优化金黄色葡萄球菌基因组DNA的提取方法

为提取金黄色葡萄球菌DNA,比较了酶解法、丙酮-酶解法、玻璃珠机械法等破壁方法,确定玻璃珠破壁法为最优提取方法。该方法无需对样品进行增菌,可直接从乳品中提取金黄色葡萄球菌DNA。     

黄芩苷制备工艺的优化

采用单因素试验,对醇提酸沉法制备黄芩苷工艺的影响因素进行了考察.当温度为80℃,并保温时间为60 min,酸沉pH值为2时,黄芩苷产率及黄芩苷纯度均较高,分别为18.39%和39.98%.同时,比较了一次酸沉、二次酸沉以及三次酸沉粗粉中黄芩苷的纯度.结果表明,一次酸沉粗粉的黄芩苷纯度与二次、三次酸沉产品没有明显区别,此时通过重结晶可以得到纯度高达86.14%的黄芩苷产品.     

黄芩总黄酮·黄芩苷提取及纯化工艺研究

[目的]确定黄芩总黄酮与黄芩苷提取及纯化的最佳工艺条件。[方法]以黄芩总黄酮与黄芩苷得率作为评价指标,采用单因素及正交试验进行优选。[结果]最优工艺为:取黄芩粗粉,加10倍量水,煎煮2次,1.0 h/次;离心所得上清液调pH值至1.5,60℃保温30 min,所得沉淀加适量水搅匀,调pH值至中性,加等量乙醇醇沉;上清液再调至pH值为1.5,60℃保温30 min,静置、离心所得沉淀,水洗至中性,60℃真空干燥得黄芩提取物。其中,黄芩总黄酮、黄芩苷含量分别可达94.15%、80.15%。[结论]该工艺合理、可行,适合黄芩总黄酮、黄芩苷的工业化生产。     

芡种壳多酚超声辅助提取工艺优化及其对金黄色葡萄球菌的抑制效果

【目的】优化芡种壳多酚提取工艺,并分析其对金黄色葡萄球菌的抑制作用和抑菌稳定性,为芡种壳的资源化利用提供参考依据。【方法】采用超声辅助法提取芡种壳多酚,以多酚提取率（Y）为评价指标,对超声时间（X₁）、超声温度（X₂）和料液比（X₃）3个因素进行单因素和响应面试验,确定最佳提取工艺,初步纯化;采用琼脂扩散法研究芡种壳多酚对金黄色葡萄球菌的抑制活性,并测定最小抑菌浓度（MIC）,同时考察温度、pH及金属离子浓度对芡种壳多酚稳定性的影响。【结果】3个因素对芡种壳多酚提取率影响的大小为:超声温度>料液比>超声时间,料液比及超声温度与料液比的交互作用对芡种壳多酚提取率有显著影响（P< 0.05）,超声温度对多酚提取率有极显著影响（P< 0.01）。得到回归方程Y=14.57+0.064X₁+0.26X₂+0.11X₃+0.079X₁X₂-0.018X₁X₃-0.18X₂X₃-0.11X₁2-0.54X₂2-0.19X₃2;最佳提取工艺为:超声时间39 min、超声温度72 ℃、料液比1:41,在此条件下,芡种壳多酚提取率为14.479%,与预测值（14.630%）接近;芡种壳多酚对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,MIC为0.1625 mg/mL;温度及Ca2+、Mg2+、K+、Na+4种金属离子对芡种壳多酚抑制金黄色葡萄球菌活性不具有显著影响（P> 0.05）,而随着pH的增加,芡种壳多酚抑菌活性受到抑制。【结论】采用优化的超声辅助法可有效提取芡种壳中多酚物质,提取到的多酚对金黄色葡萄球菌的生长具有良好且较稳定的抑制效果。     

