牛细管精液冷冻温度曲线的研究

牛冷冻精液精子复苏率的高低与原精质量、精子耐冻性、稀释液种类、稀释方法及精液冷冻和解冻速度等因素有关。其中，精液在冷冻过程中温度变化曲线是影响精子复苏率高低的重要因素之一。研究细管精液在不同条件下冷冻，精液温度变化曲线及精子复苏率变化的规律，优选出细管精液最适宜的冷冻温度曲线，可以为提高牛冷冻精液质量提供重要保障。     

黄牛冻精配种应注意抓好的6个环节

为提高冷冻精液的受胎率，根据我们多年实践，在实施过程中注意抓好以下6个环节。 1 冷冻精液的保存、分发和运输 冷冻精液在保存过程中，如果温度上升到一定程度，将会造成精子衰弱、死亡、活率降低等现象。因此要保证在-130℃以下保存，为此冷冻精液在分发 和运输过程中必须认真做到：第一，经常检查贮精容器的有效性；第二，夹取颗粒冷冻精液时，不要离开液氮罐颈口太远，动作要迅速，以免温度回升影响 存活率；第三，保存期间要经常检查液氮的消耗情况，容量不足1/4时要及时补充；第四，分发计数时，应在液氮中进行，并记录在案，同时抽检冻精，不合 格的精液不下发。     

冷冻温度对牛精子复苏率及降温速率变化规律的研究

[目的]为了探讨温度变化对牛精子复苏率的影响,找到降温度变化规律。[方法]利用电脑程控冷冻仪、自动数字测温仪,测定精液在不同温度冷冻精子复苏率变化。[结果]表明,精液在-98℃冷冻精子复苏率最高;在-86- -118℃冷冻精子复苏率较高,精液相变适宜降温速率为35℃/min。[结论]控制精液发生相变阶段的降温速率是冻精制作成败的关键。     

平衡温度对种公牛冷冻精液制作效果的影响

本试验将三头种公牛的精液稀释、平衡,封装后各分为5组,经不同的平衡温度后进行冷冻,检查牛冷冻精液解冻后的精子活力、顶体完整率、畸形率、37℃4h存活率。结果表明,牛冷冻精液在制作过程中,最佳平衡温度为4℃,在此条件下,冻精质量可以达到国家标准。     

温度对犬精液冷冻保存的研究

本实验在以往研究的基础上进一步研究了冷冻起始温度(始冻温度)、解冻温度对精子活率的影响.实验结果表明:始冻温度为-70℃时冻后精液质量最好,冻后镜子活率达0.6284±0.0408,优于-65℃和-75℃时的冻后精子活率;解冻温度为70℃时对解冻后精液质量最好,达0.6810±0.0324,明显优于60℃和65℃的精子活率.     

种公牛精子耐冻性对比试验

精子耐冻性一般用冷冻精液解冻后精子的复苏率和精子顶体完整率来比较.对于种公牛,冷冻精液解冻后精子的复苏率和顶体完整率越高,其耐冻性越好.为探讨种公牛品种、年龄、个体等因素对耐冻性的影响,进行了试验观察.     

黄牛冻精配种把五关

目前,牛的人工授精冷冻精液应用比较普遍,为保证黄牛冻精配种的受胎率,在实施过程中应注意抓好以下五个环节。 (一)把好冷冻精液的保存、分发和运输关冷冻精液在保存过程中,如果温度上升到一定程度,将会造成精子衰弱、活力降低,甚至死亡等现象。因此要保证冷冻精液在零下130℃以下保存。为此冷冻精液在分发和运输过程中必须认真做到:(1)经常检查贮精容器的有效性;(2)夹取颗粒冷冻精液时,不要离开液氮罐颈口太远,动作要迅速,以免温度回升影响存活率;(3)保存期间要经常检查液氮的消耗情况,容量不足1/4时要及时补充;(4)分发计数时,应在液氮中…     

牛精液的贮存、解冻及品质检查

1冷冻精液的贮存和解冻方法牛的冷冻精液是以液氮做冷源进行贮存的,需要时可随时取出。为防止温度变化对精液品质的影响,取放动作要迅速,尽量减少在空气中停留的时间。从贮存容器中提取冷冻精液时,精液不应超过液氮容器的颈基部,避免因温度的回升造成精液解冻活率的下降。冷冻精液的解冻过程会影响精子的活力,要注意解冻的温度和操作方法。最初世界各国对解冻温度的要求不同,大体可分为高温40℃、室温15￣20℃和冷水10℃,当前认为40℃左右解冻效果最好。随着解冻温度的降低,精子活率有逐渐降低的趋势。颗粒精液解冻多采用将颗粒精液投入一定…     

