人工繁殖的桎楛,保幼激素可调控九香虫的滞育,并可促进卵巢发育.为探索滞育期九香虫卵巢组织蛋白的组成,本研究提取滞育期与滞育解除期的九香虫卵巢组织蛋白,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行初步分析,液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对胰酶消化产生的肽段混合物进行分析.结果表明,质...     

LC-MS/MS法测定动物源食品中呋喃西林代谢物不确定度的评定

利用LC-MS/MS法对动物源性食品中呋喃西林代谢物SEM残留量的不确定度进行分析评定,结果表明:测定添加水平0.50μg/kg的硝基呋喃类代谢物残留量的结果可表示为:X(SEM)=(0.51±0.06)μg/kg,包含因子k=2。     

双酶分步酶解蚕蛹蛋白及其产物抗氧化活性的研究

以蚕蛹蛋白作为原料,选择出一种中性蛋白酶,与酸性蛋白酶结合,组成复合蛋白酶对蚕蛹蛋白进行了联合分步酶解。从总抗氧化能力、清除DPPH·能力、抑制羟基自由基能力、抗超氧阴离子自由基能力等方面分析了酶解产物蚕蛹蛋白肽的抗氧化活性,表明混合蛋白酶分步水解蚕蛹蛋白所得产物具有良好的抗氧化活性。     

LC-MS/MS法测定野生青风藤中木兰花碱和青藤碱含量

采用LC-MS/MS技术建立野生青风藤中木兰花碱和青藤碱含量的测定方法。以水-乙腈溶液为流动相梯度洗脱,以Kromasil Eternity-5 C18 色谱柱（2.1 mm × 50 mm,5 μm）为分析柱,电喷雾离子源,正离子模式,选择离子监测（SRM）。木兰花碱和青藤碱分别在20.6～412 ng·mL^-1和29.5～590 ng·mL^-1的范围内线性良好,相关系数均大于0.99。方法专属性良好,木兰花碱和青藤碱的平均加样回收率分别为99.09%和 {98.95% },RSD分别为1.99%和1.65%。所建立的LC-MS/MS方法简单、灵敏,适用于野生青风藤中木兰花碱和青藤碱含量的检测。     

液相色谱串联质谱检测动物源性食品中莫西丁克残留

[目的]建立动物源性食品中莫西丁克残留的检测方法。[方法]首先对样品净化方法和试验参数进行了优化。利用乙腈对样品中莫西丁克进行提取,利用分散型固相萃取净化莫西丁克,利用液相色谱串联质谱测定动物源性食品中莫西丁克的含量。[结果]最佳质谱条件为：离子源温度300℃、喷雾针压力15 Psi、干燥气流速6 L/min。在此条件下,子离子峰的响应值最高。该方法的检测限为0.005 mg/kg,当在添加浓度0.005～0.02 mg/kg时,回收率为81.08%～113.72%,RSD为4.21%～9.69%。[结论]该方法步骤简单、可操作性强、有机溶剂用量少、成本低、杂质干扰少,有良好的精密度及较低的方法检测低限,适于动物源性食品中莫西丁克的快速测定。     

LC—MS／MS法测定动物源食品中呋喃西林代谢物不确定度的评定

利用LC—MS／MS法对动物源性食品中呋喃西林代谢物SEM残留量的不确定度进行分析评定,结果表明：测定添加水平0．50μg／ks的硝基呋喃类代谢物残留量的结果可表示为：^-X（SEM）=（0．51±0．06）μg／kg,包含因子k=2。     

自动QuEChERS方法结合液相色谱串联质谱对玉米中133种农药的多残留分析

基于QuEChERS(快速、简单、廉价、高效、耐用、安全)方法,借助自动QuEChERS前处理设备,结合LC-MS/MS测定手段,建立了简单、高效的同时检测玉米中133种农药多残留分析方法——自动QuEChERS。本方法将QuEChERS提取和净化两个步骤在同一设备上一次完成,操作要求低,解放了劳动力,提高了工作效率,进一步提高了实验重现性。结果表明:所有待测农药在3个添加浓度(20、100、500μg·kg~(-1))的回收率在70%~120%之间(n=5),相对标准偏差小于15%。最低定量限达到2μg·kg~(-1),在2~500μg·kg~(-1)线性范围内,相关系数大于0.99。     

猪胃组织中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的液质联用检测

以脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素(Deoxynivalenol,DON)为检测对象,建立了一种检测猪胃组织中DON的液质联用分析方法。样品经乙腈:水(80:20,V/V)提取,varian Bond Elut Mycotoxin净化柱净化后,收集提取液并于45℃水浴氮气吹干,乙腈:水(20:80,V/V)溶解,经0.22μm微孔滤膜过滤后,以反相C18柱为色谱柱,甲醇、纯水溶液梯度洗脱为流动相,电离离子源电离后质谱检测。结果显示,DON在2～100 ng/mL范围内线性关系良好(r2>0.99);检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为2μg/g和5μg/g;低、中、高浓度(5、20、50μg/g)的回收率分别为71.8%、89.5%、87.4%,RSD分别为6.75%、9.82%、6.39%。表明该方法操作简单,灵敏度高,适用于猪胃组织中DON的检测。     

小麦叶片蛋白质组的2D-LC分离及Nano LC-MS/MS分析

 【目的】二维液相色谱（2D-LC）与双向电泳（2-DE）技术具有互补性,本文旨在探讨利用2D-LC和纳升级液相色谱串联质谱（Nano LC-MS/MS）技术分离鉴定小麦叶片蛋白质组的新方法。【方法】小麦叶片蛋白经提取、脱盐后,进行第一维阴离子交换分离;收集洗脱组分进行SDS-PAGE分析,并对非高丰度蛋白组分进行第二维反相液相色谱分离;随机选择含较低吸收峰的部分组分经胰蛋白酶水解后进行Nano LC-MS/MS 分析;将串联质谱数据通过MASCOT搜索NCBInr和EST数据库,并对二级质谱获得的蛋白序列进行MS BLAST分析。【结果】经第一维阴离子交换色谱分离,收集得到15个组分,其中第15组分包含小麦叶片丰度最高的蛋白——1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶（RuBisCO）;其余14个组分经反相液相色谱分离,共收集1 551个组分,获得1 867个色谱峰;随机对其中6个含较低吸收峰的收集组分酶解和Nano LC-MS/MS 检测,9种蛋白得到鉴定。【结论】结果初步表明,利用2D-LC和Nano LC-MS/MS技术可有效地分离和鉴定小麦叶片蛋白质组,为更深入全面地研究小麦叶片蛋白质组奠定基础。     

液相色谱-串联质谱法检测黄瓜中5种有机磷农药残留

建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时检测黄瓜中敌百虫、乐果、敌敌畏、杀螟硫磷、毒死蜱5种有机磷农药残留的方法。样品经过丙酮提取,弗罗里硅土净化,以甲醇-水(水相含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,采用ZORBAX SB-C18(5μm×2.1 mm×150 mm)色谱柱分离,电喷雾离子化正模式(ESI+)离子化,多反应监测模式(MRM)下测定。结果显示:方法标准曲线线性良好,R2≥0.998;乐果与敌敌畏的定量限为0.002 mg.kg-1,敌百虫、杀螟硫磷和毒死蜱的定量限为0.01mg.kg-1;回收率为72%～98%,相对标准偏差(RSD)≤3.6%。表明:该方法可实现对5种有机磷农药的同时快速测定,目标农药的响应值高,检测限低,能够为生食蔬菜风险评估研究提供准确有效的数据支持。