蜂王浆中抗金黄色葡萄球菌肽的分离

分别用透析法和DEAE离子交换层析法分离蜂王浆抗金黄色葡萄球菌肽.用透析法分离获得了分子质量≤3.5 ku、介于3.5 ku与12 ku之间以及≥12 ku的3种组分,测定结果显示分子质量≤3.5 ku和介于3.5 ku与12 ku之间的蜂王浆组分具有抗金黄色葡萄球菌的活性.用DEAE离子交换层析法分离了分子质量≤3.5 ku和介于3.5与12 ku之间的2种蜂王浆透析组分,其中分子质量≤3.5 ku的6个离子交换分离组分中,组分1和组分6具有抗金黄色葡萄球菌活性;分子质量介于3.5 ku与12 ku之间的6个离子交换分离组分中,组分1具有较强的抗金黄色葡萄球菌活性.     

红线虫抗菌肽提取条件的工艺优化

以红线虫(Limnodrilus hoffmeisteri)为材料,采用0.01 mol/L EDTA-2Na的0.9%NaCl溶液为浸提液提取有抑菌活性的多肽,以料液比、时间、pH值对红线虫抗菌肽提取条件进行3因素3水平正交试验优化提取工艺,并对处理结果进行多重比较。试验结果表明,红线虫抗菌肽对大肠杆菌没有抑菌效果,对金黄色葡萄球菌有一定抑制效果;影响浸提效果的主要因素为料液比,次要因素为浸提时间和pH值,提取的最优处理组合:料液比1 g∶15 mL,浸提时间8 h,浸提液pH值为7.2。     

赤芍黄芩配伍微波提取工艺研究

以乙醇溶液为溶剂,采用微波法提取赤芍黄芩配伍中的主要成分芍药苷和黄芩苷,用高效液相色谱法测定芍药苷和黄芩苷含量.采用正交设计和单因素试验考察了微波功率、进料泵频率、提取溶剂体积分数、料液此、浸泡时间等因素对有效成分提取率的影响.结果显示优化的提取工艺条件为原料提取前浸泡9h,微波提取功率36 kW,进料泵频率为9 Hz,体积分数50％的乙醇作为提取溶剂,料液比为1∶12(m∶V,g/mL),此时芍药苷和黄芩苷的提取率分别为1.84％和2.91％.优化的微波提取法所得有效成分提取率高于超声提取法和回流提取法.     

沙门氏菌和金黄色葡萄球菌3种DNA提取方法的比较

[目的]对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌不同的DNA提取方法进行评价。[方法]采取3种不同的方法对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的DNA进行提取,利用全波长紫外/可见光扫描分光光度计比较其浓度和纯度。[结果]方法 3提取的DNA质量最好,浓度和纯度都较高,方法 1提取的DNA质量次之,纯度较高,浓度次之,方法 2提取的DNA浓度一般,但存在碳水化合物或盐类污染。[结论]方法 3是一种适用于沙门氏菌和金黄色葡萄球菌以及其他病原菌的有效提取方法。     

金黄色葡萄球菌荚膜多糖的提取及其多糖含量的测定

为提取纯化金黄色葡萄球菌荚膜多糖并测定多糖含量.采用超声波破碎菌液,用CTAB结合其中的多糖、CaCl2解离、乙醇沉淀等化学方法提取纯化金黄色葡萄球菌荚膜多糖,利用苯酚-硫酸法测定其含量.结果显示,得到荚膜多糖0.31 g,含量为65.06%.结果表明,成功提取金黄色葡萄球菌荚膜多糖,并对其含量进行了测定,初步确定了粗提金黄色葡萄球茵荚膜多糖的方法.     