低温平衡技术在种牛冷冻精液生产中的应用研究

所谓“低温平衡技术”就是在种牛冷冻精液生产过程中,创造出适合精子在超低温冷冻过程中最大程度免受低温损伤的一种保护性技术措施.它包含两个技术关键：一是精液的稀释、低温平衡：即采集的精液经检查合格后,要立即进行稀释和平衡.稀释的目的,主要是供给精子能量来源和有效保护成分,防止低温打击对精子的有害影响;提供缓冲剂以防止精液中精子在代谢过程中产生的酸性物质导致pH值过低的有害影响,维持渗透压和电解质平衡和抑制细菌的生长繁殖;平衡的目的,主要是使精液的温度平缓、均匀地降至4℃,从而尽量减小温度变化对精子的打击,缩短精液通过危险温区（0℃～15℃）的时间,提高精子的冻后活力;二是提供适宜、均衡的低温作业环境——低温平衡柜,在种牛冷冻精液生产过程中,从一次稀释后的低温平衡、二次稀释,再平衡,到分装、上架、冷冻、收集、包装等一系列操作环节,都要求在0℃～4℃的低温平衡柜中进行,使精子在冷冻生产整个过程中免受温度变化带来的损害.     

新疆驴细管冻精的制作

试验旨在研究新疆驴细管冻精制作过程中精液冷冻液、降温平衡时间及液氮熏蒸时间对精子冻后活力的影响。研究共设计3个试验。试验1对比了INRA-Freeze、Optidyl、房氏驴精液冷冻保存液、自配马精液冷冻冷冻液等4种精液冷冻液在精子冷冻过程对精子冻后活力的影响,筛选出适合制作新疆驴细管冻精的冷冻液;试验2探索在细管冻精制作过程中平衡90、120、150 min对精子冻后活力的影响;试验3比较在细管冻精制作过程中使用液氮熏蒸5、6、7、8、9、10 min时对精子冻后活力的影响,探索液氮熏蒸的最佳时间。结果显示,使用INRA-Freeze冷冻液或房氏冷冻液在冷冻过程中对精子的损伤最小;冷冻过程中,降温平衡90、120、150 min对精子冻后活力的影响差异不显著（P>0.05）;在冷冻过程中液氮熏蒸7 min时精子冻后活力最高,显著高于熏蒸5、9、10 min的精子冻后活力（P<0.05）,与熏蒸6、8 min时精子冻后活力差异不显著（P>0.05）。研究表明,为降低成本可使用INRA-Freeze冷冻液稀释精液,于冰箱中平衡90～150 min后装入0.5 mL的细管...     

影响犬精液冷冻效果的因素分析

精液冷冻是影响犬人工授精技术的关键环节,由于冷冻效果不稳定,冻后精子活力差,造成人工授精成功率低,平均窝产仔数少,影响到该技术在国内的广泛使用。犬精液冷冻是一项系统的技术,影响犬精液冷冻效果的因素也是多方面的。综述了精液冷冻保护剂、质膜保护剂、抗氧化保护剂、冷冻程序和冷冻方法等因素对犬精液冷冻效果的影响。     

犬精液冷冻及解冻技术研究

犬冷冻精液质量的好坏直接影响受胎率 ,影响养犬户的经济效益。而冻精解冻后精子活动和生存时间 (解冻后 37℃保存 4ｈ精子活力 )又是冷冻精液质量中最重要的两个指标。我们进行了同一样品 ,采用不同温度解冻 ,对冻后精子活力及生存时间影响的对比试验。目的是寻找最佳的解冻温     

不同温度解冻对冻后精子活力及生存时间的影响

不同温度解冻对冻后精子活力及生存时间的影响郝爱玲阿淑艳李淑坤（黑龙江省家畜繁育指导站哈尔滨１５００６０）牛冷冻精液质量的好坏，直接影响受胎率，影响着养牛户的经济效益。而冻后精子活力及生存时间（解冻后３７℃保存４小时精子活力）又是冷冻精液质量中最重要的...     

不同冷冻曲线对种公牛精液冷冻质量的影响

种公牛精液的冻后活力是评定冷冻精液品质好坏的重要指标之一,也是影响牛人工授精受胎率的重要因素.影响冻精解冻后活力的因素包括种公牛个体差异(鲜精品质、耐冻性)、稀释液(甘油浓度、稀释液成分)、生产工艺(稀释方法、平衡、冷冻方法、冷冻曲线)和解冻方法等.而冷冻速度,即精子通过对细胞产生致死性伤害的0～-60℃温度区的速度,是决定冷冻精液冻后品质好坏的关键所在.     

牛冷冻精液保存时间对精液品质及其受精能力的影响

为探究不同冷冻精液保存时间对荷斯坦奶牛精液品质及其受精能力的影响,选取北京奶牛中心冻存1年(A冻精)、冻存3年(B冻精)及冻存13年(C冻精)的3批精液进行研究。利用精子分析仪分析精子运动能力,台盼蓝染色鉴定精子活率,检测精子顶体完整率、线粒体功能以及DNA完整性,利用体外受精技术检测卵裂率和囊胚率,Realtime PCR检测弱精子症相关蛋白基因表达水平。结果显示:3批精液的精子活力和直线性随冷冻时间延长逐渐下降,精子活率也显著下降;3批冷冻精液的卵裂率和囊胚率随冷冻时间延长显著下降;精子线粒体功能分析结果表明,A精液线粒体膜通道孔相对荧光单位(RFU)值和线粒体活性光密度(OD)值最高(P0.05),C精液最低(P0.05);精子DNA完整性检测结果显示,随冷冻时间延长,精子拖尾率显著增加;弱精子症相关蛋白的基因表达趋势并未显现出与体外受精结果相一致的趋势。研究证明,随着冷冻保存时间的延长,精子活力、精子线粒体功能以及精子DNA完整性逐渐下降,最终导致精子受精能力下降。     

离心对绒山羊精液冷冻效果的影响

选用8只精液品质良好的岢岚绒山羊成年公羊,采精后将精液混合,等分为2份,一份不离心(对照组),4倍稀释后颗粒冷冻;另一份在2 000 r/min下离心10 min,弃去上清,补充等体积稀释液,再4倍稀释后颗粒冷冻.探讨离心对冷冻前后的精液品质及其相关酶活性的影响.结果表明,离心可显著提高冻前冻后精子活率、弯尾率和顶体完整率,显著降低精子的畸形率和获能率(P＜0.05);离心组冻前冻后精泣的GOT活性、LDH活性、GPT活性显著低于对照组(P＜0.05),精浆果糖含量显著高于对照组(P＜0.05).表明,离心处理可明显提高绒山羊精液冻前冻后的品质.     

水牛精液细管冷冻试验

对水牛细管冷冻精液的稀释液、平衡时间、始冻温度、冷冻时间、降温速度、解冻温度和时间以及输精等进行了试验。结果表明,水牛细管冷冻精液解冻后精子活率为0.4～0.6,输精196头的情期受胎牛为63.3％。     

谷胱甘肽对蒙贝利亚种公牛性控精液冻后效果的影响

本研究通过两个试验探讨谷胱甘肽(GSH)对蒙贝利亚种公牛性控精液冻后效果的影响。试验一,在冷冻稀释液中添加GSH,最终浓度分别为0(对照)、0.5、0.75和1.0mmol/L,观察对性控精液冷冻效果的影响。结果表明,0.75mmol/L组的性控精液冻后精子活率(42.2%)极显著高于对照组(39.2%)(P0.01);0.5mmol/L组冻后活率(40.9%)与对照组相比没有显著差异(P﹥0.05);0.75mmol/L组冻后活率优于0.5mmol/L组,但二者差异不显著;1.0mmol/L组冻后活率(34.90%)极显著低于对照组和其他试验组(P0.01),说明GSH添加量过大对性控精液冷冻效果不利。试验二,在分离前、分离后和冷冻前分别添加GSH,研究对蒙贝利亚牛性控精液冷冻效果影响。即在原精液分离前,在染色液中添加GSH,使最终浓度达0.75mmol/L,然后进行分离;在分离后平衡前精子的缓冲液中添加GSH使其最终浓度达0.75mmol/L,然后平衡;离心后冷冻前在冷冻保护液中再次添加GSH使其最终浓度达0.75mmol/L。对照组不添加GHS,然后分别观察冻精解冻效果。结果表明,试验组性控精液冻后活率(43.5%)显著高于对照组(40.5%),此外,与对照组相比,添加GSH组的精子运动状态表现更加强劲,持续力强。两个试验结果都表明,GSH对性控精液细管剂量、前进运动精子数以及性别准确率等指标没有影响。     

影响种公牛精子耐冻性的因素

精子冷冻过程中经受耐冻的能力叫做耐冻性。一般用冷冻精液解冻后精子的复苏率来比较耐冻性，复苏率高的，牛精子的耐冻性较好，相反，耐冻性较差。对于种公牛，其耐冻性越好，冷冻精液解冻后精子的复苏率就越高，在同样精液量、同样密度的情况下，能生产出更多的冻精产品。因此，全面掌握种公牛精子耐冻性，能够有效地确定合理的稀释倍数，充分发挥种公牛的利用率。     

小鼠精子冷冻及冻融精子体外受精研究

为了探索一种高效的小鼠精子冷冻方法,试验利用棉籽糖和脱脂奶粉作为冷冻保护剂进行精子冷冻保存,然后再通过精子复苏、体外受精试验,比较冷冻保存复苏后的精子与新鲜精液中精子在受精卵率、2-细胞率、囊胚率方面的差异。结果表明:本方法冻存的精子受精率为70.3%,2-细胞率为58.3%,囊胚率为41.7%,与新鲜精液相比差异不显著(P0.05)。说明本方法适用于小鼠精子冻存。