不同方法对金黄色葡萄球菌基因组DNA提取效果的比较

分别采用酶解法、CTAB法、SDS法、CTAB/NaCl法等4种方法提取金黄色葡萄球菌基因组DNA,并进行比较改良。结果表明,SDS法提取的DNA含量最高;当金黄色葡萄球菌的DNA质量稀释至1.975×10-4pg时,SDS法提取的DNA仍能用于PCR扩增;此外,该方法稳定性好、经济性高,是理想的金黄色葡萄球菌基因组DNA提取方法。     

矮壮素对盆栽黄芩的矮化效果

为探明矮壮素对盆栽黄芩的矮化效果,采用不同质量浓度的矮壮素拌土、叶面喷施、根部浇灌3种处理方式对矮壮素的效果进行了研究。结果表明：0．02～0．06mg／盆：的矮壮素拌土处理,可使盆栽黄芩株型矮化．生长势减弱,叶面厚度增加,叶面积减小,叶片绿色加深,根系活力增加,能有效提高盆栽黄芩的观赏价值。     

黄芩愈伤组织培养与快速繁殖条件的优化研究

[目的]培养黄芩优良品种并进行克隆化快速繁育。[方法]用黄芩(Scutellaria baicalensisGeorgi)无菌根作为外植体进行愈伤组织的诱导、分化,黄芩试管苗的继代扩大繁殖、生根等一系列优化试验。[结果]MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基进行愈伤组织的分化培养效果最好;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA进行试管苗的复壮效果较好;最有效的生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L NAA,生根率可达96.7%。[结论]采用单节培养的方法,可以大幅度提高黄芩繁殖速度。     

黄芩组织培养研究进展

从组织培养、细胞悬浮培养、多倍体诱导、克隆技术等方面综述黄芩组织培养技术应用的研究进展。     

黄芩中黄芩苷提取方法的研究进展

黄芩苷是黄芩的主要活性组分,在医药、食品和保健品等领域应用广泛。黄芩苷的提取是其应用的关键问题。本文就黄芩苷的主要提取工艺进行了综述,以期为黄芩苷的提取提供参考,同时为黄芩苷药理作用研究奠定基础。     

山西黄芩种植存在的问题及对策

黄芩是山西的道地药材,深受国内外市场青睐。介绍了黄芩的生物学特性和我国黄芩种质资源现状。根据山西黄芩的种植历史和现状,分析了山西黄芩种植中存在的主要问题,并提出了相应的对策及其发展方向。     

四倍体黄芩D20组织培养与快速扩繁

以四倍体黄芩D20幼枝为外植体,MS+6-BA 2.0 mg/L为诱导培养基,MS为分化培养基,1/2 MS+NAA 0.4 mg/L为生根培养基,建立其组织快繁体系。     

3种黄芩黄酮物质体外抗弓形虫效果比较试验

为探讨黄芩中主要成分对弓形虫的抑制效果,利用MTT法对黄芩乙醇提取物、黄芩苷、黄芩素进行体外抗弓形虫作用比较试验。结果表明:3种物质均能有效地抑制弓形虫的生长繁殖,其中黄芩素的抗虫效果最好,黄芩乙醇提取物次之,黄芩苷最弱,即黄芩黄酮主要物质中,黄芩素体外抗虫作用最好。     

黄芩资源和栽培研究进展

黄芩是中国常用大宗中药材之一,药用历史悠久,药效功能显著,具有广泛的应用前景。本文通过查阅近几年发表的相关文献,从黄芩的分布、种质资源评价、繁育和栽培等方面进行了总结整理,并探讨了黄芩资源和栽培研究中存在的主要问题,提出了今后研究重点和方向。     

黄芩种质资源及培育技术研究进展

在黄芩野生资源日益匮乏与人类对黄芩需求量日益增长的今天,黄芩资源的培育倍受重视,人工栽培黄芩已成为人们关注的重要领域.该文对近年来关于黄芩种质资源生物学特性、繁殖方法、田间管理、合理采收及生物技术的应用等几个方面的研究进行了综述.为提升黄芩资源的人工培育水平积累基础资料,进而为提高我国人工栽培黄芩的产量与质量,为推进黄芩培育产业化发展提供技术信息.